矮生型大叶绣球组织培养方法技术

本发明专利技术提供了一种矮生型大叶绣球组织培养方法，包括以下步骤：1)选择生长健壮无病害的矮生型大叶绣球苗，剪取新生枝条，去除叶片，留部分叶柄，清洗干净备用；2)在超净工作台上将枝条依次用酒精溶液、升汞溶液浸泡消毒并冲洗干净；3)将枝条切成小段，接入启动培养基中放在培养室中培养；4)培养一段时间后，腋芽萌发，切下接入增殖培养基中培养；5)培养一段时间后，基部形成若干不定芽，当芽生长到一定高度后，置于温室驯化；6)驯化一段时间后，将苗清洗干净，切取不定芽，进行瓶外生根。本发明专利技术成活率高、繁殖周期短，增殖系数达到6.2，生根率达到93％，生根炼苗一步完成，缩短1‑2个月的育苗时间，能够实现矮生型大叶绣球周年生成，具有广阔的市场前景。

Tissue Culture Method of Dwarf Hydrangea macrophylla

The present invention provides a tissue culture method for dwarf large-leaf Hydrangea, which includes the following steps: 1) selecting healthy and disease-free dwarf large-leaf Hydrangea seedlings, cutting new branches, removing leaves, leaving some petioles for cleaning and reserve; 2) soaking and disinfecting branches with alcohol solution and mercury solution in turn on the super-clean workbench, and washing them; 3) cutting branches into small segments, and jointing them. After a period of cultivation, axillary buds germinate and cut into multiplication medium for cultivation; 5) After a period of cultivation, adventitious buds form at the base, which are domesticated in greenhouse when the buds grow to a certain height; 6) After a period of domestication, the seedlings are cleaned, the adventitious buds are cut off and rooted out of bottle. The invention has the advantages of high survival rate, short propagation period, 6.2 multiplication coefficient, 93% rooting rate, one step completion of rooting and seedling refining, shortening 1 to 2 months of seedling raising time, realizing annual generation of dwarf large-leaf Hydrangea, and has broad market prospects.

