用于治疗椎间盘突出症的方法和组合物技术

本发明专利技术涉及用于治疗或预防哺乳动物的椎间盘突出症的方法和组合物。根据本发明专利技术的组合物包含T‑细胞活化的抑制剂，所述抑制剂能够抑制CD28‑介导的T‑细胞的共刺激。所述T‑细胞活化的抑制剂优选为包含CTLA‑4的细胞外结构域本身或其修饰形式的蛋白质，如阿巴西普、贝拉西普、XPro9523和/或ASP2408。

Method and composition for the treatment of intervertebral disc herniation

The present invention relates to a method and composition for treating or preventing mammalian disc herniation. The composition according to the present invention includes an inhibitor of T - cell activation, which can inhibit co-stimulation of CD28 - mediated T - cells. The inhibitor of T_cell activation is preferably a protein containing the extracellular domain itself of CTLA_4 or its modified form, such as Abbasip, Belacipp, XPro9523 and/or ASP2408.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗椎间盘突出症的方法和组合物
本专利技术涉及用于治疗或预防哺乳动物的椎间盘突出症的方法和组合物。根据本专利技术的组合物包含T-细胞活化的抑制剂，所述抑制剂能够抑制CD28-介导的T-细胞的共刺激。所述T-细胞活化的抑制剂优选为包含CTLA-4的细胞外结构域本身或其修饰形式的蛋白质，如阿巴西普(abatacept)、贝拉西普(belatacept)、XPro9523和/或ASP2408。
技术介绍
人体脊柱由多个堆叠在彼此顶部的椎骨组成。两个相邻的椎骨通过两个椎间关节(或小关节,facetjoint)和椎间盘而彼此连接，它们一起构成运动节段，允许脊柱的弯曲/伸展、侧向屈曲和旋转。脊柱被许多韧带和肌肉进一步稳定。椎间盘由称为纤维环的外部纤维结构、称为髓核的内部凝胶状核心和将椎间盘连接到两个相邻椎骨的两个软骨终板组成。髓核具有高水含量，在允许运动和吸收轴向负荷方面对其生物力学性质是至关重要的。在老化时，水浓度通常会降低，这是被称为椎间盘退变的现象的一部分。椎间盘退变的其他迹象包括椎间盘高度的降低和纤维环的恶化[1]。在椎间盘突出中，纤维环的恶化导致其破裂，常常在例如举重中是由于过度的机械应变。破裂使得髓核背侧移位进入椎管或椎间孔。这会对相邻的神经根造成压力，其与下面进一步讨论的化学因素相结合，会引起放射性疼痛。突出最常见于下腰椎，症状通常表现为下腰痛，紧接着是放射性疼痛。整体发病率为1-2％，最常见于中年男性和女性，但年龄跨度从青少年延伸至老年人。值得一提的是，无症状的突出在中年健康志愿者中非常普遍。通常，椎间盘突出的症状在发病后2-4周内自发改善，并且突出最终被再吸收。然而，对于约10％的患者，疼痛变为慢性。在这些情况下，手术是当今优选的治疗选择，在手术中去除对神经造成压力的椎间盘碎片。长期以来，椎间盘突出症的坐骨神经痛被认为仅由神经根上的机械压力引起，但在过去的三十年中，这被证明是错误的。研究表明仅有压力可引起感觉异常、感觉迟钝或虚弱，但不会引起疼痛[2]，许多实验研究和临床观察表明，疼痛发作需要化学因子[3]。此外，已发现位于神经根上的自体髓核在无压力情况下可诱导结构和神经生理的损伤[4-6]。首先发现在诱导这些损伤中起主要作用的特定化学因子之一是促炎细胞因子TNFα[7]。各种研究表明TNFα是椎间盘突出和退化的病理生理学中的关键因素，并且还有证据表明其他几种促炎细胞因子，如IL-1和IL-6也很重要[8,9]。