一种玉蝉花根部诱导愈伤组织培养的方法技术

本发明专利技术提供了一种玉蝉花根部诱导愈伤组织培养的方法，该方法以玉蝉花根部带有须根的成熟区根段为外植体，先对成熟的种子进行消毒，接入种子萌发培养基MS+6‑BA 0.5mg/L，种子萌发率约为100％，待长成带有2‑3片叶的幼苗时，再将幼苗接入生根培养基使其长成具有发达根系的无菌苗，接着切取长1.0‑1.5cm的带有须根(须根部分切除，露出伤口)的成熟区根段放入诱导培养基，其最佳培养基为MS+6‑BA 1.0mg/L+2,4‑D 2mg/L+NAA 0.2mg/L，30天时诱导率高达100％，为优化组织培养体系及建立遗传转化体系奠定坚实基础。

A Method of Inducing Callus Culture from the Root of Jade Cicada

The invention provides a method for inducing callus culture from the root of Jade Cicada. The method takes the root segment of the mature zone with fibrous roots at the root of Jade Cicada as explant, disinfects the mature seeds first, and inserts the seed germination medium MS+6_BA 0.5mg/L. The seed germination rate is about 100%. When the seedlings with 2_3 leaves are grown, the seedlings are inserted into the rooting medium to make them grow. Sterile seedlings with developed roots were then cut into mature root segments with fibrous roots (partial excision of fibrous roots, exposing wounds) 1.0 to 1.5 cm in length and placed in induction medium. The optimal medium was MS+6_BA 1.0 mg/L+2,4_D 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L. The induction rate reached 100% at 30 days, which laid a solid foundation for optimizing tissue culture system and establishing genetic transformation system.

【技术实现步骤摘要】
一种玉蝉花根部诱导愈伤组织培养的方法
本专利技术涉及一种玉蝉花根部诱导愈伤组织培养的方法,涉及植物组织培养

技术介绍
玉蝉(Irisensata)是鸢尾科鸢尾属的多年生草本植物，其花色艳丽而丰富、株型俊美、抗寒能力强、观赏价值高，做为园林绿化和插花花卉，具有极高的市场潜力，在园林上用途比较广泛，主要应用在林下观赏植被、绿地片植、草地点缀、模纹花坛等方面；玉蝉可作为盆栽花卉应用于室内小环境家居装饰，同时也可用作插花材料。组织培养因可高效繁殖植株并且可以改进植株质量，而被广为使用(Shimizu,K.etal.)。E.V.Boltenkov和E.V.Zarembo以玉蝉种子为外植体，研究了外植体在脱分化和再分化过程中与激素含量变化的关系，未统计诱导率，且根未形成(E.V.BoltenkovandE.V.Zarembo，2005)。2007年E.V.Boltenkov等人又从植物激素对愈伤组织培养植株再生的影响进行研究，结果表明2,4-D对愈伤组织的形成影响最大，在6-苄基氨基嘌呤的存在下，2,4-D配合激动素(KT)最易产生不定芽，而芽和根原基的发育是用吲哚乙酸(2mg/L)置本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种玉蝉花根部诱导愈伤组织培养的方法，其特征在于：(1)种子的选择及消毒：选择成熟且种荚开裂的玉蝉花种子，将其进行消毒处理；(2)无菌苗的产生：将消毒后的种子接入固体培养基MS+6‑BA 0.5mg/L+30g/L蔗糖+3.5g/L琼脂中，待其萌发出带有2‑3片叶的幼苗后，再将幼苗接入固体培养基MS+活性炭1g/L+30g/L蔗糖+9g/L琼脂中，培养出无菌苗；(3)愈伤组织的诱导及产生：用无菌手术刀切取无菌苗根部的带有须根部分的成熟区根段，长度为1.0‑1.5cm，接入固体诱导培养基MS+6‑BA 1.0mg/L+2,4‑D 2mg/L+NAA 0.2mg/L+30g/L蔗糖+7g/L琼...

【技术特征摘要】
1.一种玉蝉花根部诱导愈伤组织培养的方法，其特征在于：(1)种子的选择及消毒：选择成熟且种荚开裂的玉蝉花种子，将其进行消毒处理；(2)无菌苗的产生：将消毒后的种子接入固体培养基MS+6-BA0.5mg/L+30g/L蔗糖+3.5g/L琼脂中，待其萌发出带有2-3片叶的幼苗后，再将幼苗接入固体培养基MS+活性炭1g/L+30g/L蔗糖+9g/L琼脂中，培养出无菌苗；(3)愈伤组织的诱导及产生：用无菌手术刀切取无菌苗根部的带有须根部分的成熟区根段，长度为1.0-1.5cm，接入固体诱导培养基MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D2mg/L+NAA0.2mg/L+30g/L蔗糖+7g/L琼脂中，培养15天继代1次，连续继代2次，最终选取获得的颜色为黄色的愈伤组织；上述所有的操作步骤均在无菌工作台中操作，所有培养基的PH值均调节至5.9，培养室的培养温度为25±1℃、光照时间为14h/d、光照强度为2...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玲，刘红艳，张捷，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23