【技术实现步骤摘要】
矮生型大叶绣球组织培养方法
本专利技术属于植物培育繁殖
，具体是一种矮生型大叶绣球组织培养方法。
技术介绍
矮生型大叶绣球为虎耳草科(Saxifragaceae)绣球属(Hydrangea)大叶绣球(macrophylla)的一类栽培品种总称，株型矮小紧凑，植株高度30-40cm；节间较短，只有2-5cm，为普通大叶绣球的1/5；花序大而美，花色丰富，包括红色系、粉色系、蓝色系、紫色系、白色系和绿色系等；为顶生伞房状聚伞花序，根据装饰花的多少与着生方式又分为扁平花序和球型花序；装饰花萼片的形状、着生位置和数量也有丰富的变化。矮生型大叶绣球喜半荫，不耐晒，喜肥沃、湿润、排水良好的土壤；自然花期为5-7月，冬季落叶，次年3月份发芽。矮生型大叶绣球是优良的盆栽花卉材料，具有巨大的开发潜力。由于节间短、株型紧凑矮小，可用的扦插茎段十分有限，因此常规扦插育苗的繁殖率极低，繁殖技术成为矮生型大叶绣球应用的障碍。目前，国内绣球属植物组织培养研究大都针对切花品种，矮生型大叶绣球未见报道。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术中存在的问题，目的在于设计提供一种矮生型大叶绣球组织培养培养方法，该方法增殖系数高、繁殖速度快、炼苗周期短、成活率高。本专利技术的一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于包括以下步骤：1)选择生长健壮无病害的矮生型大叶绣球苗，剪取新生枝条，去除叶片，留部分叶柄，清洗干净备用；2)在超净工作台上将枝条依次用酒精溶液、升汞溶液浸泡消毒并冲洗干净；3)将枝条切成小段，接入启动培养基中放在培养室中培养；4)培养一段时间后，腋芽萌发，切下接入增殖培养基中培养；5)培养一段时间后，基部形成若干不定芽，当芽生长到一定高度后，置于温室驯化；6)驯化一段时间后，将苗清洗干净，切取不定芽，进行瓶外生根。所述的一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于步骤1)中：采穗母株为容器苗，在3月将苗置入温室，施用氮：磷：钾比例为28:5:5的复合肥3-5g，每天早晚各浇一次水，每隔7d整株喷洒500-700倍多菌灵溶液，30-40d后采集新生枝条；采集的新生枝条，去除叶片，用75％酒精棉球擦拭干净，放入洗洁剂、10％次氯酸钠混合溶液中，在磁力搅拌器上搅拌20-30min，再用自来水冲洗0.5-1h备用。所述的一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于步骤2)中：将枝条用75％酒精浸泡10-15s，倒掉酒精后，用0.1％的升汞溶液浸泡6-15min，其间不断摇动，倒掉升汞溶液后，用无菌水冲洗5次。所述的一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于步骤3)中：枝条消毒后，用无菌刀切成小段，每茎节一段，上切口紧贴腋芽，下切口距腋芽0.5-1cm，接入启动培养基中；启动培养基配方为B5基本培养基，添加0.5-1.0mg·L-16-苄氨基嘌呤、0.1mg·L-1萘乙酸、0.7％卡拉胶和2.0％蔗糖，pH调至5.4。所述的一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于步骤4)中：培养室中培养温度为25±2℃，光照时间12h/d，光强2500Lx；茎段培养15-18d，腋芽萌发，并抽生幼嫩枝条，将其中大于0.5cm的幼嫩枝条切下，接入增殖培养基；增殖培养基配方为B5基本培养基，添加1.0-2.0mg·L-16-苄氨基嘌呤、0.1mg·L-1萘乙酸、0.7％卡拉胶和1.0％-2.0％蔗糖，pH调至5.4。所述的一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于步骤5)中：幼嫩枝条在增殖培养基培养35-40d，基部形成不定芽，并长出嫩枝，当75％的嫩枝长度达2cm以上，将组培瓶苗置于温室苗床上驯化，75％遮荫。所述的一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于步骤6)中：瓶外生根基质配方为50％泥炭、50％珍珠岩(体积比)，充分搅拌，分装入72孔穴盘中，使用前7d浇透水，使用0.2％-0.3％高锰酸钾消毒；组培瓶苗驯化7d后，将增殖苗用自来水清洗，洗净残留培养基，用刀切取长度大于1.5cm的嫩枝，保留顶端两片叶，去除其它叶片，然后将嫩枝基部在500-700mg·L-1萘乙酸中速蘸5s，插入基质中，深度为嫩枝长度的1/3，置于全光照喷雾温室中进行生根；全光照喷雾温室在春秋季节平均温度30±2℃，夏季35±2℃，冬季15±2℃，调整喷雾间隔时间和持续时间，使相对湿度冬季保持在60％-70％，其它季节80％-90％，每隔10d喷洒500倍多菌灵溶液；培养35-60d后，形成健壮的生根苗。本专利技术中涉及的百分含量除另有说明外，均指重量百分含量。本专利技术的矮生型大叶绣球组织培养方法，成活率高、繁殖周期短，增殖系数达到6.2，生根率达到93％，生根炼苗一步完成，缩短1-2个月的育苗时间，能够实现矮生型大叶绣球周年生成，具有广阔的市场前景。具体实施方式实施例1对象：矮生型大叶绣球“万华镜”步骤1)将容器苗在3月置入温室，施用氮：磷：钾比例为28:5:5的复合肥5g，每天早晚各浇一次水，每隔7d整株喷洒600倍多菌灵溶液，40d后采集新生枝条；采集的新生枝条，去除叶片，用75％酒精棉球擦拭干净，放入洗洁剂、10％次氯酸钠混合溶液中，在磁力搅拌器上搅拌30min，再用自来水冲洗1h备用；步骤2)在超净工作台上，75％酒精浸泡10s，倒掉酒精后，0.1％的升汞溶液浸泡10min，期间不断摇动，倒掉升汞溶液后，用无菌水冲洗5次备用；步骤3)用无菌刀切成小段，每茎节为一段，上切口紧贴腋芽，下切口距腋芽0.5cm，接入启动培养基中；启动培养基配方为B5基本培养基，添加0.5mg·L-16-苄氨基嘌呤、0.1mg·L-1萘乙酸、0.7％卡拉胶和2.0％蔗糖，pH调至5.4；步骤4)培养室温度为25℃，光照时间12h/d，光强2500Lx；茎段培养15d，腋芽萌发，并抽生幼嫩枝条，将其中大于0.5cm的幼嫩枝条切下，接入增殖培养基；增殖培养基配方为B5基本培养基，添加1.0mg·L-16-苄氨基嘌呤、0.1mg·L-1萘乙酸、0.7％卡拉胶和1.0％蔗糖，pH调至5.4；步骤5)幼嫩枝条在增殖培养基培养30d，基部形成不定芽，并长出嫩枝，当75％嫩枝长度达2cm以上，将组培瓶苗置于温室苗床上驯化，75％遮荫；步骤6)在5月份进行瓶外生根；瓶外生根基质配方为50％泥炭、50％珍珠岩(体积比)，充分搅拌，分装入72孔穴盘中，使用前7d浇透水，使用0.2％高锰酸钾消毒；组培瓶苗驯化7d后，将增殖苗用自来水清洗，洗净残留培养基，用刀切取长度大于1.5cm的嫩枝，保留顶端两片叶，去除其它叶片，然后将嫩枝基部在500mg·L-1萘乙酸中速蘸5s，插入基质中，深度为嫩枝长度的1/3，置于全光照喷雾温室中进行生根；全光照喷雾温室平均温度30℃，调整喷雾间隔时间和持续时间，使相对湿度保持在90％，每隔10d喷洒500倍多菌灵溶液；培养40d后，形成健壮的生根苗。实施例2对象：矮生型大叶绣球“花手鞠”步骤1)中30d后采集的新生枝条，放入洗洁剂、10％次氯酸钠混合溶液中，在磁力搅拌器上搅拌20min，再用自来水冲洗0.5h备用；步骤3)中启动培养基配方为B5基本培养基，添加1.0mg·L-16-苄氨基嘌呤、0.1mg·L-1萘乙酸、0.7％卡拉胶和2.0％蔗糖，pH调至5.4；步骤4)中增殖培养基配方为B5本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于包括以下步骤：1)选择生长健壮无病害的矮生型大叶绣球苗，剪取新生枝条，去除叶片，留部分叶柄，清洗干净备用；2)在超净工作台上将枝条依次用酒精溶液、升汞溶液浸泡消毒并冲洗干净；3)将枝条切成小段，接入启动培养基中放在培养室中培养；4)培养一段时间后，腋芽萌发，切下接入增殖培养基中培养；5)培养一段时间后，基部形成若干不定芽，当芽生长到一定高度后，置于温室驯化；6)驯化一段时间后，将苗清洗干净，切取不定芽，进行瓶外生根。