已经使用TNF抑制剂对坐骨神经痛进行了临床试验，结果相互矛盾[10,11]。虽然增加的促炎细胞因子水平被认为在椎间盘突出中很重要，但仍然不清楚是什么原因导致这种增加。实验研究已经在椎间盘中检测到促炎细胞因子[12]，这导致以下假设，即椎间盘突出物中存在的细胞因子是被移位的椎间盘物质细胞产生的细胞因子。其他人已发现细胞因子的水平在移位进入椎管后会增加[13]，这表明突出后有持续的炎症反应，这导致细胞因子的增加。这个假设得到了其他几项研究的支持[14,15]。一些研究已经证明适应性免疫系统参与椎间盘突出，表明对髓核的自身免疫反应。这种假设得到了健康髓核的无血管性质的支持，因此只要它包含在椎间盘中心，就不会暴露于免疫系统。1988年，Pennington等人。在健康的犬椎间盘的髓核中检测出IgG[16]。后来的研究已经在人类的椎间盘突出物和退化椎间盘中检测到自身抗体[17,18]，并且实验研究已表明暴露于髓核可以引起T细胞的活化[19]。最近的一项研究还发现椎间盘突出症患者的促炎细胞因子IL-6和IL-8的血清水平升高，从而提示全身炎症反应。这些细胞因子的高血清水平与包含症状的严重程度和不良的长期预后之间也存在相关性[20]。因此，认识到在椎间盘突出中发生的炎症反应可由对髓核的自身免疫反应引起，但是这种免疫应答的程度和重要性尚未被完全了解。T细胞在椎间盘突出的病理生理学中的潜在参与仅被简要地提出，并且没有尝试确定它们在例如细胞因子产生方面的重要性、椎间盘突出的形态发展中的重要性、或者与临床症状严重程度的相关性。人类椎间盘突出症的组织学分析发现，突出物不仅包括椎间盘的成分，如髓核(NP)和纤维环，还有肉芽组织[21-23]。肉芽组织通常围绕突出的NP并且通常也被巨噬细胞浸润，表明NP周围的炎症反应。这些研究中的其他常见组织学和免疫组织化学发现为新血管形成和TNF、基质金属蛋白酶3、碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的表达。大多数这些发现在脱出和游离(sequestrated)的突出物中特别丰富。这些类型的突出物通常比凸起(bulges)和突起(protrusions)具有更大量的肉芽组织[24]。还观察到肉芽组织在年轻患者中更常见[24,25]。然而，尚未发现这些不同的组织学特征可用于预测临床结果[26]。已经发表了几项关于腰椎间盘突出症大小进展的后续评估。其结果表明比以前对突出的椎间盘所认为的更动态的进展。例如，Jensen等人观察到在绝大部分(75-100％)的宽基座(broad-based)的突起、脱出和游离中有自发消退，但在有症状队列的前瞻性14个月随访研究中病灶突起(35％)和凸起(3％)的自发消退则较少[27]。Takida等人在有症状的队列中每3个月进行一次MRI检查，发现脱出型和游离型的消退率相似，但突起的消退率则较低[28]。他们还发现形态学消退与有利的临床结果之间存在相关性。其他研究未能将形态发展与临床结果联系起来，因此这种相关性仍然是一个有争议的主题。预测自发消退的其他成像特征包括突出组织中的对比度增强[29]和T2加权序列上的高信号强度[30]。基于上面讨论的数据，已经证明椎间盘突出症的自发消退与突出中的炎症之间存在相关性。几十年来，这已在文献中得到认可、讨论并部分研究。1998年Matsui等人提示MMP-1和MMP-3可导致突出的椎间盘细胞外基质降解，并且这与突出物中的炎症反应有关[23]。2009年Genevay等人发表了一篇支持这一假说的文章，同时也提出抑制导致MMP-1和MMP-3增加的炎症机制，特别是TNF，可以抑制椎间盘突出物的自发再吸收[31]。2004年Kato等人发表的数据进一步支持了这一假设，他们还提出了一种反应级联，其导致椎间盘突出物的自发再吸收[31](图4)。他们提出由椎间盘软骨和巨噬细胞之间的相互作用诱导的炎症产生炎性环境，且TNF的增加通过增加血管内皮生长因子的表达引起血管化增加，这两者都允许更多的巨噬细胞进入突出的组织并因此增加炎症。然后TNF激活并增加MMP’s的表达，导致细胞外基质的降解并因此导致突出物的自发再吸收。这一假设，即炎症是引起椎间盘突出物消退的机制，在最近的文献中也反复提到，无论是在原始论文[32]还是在综述[33]中。