用于增强蛋白质表达的表达盒、载体、病毒及疫苗制造技术

本发明专利技术提供一种用于增强蛋白质表达的双向启动子表达盒，该双向启动子表达盒包括第一表达盒以及可操作地反向连结于第一表达盒的第二表达盒。其中第一表达盒依序包括：第一杆状病毒启动子、至少一脉冲序列、杆状病毒GP64基因序列以及终止件；其中第二表达盒依序包括：第二杆状病毒启动子、转录因子以及终止子。使用包含该双向启动子表达盒该表达载体可将不同的外源蛋白大量表达于杆状病毒的套膜上，以应用于不同亚单位疫苗的制备。

Expression boxes, vectors, viruses and vaccines for enhancing protein expression

The present invention provides a bidirectional promoter expression box for enhancing protein expression. The bidirectional promoter expression box includes a first expression box and a second expression box operatively connected to the first expression box in reverse. The first expression cassette sequence includes: the first baculovirus promoter, at least one pulse sequence, the baculovirus GP64 gene sequence and terminator; the second expression cassette sequence includes: the second baculovirus promoter, transcription factor and terminator. Using the expression vector containing the bidirectional promoter expression box, different foreign proteins can be expressed in large quantities on the mantle of baculovirus for the preparation of different subunit vaccines.

【技术实现步骤摘要】
用于增强蛋白质表达的表达盒、载体、病毒及疫苗
本专利技术是关于一种表达盒，尤指可加强重组蛋白质表达的表达盒；本专利技术亦关于一种表达载体，尤指包含前述表达盒、并可加强重组蛋白质表达的表达载体；本专利技术亦关于一种基因重组杆状病毒，尤指包含有前述表达载体的基因重组杆状病毒。本专利技术亦关于一种用于加强重组蛋白质表达的用途，尤指藉由前述表达载体以达成加强重组蛋白质表达的用途。本专利技术亦关于一种包含如前述的基因重组杆状病毒的疫苗。
技术介绍
昆虫杆状病毒感染昆虫细胞后可产生两种型式的病毒，一为出芽型病毒(buddedvirion，BV)，即为胞外病毒(extracellularvirus，ECV)或非包涵体病毒(nonoccludedvirus，NOV)，另一种为封埋型病毒(occludedbody-derivedvirus，OV)或称多角体病毒(polyhedra-derivedvirus，PDVs)。在1983年Smith及Summer等人发现苜蓿尺蠖蛾核多角体病毒(Autographacalifornicanucleopolyhedrosisvirus，AcMNPV)中的多角体基因本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于增强蛋白质表达的双向启动子表达盒(expression cassette)，该双向启动子表达盒包括：第一表达盒，其依序包括：第一杆状病毒启动子；至少一脉冲序列(burst sequence，BS)；杆状病毒GP64基因序列；以及，终止件，其包括猿猴空泡病毒40多聚腺苷酸(Simian vacuolating virus 40polyadenylation，SV40pA)；以及第二表达盒，其是可操作地反向连结于第一表达盒，且该第二表达盒依序包括：第二杆状病毒启动子；转录因子(transcription factor)，其中该转录因子为极晚期转录因子(very late factor‑...

【技术特征摘要】
1.一种用于增强蛋白质表达的双向启动子表达盒(expressioncassette)，该双向启动子表达盒包括：第一表达盒，其依序包括：第一杆状病毒启动子；至少一脉冲序列(burstsequence，BS)；杆状病毒GP64基因序列；以及，终止件，其包括猿猴空泡病毒40多聚腺苷酸(Simianvacuolatingvirus40polyadenylation，SV40pA)；以及第二表达盒，其是可操作地反向连结于第一表达盒，且该第二表达盒依序包括：第二杆状病毒启动子；转录因子(transcriptionfactor)，其中该转录因子为极晚期转录因子(verylatefactor-1，VLF-1)；以及，终止子，其包括单纯疱疹病毒胸苷激酶聚腺苷化A(herpessimplexvirusthymidinekinasepolyadenylation，HSVtkpA)。2.根据权利要求1所述的双向启动子表达盒，其中第一杆状病毒启动子包括多角体蛋白质启动子(polyhedronpromoter，Pph)。3.根据权利要求1所述的双向启动子表达盒，其中杆状病毒GP64基因序列依序包括信号肽(signalpeptide，SP)、跨膜区域(transmembranedomain，TM)和细胞质区域(cytoplasmicdomain，CTD)。4.根据权利要求1所述的双向启动子表达盒，其中杆状病毒GP64基因序列的信号肽(SP)与跨膜区域(TM)之间更包括多种限制酶切位(multiplecloningsite，MCS)。5.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨昊翰，罗永村，
申请(专利权)人：百卫生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71