一种扩增与运动能力相关基因的引物组及检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种扩增与运动能力相关基因的引物组及检测试剂盒，涉及SNP的应用技术领域。本发明专利技术所述引物组包括：特异性引物和单碱基延伸引物；所述特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～52所示；所述单碱基延伸引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.53～78所示。本发明专利技术设计的扩增引物和延伸引物能在同一个反应内检测出26个SNP位点，用于开发运动能力检测试剂盒并指导合理运动。在运动指导方面，本发明专利技术的基因检测可了解人类机体的耐力、爆发力、力量等能力，为合理运动提供科学的参考依据。本发明专利技术将运动相关的基因联合检测，一次检测出所有的项目，是目前为止运动能力基因检测产品中检测基因覆盖面最全面的。

A Primer Group and Detection Kit for Amplifying Genes Related to Exercise Ability

The invention provides a primer group and a detection kit for amplifying genes related to motor ability, and relates to the application technical field of SNP. The primer group of the invention includes: specific primers and single base extension primers; the nucleotide sequences of the specific primers are shown as SEQ ID NO.1-52; and the nucleotide sequences of the single base extension primers are shown as SEQ ID NO.53-78. The amplified primer and the extended primer designed by the invention can detect 26 SNP loci in the same reaction, and can be used to develop a sports ability detection kit and guide reasonable movement. In the aspect of exercise guidance, the gene detection of the present invention can understand the endurance, explosive power, strength and other abilities of human body, and provide scientific reference basis for reasonable exercise. The present invention detects all items at one time through joint detection of genes related to sports, and has the most comprehensive coverage of detecting genes in sports ability gene detection products so far.