【技术特征摘要】
1.一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于包括以下步骤：1)选择生长健壮无病害的矮生型大叶绣球苗，剪取新生枝条，去除叶片，留部分叶柄，清洗干净备用；2)在超净工作台上将枝条依次用酒精溶液、升汞溶液浸泡消毒并冲洗干净；3)将枝条切成小段，接入启动培养基中放在培养室中培养；4)培养一段时间后，腋芽萌发，切下接入增殖培养基中培养；5)培养一段时间后，基部形成若干不定芽，当芽生长到一定高度后，置于温室驯化；6)驯化一段时间后，将苗清洗干净，切取不定芽，进行瓶外生根。2.如权利要求1所述的一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于步骤1)中：采穗母株为容器苗，在3月将苗置入温室，施用氮：磷：钾比例为28:5:5的复合肥3-5g，每天早晚各浇一次水，每隔7d整株喷洒500-700倍多菌灵溶液，30-40d后采集新生枝条；采集的新生枝条，去除叶片，用75％酒精棉球擦拭干净，放入洗洁剂、10％次氯酸钠混合溶液中，在磁力搅拌器上搅拌20-30min，再用自来水冲洗0.5-1h备用。3.如权利要求1所述的一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于步骤2)中：将枝条用75％酒精浸泡10-15s，倒掉酒精后，用0.1％的升汞溶液浸泡6-15min，其间不断摇动，倒掉升汞溶液后，用无菌水冲洗5次。4.如权利要求1所述的一种矮生型大叶绣球组织培养方法，其特征在于步骤3)中：枝条消毒后，用无菌刀切成小段，每茎节一段，上切口紧贴腋芽，下切口距腋芽0.5-1cm，接入启动培养基中；启动培养基配方为B5基本培养基，添加0.5-1.0mg·L-16-苄氨基嘌呤、0.1mg·L-1萘...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟雨冉，邱帅，秦俊，张宪权，张俊林，郭娟，樊靖，胡玉春，
申请(专利权)人：杭州市园林绿化股份有限公司，上海辰山植物园，
类型：发明
国别省市：浙江,33