校准试剂及其用途制造技术

技术编号:7705331 阅读:212 留言:0更新日期:2012-08-25 04:10
本发明专利技术提供了校准试剂及其用途,所述标准试剂包含通过接头与蛋白质载体缀合的肽,其中所述肽包含目的表位。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】校准试剂及其用途在近年内开发和建立了反相蛋白质阵列(RPA)作为用于分析在微量生物学样品(例如细胞裂解物、组织裂解物或体液)中代表不同信号转导级联的关键分析物的聚焦的蛋白质组的便利方法。蛋白质表达的相对差异不仅代表特定关键蛋白质的丰度,而且代表这些关键蛋白质的活化的、翻译后修饰(例如磷酸化)形式,其可描述和分类例如对细胞培养物施加的药物化合物的特定处理效果,例如候选药物对激酶的抑制作用,或描述和分类不同疾病状态,例如肿瘤在其不同进展状态中的亚型。RPA可进行多个平行样品的比较测量,例如来自不同处理的细胞培养物的样品或来自不同疾病群体的样品。在不同样品组群中发现的蛋白质表达或蛋白质活化模式的显著改变将有助于例如鉴定最有效的候选药物,阐明处理诱发的作用模式方案,或发现新的诊断/预后疾病标记物。 免疫亲和测定,例如在反相蛋白质阵列(RPA)中使用的免疫亲和测定是基于亲和试剂和目的蛋白质之间的特异性相互作用。所述测定包括在阵列上固定生物学样品,形成样品点。将固定了样品的阵列与亲和试剂(即抗体)孵育,并通过产生的检测信号,例如发光信号测量随后形成的亲和试剂和目的蛋白质的复合物。使用分析物特异性亲本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.11.16 EP 09176130.41.校准试剂,其包含通过接头与蛋白质载体连接的肽,其中所述肽包含目的表位。2.根据权利要求I的校准试剂,其中所述目的表位包含至少一个磷酸化氨基酸。3.根据权利要求I或2的 校准试剂,其中所述肽的长度为12至25个氨基酸。4.根据权利要求I至3中任一项的校准试剂,其中所述蛋白质载体是牛血清白蛋白(BSA)05.根据权利要求I至4中任一项的校准试剂,其中所述接头包含半胱氨酸和8-氨基-3,6- 二氧辛酸(8-amino-3, 6-Dioxaoctanoic acid)。6.权利要求I至5中任一项的校准试剂,其中所述肽蛋白质载体比例在O.3和I之间7.产生标准曲线的方法,其包括以下步骤 a)在阵列上固定2个或多个浓度的根据权利要求I至6中任一项的校准试剂, b)孵育所述阵列和可检测的目的亲和试剂, c)对2个或多个浓度的所述校准试剂的每种浓度测量结合的亲和试剂的信号强度,和 d)关联信号强度和目的表位的量。8.定量样品中包含目的表位的蛋白质的浓度的方法,其包括 a)在阵列上固定 i)2个或多个浓度的根据权利要求I至6中任一项的校准试剂,和 ii)I个或多个生物学样品, b)孵育所述阵列和可检测的目的亲和试剂, c)对2个或多个浓度的所述校准试剂中的每种浓度和I个或多个生物学样品中的每一种测量结合的亲和试剂的信号强度, d)关联信号强度和目的表位的量,和 e)定量I个或多个生物学样品中的包含目的表位的蛋白质。9.测定目的亲和试剂的检测下限的方法,其包括 a)在阵列上固定2个或多个浓度的根据权利要求I至6中任一项的校准试剂, b)孵育所述阵列和可检测的目的亲和试剂, c)对2个或多个浓度的所述校准试剂中的每种浓度测量结合的亲和试剂的信号强...

【专利技术属性】
技术研发人员:M·阿萨迪格尔E·诺戈采克
申请(专利权)人:弗·哈夫曼拉罗切有限公司
类型:发明
国别省市:

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