一种制备Caesalmin F的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备Caesalmin F的方法，包括：步骤S1，取云实种子粉末，用75％乙醇热回流提取，过滤，滤液减压浓缩至无醇味；步骤S2，富集：将浓缩至无醇味的提取液上样于AB‑8型大孔吸附树脂柱，树脂柱内径12cm，树脂柱床高度120cm，提取液上样量为2个柱体积，上样结束后关闭阀门静态吸附30min；先使用20％乙醇洗脱10个柱体积除杂，再使用70％乙醇以15mL/min的流速洗脱，收集第9个柱体积的70％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物。步骤S3，将富集物用HSCCC分离纯化。本发明专利技术提供的方法步骤少、分离快，分离制备得到的化合物纯度高。

A Method for Preparing Caesalmin F

The invention discloses a method for preparing Caesalmin F, which includes: extracting seed powder of Yunshi, extracting with 75% ethanol by hot reflux, filtering and decompression of filtrate to concentrate to non-alcoholic taste; enriching: sampling the concentrated extract to non-alcoholic taste on AB 8 macroporous adsorption resin column, resin column diameter 12 cm, resin column bed height 120 cm, and extract Volume 2 column volumes. After sampling, the valve was closed for 30 minutes, 10 column volumes were eluted with 20% ethanol to remove impurities, and then 70% ethanol was eluted with 15 mL/min flow rate to collect 70% ethanol eluent of the 9th column volumes and concentrate and dry to obtain the concentrate. The enrichment was separated and purified by HSCCC. The method provided by the invention has the advantages of less steps, fast separation and high purity of the compounds obtained by separation and preparation.

