富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌、类胡萝卜素发酵制品以及发酵方法技术

本发明专利技术公开了一种富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌、类胡萝卜素发酵制品及其发酵方法，涉及富硒发酵技术领域。本发明专利技术公开的富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌的制备方法其包括：往接种有三孢布拉氏霉菌的发酵培养基中添加硒盐。该制备方法可以制得富含硒元素和类胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌；该方法通过优化发酵方法条件，在培养三孢布拉氏霉的过程中加入硒盐，三孢布拉氏霉生长时吸收利用了硒，使硒与三孢布拉氏霉体内的蛋白质和多糖有机结合转化为生物硒，提高了硒在三孢布拉氏霉菌体内的含量。

Selenium-rich carotenoid-rich Trispora brasiliensis, carotenoid fermented products and fermentation methods

The invention discloses a selenium-rich carotenoid-rich Trispora brasiliensis, a carotenoid fermentation product and a fermentation method thereof, which relates to the technical field of selenium-rich fermentation. The preparation method of selenium-rich carotenoid-rich Trispora brasiliensis disclosed by the invention includes adding selenium salt to the fermentation medium inoculated with Trispora brasiliensis. The preparation method can produce Trispora brasiliensis rich in selenium and carotenoids. By optimizing fermentation conditions, adding selenium salt in the process of cultivating Trispora brasiliensis, Trispora brasiliensis absorbs and utilizes selenium during its growth, so that selenium and protein and polysaccharides in Trispora brasiliensis can be organically combined into bio-selenium, thus improving selenium in Trispora brasiliensis. The content of fungi in vivo.