鉴于上述关于自身免疫作为椎间盘突出症炎症的驱动因素的假设，可以合理地认为这种自身免疫反应有助于突出的消退。尾棘中实验性椎间盘穿刺已成为大鼠椎间盘退变的广泛接受模型[34-37]，但尚未用于椎间盘突出。然而，已经表明腰椎中椎间盘突出导致椎间盘表面出现突出样结节[38]，如穿刺后三周的宏观分析所注意。组织学分析显示，结节主要由肉芽组织组成，其也可见于人椎间盘突出中。有趣的是，椎间盘造影术，即目本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于在哺乳动物中治疗或预防椎间盘突出症的组合物，所述组合物包含CD28‑介导的T‑细胞共刺激的抑制剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.04.04 SE 1650449-01.用于在哺乳动物中治疗或预防椎间盘突出症的组合物，所述组合物包含CD28-介导的T-细胞共刺激的抑制剂。2.根据权利要求1的用于所述用途的组合物，其中所述CD28-介导的T-细胞共刺激的抑制剂为能够结合至CD80/CD86的蛋白质。3.根据权利要求1或2的用于所述用途的组合物，其中所述CD28-介导的T-细胞共刺激的抑制剂为包含至少一个CTLA-4的细胞外结构域的蛋白质。4.根据权利要求3的用于所述用途的组合物，其中所述蛋白质为融合蛋白，其包含融合至至少一个CTLA-4的细胞外结构域的免疫球蛋白G(IgG)的Fc区。5.根据权利要求4的用于所述用途的组合物，其中所述CTLA-4的细胞外结构域选自:(a)具有以下氨基酸序列的多肽，该氨基酸序列包含SEQIDNO：3或SEQIDNO：4所示的序列；(b)具有以下氨基酸序列的多肽，该氨基酸序列与SEQIDNO：3或SEQIDNO：4所示的序列具有至少90％的同一性；(c)具有以下氨基酸序列的多肽，该氨基酸序列基本上由SEQIDNO：3或SEQIDNO：4所示的序列组成；或(d)具有以下氨基酸序列的多肽，该氨基酸序列由SEQIDNO：3或SEQIDNO：4组成。6.根据权利要求4或5的用于所述用途的组合物，其中所述融合蛋白为二聚体，其包含选自以下的两种单体:(a)具有以下氨基酸序列的多肽，该氨基酸序列包含SEQIDNO：1或SEQIDNO：2所示的序列；(b)具有以下氨基酸序列的多肽，该氨基酸序列与SEQIDNO：1或SEQIDNO：2所示的序列具有至少90％同一性；(c)具有以下氨基酸序列的多肽，该氨基酸序列基本上由SEQIDNO：1或SEQIDNO：2所示的序列组成；或(d)具有以下氨基酸序列的多肽，该氨基酸序列由SEQIDNO：1或SEQIDNO：2组成。7.根据权利要求1的用于所述用途的组合物，其中所述CD28-介导的T-细胞共刺激的抑制剂为能结合至CD28的蛋白质。8.根据权利要求1或7的用于所述用途的组合物，其中所述CD28-介导的T-细胞共刺激的抑制剂为对CD28具有拮抗性质的蛋白质。9.根据权利要求1、7或8的用于所述用途的组合物，其中所述CD28-介导的T-细胞共刺激的抑制剂为包含抗CD28Fab’抗体片段的蛋白质。10.根据权利要求1至9任一项的用于所述用途的组合物，其中所述椎间盘突出症的治疗或预防包括减少炎症。11.根据权利要求1至10任一项的用于所述用途的组合物，其中所述椎间盘突出症的治疗或预防包括减少椎间盘突出的尺寸。12.根据权利要求1至11任一项的用于所述用途的组合物，其中所述椎间盘突出症的治疗或预防包括减少或预防突出形成。13.根据权利要求1至12任一项的用于所述用途的组合物，其中所述椎间盘突出症的治疗或预防包括减少或预防肉芽组织的形成。14.根据权利要求1至13任一项的用于所述用途的组合物，其中所述椎间盘突出症包括脱出型和/或游离型。15.根据权利要求1至14任一项的用于所述用途的组合物，其中所述组合物被静脉内或皮下给药。16.根据权利要求1至15任一项的用于所述用途的组合物，其中所述CD28-介导的T-细胞共刺激的抑制剂给药的剂量为0.1-20mg/kg体重。1...

【专利技术属性】
技术研发人员：K奥尔马克尔，D琼森，
申请(专利权)人：GU投资公司，
类型：发明
国别省市：瑞典,SE