【技术实现步骤摘要】
一种制备CaesalminF的方法
本专利技术属于化学领域，具体涉及一种制备云实二萜A和CaesalminF的方法。
技术介绍
云实二萜A和CaesalminF是存在于药用植物云实Caesalpiniadecapetala种子中的两个天然产物，二者为一对手性异构体，化学结构如下。从化学结构可以看出，云实二萜A和CaesalminF的区别仅在于C14手性不同。结构上的微小差异导致云实二萜A和CaesalminF的制备过程繁琐，必须采用多种分离介质经过反复柱层析才能制备得到纯度较高的单体，费时费力。云实二萜A和CaesalminF具有多种活性，具有开发成药的前景，必须开发出一种步骤少、分离快、分离纯度高的制备方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种制备云实二萜A和CaesalminF的方法。实现本专利技术上述目的技术方案如下：云实二萜A的制备：一种制备云实二萜A的方法，包括如下步骤：步骤S1，提取：取云实种子粉末，用75％乙醇热回流提取，过滤，滤液减压浓缩至无醇味。步骤S2，富集：将浓缩至无醇味的提取液上样于AB-8型大孔吸附树脂柱，树脂柱内径12cm，树脂柱床高度120cm，提取液上样量为2个柱体积，上样结束后关闭阀门静态吸附30min；先使用20％乙醇洗脱10个柱体积除杂，再使用70％乙醇以15mL/min的流速洗脱，收集第9个柱体积的70％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物。步骤S3，云实二萜A的纯化：将富集物用HSCCC分离纯化，HSCCC色谱参数为：两相溶剂系统：体积比为2:2:3:5的二氯甲烷-乙酸乙酯-正丁醇-水；转速：900r/min；流速：2.8mL/min；温度：25℃；以下相为固定相，上相为流动相，将富集物用体积比1:1的上、下相溶解配制成浓度为20mg/mL的样品溶液，进样，开始采集，根据色谱图收集云实二萜A对应的流份，浓缩干燥即制备得到云实二萜A。进一步地，步骤S1中1kg药材用10L75％乙醇提取。进一步地，步骤S1中提取3次，每次2h。进一步地，步骤S2中上样流速3mL/min。进一步地，步骤S3中检测波长为235nm。进一步地，步骤S3中上样量为10mL。CaesalminF的制备：一种制备CaesalminF的方法，包括如下步骤：步骤S1，提取：取云实种子粉末，用75％乙醇热回流提取，过滤，滤液减压浓缩至无醇味。步骤S2，富集：将浓缩至无醇味的提取液上样于AB-8型大孔吸附树脂柱，树脂柱内径12cm，树脂柱床高度120cm，提取液上样量为2个柱体积，上样结束后关闭阀门静态吸附30min；先使用20％乙醇洗脱10个柱体积除杂，再使用70％乙醇以15mL/min的流速洗脱，收集第9个柱体积的70％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物。步骤S3，CaesalminF的纯化：将富集物用HSCCC分离纯化，HSCCC色谱参数为：两相溶剂系统：体积比为2:1:1:3:5的二氯甲烷-乙酸乙酯-四氢呋喃-正丁醇-水；转速：900r/min；流速：2.8mL/min；温度：25℃；以下相为固定相，上相为流动相，将富集物用体积比1:1的上、下相溶解配制成浓度为20mg/mL的样品溶液，进样，开始采集，根据色谱图收集CaesalminF对应的流份，浓缩干燥即制备得到CaesalminF。进一步地，步骤S1中1kg药材用10L75％乙醇提取。进一步地，步骤S1中提取3次，每次2h。进一步地，步骤S2中上样流速3mL/min。进一步地，步骤S3中检测波长为235nm。进一步地，步骤S3中上样量为10mL。本专利技术的突出优点：本专利技术提供的方法步骤少、分离快，分离制备得到的云实二萜A和CaesalminF纯度高。附图说明图1为云实二萜A的HSCCC纯化色谱图；图2为CaesalminF的HSCCC纯化色谱图。具体实施方式下面就结合实施例具体介绍本专利技术的实质性内容，由于篇幅原因，实验过程的描述无法做到非常详细，凡是实验中未详细描述的部分均为本领域技术人员熟知的常规操作。一、实验材料云实种子采于广西南宁市，经鉴定为云实Caesalpiniadecapetala(Roth)Alston的种子，晒干后粉碎，过40目筛，干燥保存，备用。云实二萜A和CaesalminF的标准品购买或自制，纯度≥95％。AB-8型大孔吸附树脂购自河北沧州宝恩吸附材料科技有限公司。TBE-300C高速逆流色谱(上海同田生化技术有限公司)，BSA124S电子天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司)，TBP-5002输液泵、UV-2000D紫外检测器(上海三位科学仪器有限公司)，ZDHW调温电热套(北京中兴伟业仪器有限公司)。二、实验方法和实验结果1、提取取云实种子粉末，用75％乙醇(体积百分浓度，下同)热回流提取(1kg药材用10L75％乙醇)，提取3次，每次2h，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至无醇味。2、富集将浓缩至无醇味的提取液上样于AB-8型大孔吸附树脂柱，树脂柱内径12cm，树脂柱床高度120cm，提取液上样量为2个柱体积，上样流速3mL/min，上样结束后关闭阀门静态吸附30min；先使用20％乙醇洗脱10个柱体积除杂，再使用70％乙醇以15mL/min的流速洗脱，收集第9个柱体积的70％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物。3、纯化3.1云实二萜A的纯化将富集物用HSCCC分离纯化，HSCCC色谱参数为：两相溶剂系统：体积比为2:2:3:5的二氯甲烷-乙酸乙酯-正丁醇-水；转速：900r/min；流速：2.8mL/min；温度：25℃；检测波长：235nm；上样量：10mL；以下相为固定相，上相为流动相，将富集物用体积比1:1的上、下相溶解配制成浓度为20mg/mL的样品溶液，进样，开始采集，根据色谱图(图1)收集云实二萜A对应的流份，浓缩干燥即制备得到云实二萜A，纯度为98.8％。3.2CaesalminF的纯化将富集物用HSCCC分离纯化，HSCCC色谱参数为：两相溶剂系统：体积比为2:1:1:3:5的二氯甲烷-乙酸乙酯-四氢呋喃-正丁醇-水；转速：900r/min；流速：2.8mL/min；温度：25℃；检测波长：235nm；上样量：10mL；以下相为固定相，上相为流动相，将富集物用体积比1:1的上、下相溶解配制成浓度为20mg/mL的样品溶液，进样，开始采集，根据色谱图(图2)收集CaesalminF对应的流份，浓缩干燥即制备得到CaesalminF，纯度为98.5％。本专利技术提供的方法步骤少、分离快，分离制备得到的云实二萜A和CaesalminF纯度高。上述实施例是对本专利技术实质性内容的体现，用于更好地解释本专利技术，但本领域技术人员应当知晓，不应将本专利技术的保护范围局限于上述具体的实施例。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备Caesalmin F的方法，其特征在于包括如下步骤：步骤S1，提取：取云实种子粉末，用75％乙醇热回流提取，过滤，滤液减压浓缩至无醇味。步骤S2，富集：将浓缩至无醇味的提取液上样于AB‑8型大孔吸附树脂柱，树脂柱内径12cm，树脂柱床高度120cm，提取液上样量为2个柱体积，上样结束后关闭阀门静态吸附30min；先使用20％乙醇洗脱10个柱体积除杂，再使用70％乙醇以15mL/min的流速洗脱，收集第9个柱体积的70％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物。步骤S3，Caesalmin F的纯化：将富集物用HSCCC分离纯化，HSCCC色谱参数为：两相溶剂系统：体积比为2:1:1:3:5的二氯甲烷‑乙酸乙酯‑四氢呋喃‑正丁醇‑水；转速：900r/min；流速：2.8mL/min；温度：25℃；以下相为固定相，上相为流动相，将富集物用体积比1:1的上、下相溶解配制成浓度为20mg/mL的样品溶液，进样，开始采集，根据色谱图收集Caesalmin F对应的流份，浓缩干燥即制备得到Caesalmin F。

【技术特征摘要】
1.一种制备CaesalminF的方法，其特征在于包括如下步骤：步骤S1，提取：取云实种子粉末，用75％乙醇热回流提取，过滤，滤液减压浓缩至无醇味。步骤S2，富集：将浓缩至无醇味的提取液上样于AB-8型大孔吸附树脂柱，树脂柱内径12cm，树脂柱床高度120cm，提取液上样量为2个柱体积，上样结束后关闭阀门静态吸附30min；先使用20％乙醇洗脱10个柱体积除杂，再使用70％乙醇以15mL/min的流速洗脱，收集第9个柱体积的70％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物。步骤S3，CaesalminF的纯化：将富集物用HSCCC分离纯化，HSCCC色谱参数为：两相溶剂系统：体积比为2:1:1:3:5的二氯甲烷-乙酸乙酯-四氢呋喃-正丁醇-水；转速...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘华平，李月群，金荣，
申请(专利权)人：南京盖斯夫医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32