The invention relates to a boron affinity monolithic column crosslinked by octavinyl POSS and ethylene glycol dimethacrylate and a preparation method thereof. Raw materials: octavinyl POSS 1.63%, ethylene glycol dimethacrylate 4.05%, azodiisobutyronitrile 0.26%, 3 acrylamide phenylboric acid 3.08%, chloroform 81.98%, dimethyl sulfoxide 9.00%. A boron affinity monolithic column was prepared by co-crosslinking octavinyl POSS with ethylene glycol dimethacrylate and was used for solid phase microextraction of horseradish peroxidase. Compared with boron affinity monolithic column without octavinyl POSS, boron affinity monolithic column with octavinyl POSS as crosslinking agent increased the recovery of horseradish peroxidase by more than two times, reaching 90% and RSD was less than 5%.
【技术实现步骤摘要】
八乙烯基-POSS和二甲基丙烯酸乙二醇酯共交联的硼亲和整体柱及其制备方法
本专利技术涉及一种八乙烯基-POSS和二甲基丙烯酸乙二醇酯共交联的硼亲和整体柱及其制备方法。
技术介绍
糖蛋白是一类重要的翻译后修饰蛋白,是寡糖链与多肽以多种形式共价相连且具有生物活性的物质,兼具多糖和蛋白质的功能性质。糖蛋白种类繁多,存在形式复杂多样,但含量较低,随着糖生物学和现代分离纯化技术的发展,糖蛋白的提取、纯化、分离富集等研究已成为诸多科研人员关注的焦点。糖蛋白的富集方法繁多,凝集素技术操作简单、重复性好,但凝集素成本较高而且基质材料的比面积较小,富集效率低;亲水相互作用色谱法对糖蛋白分离富集非特异性吸附,不能彻底除去少量非糖基化蛋白;分子筛法富集糖肽若酶切不完全,未完全酶切的高分子质量片段将会影响糖肽的富集;抗体亲和层析于虽然特异性好、富集效率高,但目前相对应糖蛋白/糖肽的抗体较少,应用有限。研究发现,糖蛋白具有调节免疫力、抗氧化、防衰老、抗炎症、降低血糖和降血脂等生物活性功能,其生物活性与糖链有着密不可分的关系,并且糖蛋白的结构及糖链的解析均需要较高纯度的糖蛋白,因此糖蛋白的分离纯化研究成为后续深入研究糖蛋白结构和功能的关键和基础。硼酸亲和技术吸附糖蛋白,是利用硼酸基团可以和糖肽中的糖链上的顺式邻位或间位羟基发生可逆反应生成环状二脂,碱性条件下共价结合,酸性条件下分解的原理对糖蛋白进行分离富集。硼酸亲和技术优点在于反应只需改变pH值且操作简便,通过优化富集分离可以将非特异性吸附作用力抑制或消除,该方法具有分子目标高专一性,普适性强。近年来,硼酸亲和技术在糖蛋白分离富集领 ...
【技术保护点】
1.一种八乙烯基‑POSS和二甲基丙烯酸乙二醇酯共交联的硼亲和毛细管整体柱,其特征在于,它的原料的质量组成为:八乙烯基‑POSS 0.82‑3.20%二甲基丙烯酸乙二醇酯 3.56‑4.53%3‑丙烯酰胺基苯硼酸 0.63‑3.08%氯仿 81.46‑86.44%二甲基亚砜 8.01‑9.45%偶氮二异丁腈 0.26‑0.32%上述的各原料的质量百分比组成之和为100 %。
【技术特征摘要】
1.一种八乙烯基-POSS和二甲基丙烯酸乙二醇酯共交联的硼亲和毛细管整体柱,其特征在于,它的原料的质量组成为:八乙烯基-POSS0.82-3.20%二甲基丙烯酸乙二醇酯3.56-4.53%3-丙烯酰胺基苯硼酸0.63-3.08%氯仿81.46-86.44%二甲基亚砜8.01-9.45%偶氮二异丁腈0.26-0.32%上述的各原料的质量百分比组成之和为100%。2.按照权利要求1所述的八乙烯基-POSS和二甲基丙烯酸乙二醇酯共交联的硼亲和毛细管整体柱,其特征在于:所述的共交联剂八乙烯基-POSS和二甲基丙烯酸乙二醇酯的摩尔比为1:8。3.按照权利要求1所述的八乙烯基-POSS和二甲基丙烯酸乙二醇酯共交联的硼亲和毛细管整体柱,其特征在于它的原料的质量组成:八乙烯基-POSS1.63%二甲基丙烯酸乙二醇酯4.05%3-丙烯酰胺基苯硼酸3.08%氯仿81.98...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘照胜,张雪,申艳凤,黄艳萍,
申请(专利权)人:天津医科大学,
类型:发明
国别省市:天津,12
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