一种溶血血清样品中血红蛋白的去除方法技术

技术编号:20480230 阅读:691 留言:0更新日期:2019-03-02 17:12
本发明专利技术涉及一种溶血血清样品中血红蛋白的去除方法,包括以下步骤:S1.将血红蛋白抗体偶联至亲和层析介质得到免疫吸附试剂;S2.将免疫吸附试剂加入层析柱,然后将溶血血清样品过层析柱,流穿液即为纯化后的不含血红蛋白的血清样品。本发明专利技术的方法操作简单便捷,并且血红蛋白的去除效率高,特异性强,对血清中的原有成分无影响,使血清检测不受干扰。

【技术实现步骤摘要】
一种溶血血清样品中血红蛋白的去除方法
本专利技术涉及生化检测
,具体涉及一种溶血血清样品中血红蛋白的去除方法。
技术介绍
临床制备待检测血清样品时,经常会发生不同程度的溶血反应,血红蛋白进入血清样品中,很难除去。血红蛋白在血液中含量极高,1mL全血中可达到150mg左右,样品中血红蛋白的残留量的范围比较广泛,但血红蛋白是一种常见的临床样品检测干扰物,产生干扰的原因主要有两点:1、血红蛋白的卟啉环具有明显的氧化反应活性,可催化临床检验中常用的过氧化物酶底物的显色反应,已有大量数据证明,血红蛋白具有过氧化物酶(HRP)的反应活性,可以催化HRP的底物发生颜色反应,从而对需要氧化酶的检测造成严重干扰,这些检测包括酶连吸附免疫检测(ELISA)及部分HRP参与的层析检测;2、血红蛋白的卟啉环本身具有自发荧光,且荧光反应比较强烈,对荧光定量层析反应存在明显干扰。据申晓敏等的报告,在血红蛋白的干扰实验中,血红蛋白浓度≥1mg/mL时对AST、TBIL、DBIL、CK、LDH检测有干扰,血红蛋白浓度≥4mg/mL时对TP、CR、TRIG检测有干扰,血红蛋白浓度>2mg/mL时对uA检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种溶血血清样品中血红蛋白的去除方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:将血红蛋白抗体偶联至亲和层析介质得到免疫吸附试剂;S2:将所述免疫吸附试剂加入层析柱中,然后将溶血血清样品过层析柱,流穿液即为纯化后的不含血红蛋白的血清样品。

【技术特征摘要】
1.一种溶血血清样品中血红蛋白的去除方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:将血红蛋白抗体偶联至亲和层析介质得到免疫吸附试剂;S2:将所述免疫吸附试剂加入层析柱中,然后将溶血血清样品过层析柱,流穿液即为纯化后的不含血红蛋白的血清样品。2.根据权利要求1所述的一种溶血血清样品中血红蛋白的去除方法,其特征在于,所述亲和层析介质为溴化氰活化的琼脂糖凝胶微球,所述步骤S1的具体步骤为:称取溴化氰活化的琼脂糖凝胶冻干粉装入层析柱中,用1mM的HCl于4℃活化15~30min,然后洗涤3~5次,抽干残留的HCl,得到溴化氰活化的琼脂糖凝胶微球,用偶联缓冲液平衡,将血红蛋白抗体用偶联缓冲液稀释至1mg/mL,然后加入装有溴化氰活化的琼脂糖凝胶微球的层析柱中,室温孵育3~4h,加入的血红蛋白抗体与所述溴化氰活化的琼脂糖凝胶冻干粉的质量比为17~30:1,孵育结束后用偶联缓冲液洗涤3~5次,然后加入封闭液封闭层析柱,室温放置4~8h,流出封闭液,将层析柱用偶联缓冲液洗涤3次,分别用酸洗液和...

【专利技术属性】
技术研发人员:曾凡明胡治勇冉凯凯
申请(专利权)人:武汉戴安生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:湖北,42

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