【技术实现步骤摘要】
富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌、类胡萝卜素发酵制品以及发酵方法
本专利技术涉及富硒发酵
，具体而言，涉一种富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌、类胡萝卜素发酵制品以及发酵方法。
技术介绍
硒(Se)被世界卫生组织和中华医学会定为21世纪继碘、锌后必补的第三大微量营养保健元素，它对人体具有抗氧化、防癌变、排毒、提高免疫力等作用。类胡萝卜素(carotenoids)是一类重要的天然色素的总称,普遍存在于动物、高等植物、真菌、藻类的黄色、橙红色或红色的色素之中。类胡萝卜素是体内维生素A的主要来源,同时还具有抗氧化、免疫调节、抗癌、延缓衰老等功效。Β-胡萝卜素(C40H56)是类胡萝卜素之一，也是橘黄色脂溶性化合物，它是自然界中最普遍存在也是最稳定的天然色素。β—胡萝卜素是一种抗氧化剂，具有解毒作用，是维护人体健康不可缺少的营养素，在抗癌、预防心血管疾病、白内障及抗氧化上有显著的功能，并进而防止老化和衰老引起的多种退化性疾病。番茄红素也是一种非常重要的类胡萝卜素，其具有优越的生理功能，它不仅具有抗癌抑癌的功效，而且对于预防心血管疾病、动脉硬化等各种成人病、增强类胡萝卜素。三孢布拉氏霉可以产β-胡萝卜素，也可以通过番茄红素环化酶抑制剂阻断番茄红素转化为β-胡萝卜素路径实现番茄红素的累积，是目前可以实现工业化生产的唯一一种产β胡萝卜素和番茄红素菌种我们研究显示，三孢布拉氏霉具有一定的富硒能力，对化学硒的耐受能力较高，但是普通三孢布拉氏霉的硒转化能力较弱，一般想要得到高富硒能力的霉菌需要通过筛选驯化得到富硒三孢布拉氏霉，但筛选驯化需要花大量的时间人力。鉴于此，本专利技术希望通过改善富硒工艺来提高三孢布拉氏霉的富硒能力。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种富硒富类胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌的发酵方法，该发酵方法可以制得富含硒元素和类胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌。本专利技术的另一目的在于提供一种富硒富类胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌，该霉菌富含硒元素和类胡萝卜素。本专利技术的另一目的在于提供一种类胡萝卜素发酵制品，该发酵制品中具有较高含量的类胡萝卜素和硒元素。本专利技术是这样实现的：一方面，本专利技术提供了一种富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌的发酵方法，其包括：发酵步骤：往接种有三孢布拉氏霉菌的发酵培养基中添加硒盐；在所述发酵培养基中，所述三孢布拉氏霉菌包括三孢布拉氏霉正菌和三孢布拉氏霉负菌；进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，在发酵的第0-60h添加所述硒盐。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，所述硒盐的添加量为2-100mg/L；优选的，所述硒盐的添加量为5-30mg/L。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，所述硒盐的添加方式是一次性加入、分批加入或流加；优选的，在发酵第18-36h，添加所述硒盐。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，从所述发酵培养基中富集三孢布拉氏霉菌体，向富集的所述三孢布拉氏霉菌体中加入所述硒盐；优选的，在发酵第18-36h富集三孢布拉氏霉菌体。优选的，富集可以采用离心、过滤等方式来实现。进一步优选的，在一些实施例中富集三孢布拉氏霉的设备采用富集与发酵为一体的发酵罐，结构如附图1-2所示，发酵培养基由补料口1进入罐体，落到5阀体上，发酵培养基由阀板上的孔流下，可由出料口10排出，菌体留在5的阀板上完成富集，启动气动机构6翻转阀体180°，菌体面朝下，可再由补料口加入培养液，菌体随着培养液冲下，落入罐体内，可进行下一步的高密度培养或者富集培养工作。此发酵罐能够保证富集操作期间无染菌风险，并且能够在完全不影响菌体生长的情况下，实现前序发酵至富集再至高密度发酵、富集培养整个连续不间断的功能。由于无机硒对细胞具有一定的毒性，高浓度的无机硒会抑制菌体生长代谢，专利技术人发现在加入无机硒前将菌体进行富集，在保证高富硒能力的同时，能够减少单位细胞吸收的硒量，进而降低无机硒对菌体的毒性。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，在发酵的第0-60h往所述发酵培养基中添加富硒助剂，优选的，富硒助剂为十二烷基磺酸钠(SDS)或环己氨基磺酸钠(甜蜜素)。优选的，富硒助剂的添加量0.01-1g/L；优选的，富硒助剂地添加量为0.1-0.5/L。优选的，富硒助剂的添加方式为一次性加入、分批加入或流加。优选的，在发酵第18-36h添加富硒助剂。优选的，从所述发酵培养基中富集三孢布拉氏霉菌体，向富集的所述三孢布拉氏霉菌体中加入富硒助剂。优选的，在发酵第18-36h富集三孢布拉氏霉菌体，向富集的所述三孢布拉氏霉菌体中加入富硒助剂。优选的，添加富硒助剂的时间和方式与添加硒的时间和方式相同。即在添加硒盐的同时添加富硒助剂。专利技术人意外的发现添加富硒助剂能够提升硒的富集量，其原因可能是在富硒的过程中主要起到提供了有机硫来源的作用，从而能够提高甲硫氨酸的表达量，进一步提高硒与甲硫氨酸的结合，进而提高富硒效果。我们选择的助剂主要为十二烷基磺酸钠和环己氨基磺酸钠。环己氨基磺酸钠作为食品生产中常用的添加剂，具有较高的安全性。十二烷基磺酸钠除了具备有机硫来源的作用还能够解决供氧问题，三孢布拉氏霉对需氧的要求非常高，添加SDS可以利用其作为氧载体，加强三孢布拉氏霉的供氧，从而提升三孢布拉氏霉的生长状况，进而提高三孢布拉氏霉的富硒效果。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，在所述发酵培养基中，所述三孢布拉氏霉菌包括三孢布拉氏霉正菌和三孢布拉氏霉负菌。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，在发酵步骤中，所述发酵培养基包括葡萄糖8-12g/L，玉米淀粉28-32g/L，玉米浆干粉48-52g/L，磷酸二氢钾0.8-1.2g/L，硫酸镁0.08-0.12g/L以及葵花籽油38-42g/L，pH6.8-7.2。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，上述硒盐选自2-羟基-4甲基硒代丁酸或其盐、亚硒酸盐、硒酸、硒酸盐、硒代半胱氨酸、硒代甲硫氨酸、硒代胱硫醚、硒代高半胱氨酸和Se-腺苷硒代甲硫氨酸中的任意一种或几种的组合，优选的硒盐采用亚硒酸钠。本专利技术提供的富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌的制备方法，通过优化发酵工艺条件，在培养三孢布拉氏霉的过程中加入硒盐，三孢布拉氏霉生长时吸收利用了硒，使硒与三孢布拉氏霉体内的蛋白质和多糖有机结合转化为生物硒，从而消除了化学硒(如亚硒酸钠)对人体的毒副反应和肠胃刺激，使硒能够更高效、更安全地被人体吸收利用。其中在发酵的48-58h之间添加阻断剂例如茶碱、烟碱、咪唑0.1～0.15％，即可得到富硒富含番茄红素的三孢布拉氏霉。不添加阻断剂，即可得到富硒富β胡萝卜素的三孢布拉氏霉。另外，还可以通过改变阻断剂的添加时间和添加量，例如将阻断剂的添加时间延后，或者减小阻断剂的添加量，使番茄红素环化酶未完全失活得到富硒又同时富含β胡萝卜素和番茄红素的三孢布拉氏霉。在本专利技术一个优选的方案中，所述三孢布拉氏霉正菌的保藏编号为CCTCCNO:M2014378；所述三孢布拉氏霉负菌的保藏编号为CCTCCNO:M2014379。其中，三孢布拉氏霉正菌于2014年8月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，保藏编号：CCTCCNO:M2014378，分离学命名：Blakesleatrispora。三孢布拉氏霉负菌于2014年8月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌的发酵方法，其特征在于，其包括：发酵步骤：往接种有三孢布拉氏霉菌的发酵培养基中添加硒盐；在所述发酵培养基中，所述三孢布拉氏霉菌包括三孢布拉氏霉正菌和三孢布拉氏霉负菌。

【技术特征摘要】
1.一种富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌的发酵方法，其特征在于，其包括：发酵步骤：往接种有三孢布拉氏霉菌的发酵培养基中添加硒盐；在所述发酵培养基中，所述三孢布拉氏霉菌包括三孢布拉氏霉正菌和三孢布拉氏霉负菌。2.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，在发酵的第0-60h添加所述硒盐。3.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，所述硒盐的添加量为2-100mg/L；优选的，所述硒盐的添加量为5-30mg/L。4.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，所述硒盐的添加方式是一次性加入、分批加入或流加；优选的，在发酵第18-36h，添加所述硒盐。5.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，从所述发酵培养基中富集三孢布拉氏霉菌体，向富集的所述三孢布拉氏霉菌体中加入所述硒盐；优选的，在发酵第18-36h富集三孢布拉氏霉菌体。6.根据权利要求1-5任一项所述的发酵方法，其特征在于，在发酵0-60h内往所述发酵培养基中添加富硒助剂，优选的，富硒助剂为十二烷基磺酸钠或环己氨基磺酸钠；优选的，富硒...

【专利技术属性】
技术研发人员：李翔宇，余超，陆姝欢，熊淑婷，汪志明，
申请(专利权)人：嘉必优生物技术武汉股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42