【技术实现步骤摘要】
一种扩增与运动能力相关基因的引物组及检测试剂盒
本专利技术属于SNP的应用
，具体涉及一种扩增与运动能力相关基因的引物组及检测试剂盒。
技术介绍
运动能力是指人们从事各种身体活动的能力，包括维持生命活动不可缺少的走、跑、跳、投、攀、爬、滚、翻等基本能力和参加体育训练或比赛所具备的特殊运动能力，是人体形态、素质、机能、技能和心理能力等的综合表现。有人研究指出，成为优秀运动员的遗传和后天训练所引起的作用，前者占2/3，后者占1/3。近年来分子遗传学研究多次证实与人类运动能力相关的诸如肌肉力量、耐力、平衡力、协调性、柔韧性、有氧运动能力、无氧运动能力、训练应答以及疲劳的发生发展等都有重要的生物学背景。在环境条件和训练方式大致相同的情况下，不同个体在运动能力、体能、领悟力以及训练应答等方面都存在着明显的差异，其中最根本的原因就在于不同的个体遗传背景不同，即存在运动天赋的差异。通过基因检测能够了解个体与运动相关的先天能力，从而为有针对性的选材与育才提供科学的参考依据。一个人运动遗传素质的优劣决定其运动能力的上限及可训练性的程度。SNP在探索人类健康和癌症诊断扮演着重要角色，至今已发现200多个染色体和18个线粒体的基因多态性位点和人类的肌肉力量、身体活动水平、耐力水平和训练敏感性相关。过去已经发展出多种检测基因多态性的方法，用来预测运动的能力。其中比较全面的就是专利技术专利(CN201711219812.5)，涵盖了5个与运动相关的基因单核苷酸多态性位点，该专利公开了一种用于检测运动基因SNP的引物组，使用的方法是毛细管电泳法，但检测基因不全面，DNA模板投入量大，耗时长。专利技术专利(CN201310115932.6)公开了一种预测优秀冰雪运动员弹跳潜能的分子生物学方法，该方法仅检测ACTN3和ACE2个基因，检测基因不全面，位点增加时，操作复杂。综上所述，找到一种可以同时检测多个位点SNP，操作快速简便，结果准确，特异性好的反应体系和检测方法具有重要的意义。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种扩增与运动能力相关基因的引物组及检测试剂盒，可同时对肌肉类型、运动动力、运动积极性、爆发力、耐力、疼痛忍受力、软组织受伤保护、有氧能力、无氧能力、恢复、肥胖、肺活量和力量相关的基因进行检测，为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种扩增与运动能力相关基因的引物组，所述引物组包括：特异性引物和单碱基延伸引物；所述特异性引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1～52所示；所述单碱基延伸引物的核苷酸序列如SEQIDNO.53～78所示。优选的，所述引物组根据以下基因设计：VEGFA、PPARA、BDNF、PAPSS2、intergenic、MSTN、AGT、ACVR1B、ADRB2、ACTN3、ADRB2、OPRM1、CILP、COL1A1、IL6、AKT1、AMPD1、NOS3、NAT2、ANKK1、FTO、BMP6、Intergenic、PRDM11、CNTF和ACE。优选的，所述基因的SNP位点包括：rs2010963rs4253778、rs6265、rs10887741、rs8097348、rs1805086、rs699、rs2854464、rs1042714、rs1815739、rs1042713、rs563649、rs2073711、rs1800012、rs1800795、rs1130214、rs17602729、rs2070744、rs1208、rs1800497、rs9939609、rs6923462、rs4237643、rs2863171、rs1800169和rs4343。本专利技术还提供了一种检测运动能力相关基因的试剂盒，包括上述引物组。本专利技术提供了一种扩增与运动能力相关基因的引物组及检测试剂盒，通过利用与运动相关的基因联合，设计出特异性引物和单碱基延伸引物，将所有的位点放在同一个反应中，通过减体系多重PCR进行扩增，使用飞行时间质谱检测，一次同时检测26个位点，减少操作复杂程度，降低成本，节约时间。具体实施方式本专利技术提供了一种扩增与运动能力相关基因的引物组，所述引物组包括：特异性引物和单碱基延伸引物；所述特异性引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1～52所示；所述单碱基延伸引物的核苷酸序列如SEQIDNO.53～78所示。本专利技术所述引物组根据以下基因设计：VEGFA、PPARA、BDNF、PAPSS2、intergenic、MSTN、AGT、ACVR1B、ADRB2、ACTN3、ADRB2、OPRM1、CILP、COL1A1、IL6、AKT1、AMPD1、NOS3、NAT2、ANKK1、FTO、BMP6、Intergenic、PRDM11、CNTF和ACE。所述基因的SNP位点包括：rs2010963rs4253778、rs6265、rs10887741、rs8097348、rs1805086、rs699、rs2854464、rs1042714、rs1815739、rs1042713、rs563649、rs2073711、rs1800012、rs1800795、rs1130214、rs17602729、rs2070744、rs1208、rs1800497、rs9939609、rs6923462、rs4237643、rs2863171、rs1800169和rs4343。具体对应关系如表1和表2所示，在表2中正向引物以R表示，反向引物以F表示，单碱基延伸引物以D表示：表1运动能力相关基因及SNP位点表2引物序列与运动相关基因的各SNP位点多样性解读如表3所示：表3运动能力相关基因SNP位点分型意义解读本专利技术还提供了一种检测运动能力相关基因的试剂盒，包括上述引物组。本专利技术在应用所述试剂盒时，优选以人基因组DNA为模板DNA，采用多重PCR技术进行扩增。本专利技术所述人基因组DNA优选采集自口腔，本专利技术对所述口腔基因组DNA的采集方法并没有特殊限定，利用本领域的常规方法即可。本专利技术所述多重PCR，优选包括：利用正向引物、反向引物和模板DNA进行PCR，得PCR产物；对PCR产物进行碱性磷酸酶处理，之后再进行单碱基延伸，利用树脂纯化单碱基延伸后的产物，上机检测。本专利技术所述PCR的体系优选为4μL体系，包括：DNA模板2μL，引物mix0.67μL，10×Buffer0.33μL，MgCl2(25mM)0.27μL，dNTP(25mM)0.07μL，ddH2O0.53μL，PCR酶(5U/μL)0.13μL。本专利技术对所述PCR体系中的各组分来源并没有特殊限定。本专利技术所述PCR的程序优选为：95℃预变性2min；(95℃30s，56℃30s，72℃1min)45个循环；72℃5min，4℃保持。本专利技术在所述碱性磷酸酶处理前，优选还包括去除所述PCR产物中的游离dNTPs，所述去除的方法为利用SAP(shrimpalkalinephosphatase，虾碱性磷酸酶)处理。本专利技术所述碱性磷酸酶处理体系优选为5.33μL体系，具体包括：4μLPCR产物，SAP×Buffer0.11μL，SAPEnzyme(1U/μL)0.2μL，ddH2O1.02μL。本专利技术对所述SAPMix的来源并没有特殊限定。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种扩增与运动能力相关基因的引物组，其特征在于，所述引物组包括：特异性引物和单碱基延伸引物；所述特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～52所示；所述单碱基延伸引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.53～78所示。

【技术特征摘要】
1.一种扩增与运动能力相关基因的引物组，其特征在于，所述引物组包括：特异性引物和单碱基延伸引物；所述特异性引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1～52所示；所述单碱基延伸引物的核苷酸序列如SEQIDNO.53～78所示。2.根据权利要求1所述引物组，其特征在于，所述引物组根据以下基因设计：VEGFA、PPARA、BDNF、PAPSS2、intergenic、MSTN、AGT、ACVR1B、ADRB2、ACTN3、ADRB2、OPRM1、CILP、COL1A1、IL6、AKT1、AMPD1、NOS3、NAT2、ANKK1、FTO、BMP6、Intergenic、PRDM11、CNTF和ACE。3.根据权利要求2所...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘文丽，武会娟，田彦捷，洪甜，张志超，梁丹丹，傅莹茜，怀雪飞，
申请(专利权)人：北京北基医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11