一种提高自由基清除能力的黄精皂甙的提取方法技术

本发明专利技术属于黄精深加工领域，尤其涉及一种黄精皂甙的提取及制备方法，用于解决现有提取方法效率低、纯度不高、高成本，从而导致皂甙产品DPPH自由基清除能力下降的问题。本发明专利技术提取及制备方法所使用的夹带剂、溶剂等具有无毒、无害、用量少、成本低的特点，工艺简单、无环境污染，具有高效、省时和成本低等优点，是一种绿色环保、前景广阔的黄精皂甙提取技术。本发明专利技术提供的一种黄精皂甙的提取方法，包括：原料处理、超临界二氧化碳萃取、粗提、树脂吸附和成品制备等步骤，得黄精皂甙产品；方法适宜工业化生产，提取率高、纯度高，根据本发明专利技术方法得到的黄精皂甙的DPPH自由基清除能力比传统乙醇提法提高1.41~1.86倍，比传统水提法提高1.21~1.59倍，具有明显提高的DPPH自由基清除能力。

【技术实现步骤摘要】
一种提高自由基清除能力的黄精皂甙的提取方法
本专利技术属于黄精加工
更具体地，本专利技术涉及一种提高自由基清除能力的黄精皂甙的提取方法。
技术介绍
黄精别名土灵芝、太阳草、鸡头参,为百合科黄精属植物滇黄精PolygonatumkingianumColl.EtHemsl.、黄精P.sibiricumRed.或多花黄精P.cyrtonemaHua的干燥根茎。黄精具有补气养阴、健脾、润肺、益肾的功效。黄精在全世界有40余种，我国有31种，分布于全国各地；其中，西北地区有18种黄精属植物，药用有11种，主要分布于甘肃和陕西，特别是在秦岭蕴藏量极大。黄精是我国的传统中药，其药用历史已有2000多年，在古代常被视为“长生不老和延年益寿”药用植物目前从黄精中已分离得到的化学成分主要包括黄精多糖、甾体皂苷、黄酮类化合物、生物碱、强心苷、木脂素、维生素和多种对人体有用的氨基酸等活性成分。现代药理学研究表明，黄精具有提高免疫力、降血糖、降血脂、抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、提高记忆力等作用。有报道也认为，生黄精应用于临床时，会产生口舌麻木，刺激咽喉的副作用，经炮制后不仅可消除刺激性副作用，同时使黄精药效增强。因而，以黄精中的皂甙为提取指标来提取黄精药材中的有效成分，对控制黄精的质量及提升黄精的利用价值具有重要意义。大量科学实验证明，机体的多种疾病与自由基对机体的氧化损伤有关，与医学密切相关的是氧自由基。人体内的自由基95%以上属于氧自由基，其主要形式有羟自由基、超氧阴离子、过氧化自由基、单线态氧、过氧化氢、过氧亚硝基等。其中羟自由基是氧自由基中对人机体损害最大的。迄今用于评价植物抗氧化能力的方法很多，但这些方法或者繁琐费时，或者所需设备或试剂价格昂贵，应当选择一种能很好分析自由基清除能力的指标，以使自由基清除能力的评价更加全面、简单易行并具有可重现性。DPPH是一种稳定的有机自由基，通过检测生物试剂对DPPH自由基的清除能力，可以表示该生物试剂的抗氧化性的强弱。因而，本专利技术人选择了清除DPPH自由基的抗氧化体系用于评价黄精皂甙的抗氧化性能。黄精皂甙的提取方法有很多种，包括溶剂提取法、酸提法、碱提法、酶解法、超滤法、超声波辅助提取法、微波提取法等。黄精皂甙是植物皂甙中的一种，根据其溶解性等相关特性，目前主要的提取方法有水提醇沉法、超声细胞粉碎法、酶法等。例如CN201410044465.7、“苦瓜皂甙提取新技术”以及CN201010127667.X、“一种连续提取黄精皂甙和黄精多糖的工艺”等专利申请公开了皂甙的这些提取方法。而以提高黄精皂甙自由基清除能力为目的的超临界二氧化碳萃取（SupercriticalFluidExtraction，简称SFE）技术，是近20年来国际上迅速发展的新一代化工分离技术，已广泛应用于食品、香料、医药、烟草等行业。CO2是最常用的超临界流体。与传统方法比较，超临界CO2萃取(SFE-CO2)应用于中药领域具有许多独特的优点，对实现中药现代化具有重要意义和可观的应用前景。例如，CN200710014170.5、“超临界二氧化碳萃取桔梗皂甙方法”，CN200710014170.5、“超临界二氧化碳萃取桔梗皂甙方法”以及CN201210350322.X、“一种樱花皂甙的提纯方法”公开了利用超临界提取方法从植物中提取皂甙的方法。这种方法能够克服常规乙醇或水提取带来的产率低、操作温度高、耗时长及对活性物质带来的不利影响。本申请人研制了利用超临界提取方法从黄精中提取黄精皂甙的方法，这种方法能够加强与样品相接触的溶剂，并破坏其中黄精中的细胞组分，将所需化合物从样品基体中分离出来，使其进入溶剂中。本专利技术方法提取的黄精皂甙具有更高的自由基清除能力。
技术实现思路
[要解决的技术问题]本专利技术的目的是提供一种提高自由基清除能力的黄精皂甙的提取方法。[技术方案]本专利技术是通过下述技术方案实现的。本专利技术涉及一种提高自由基清除能力的黄精皂甙的提取方法，所述方法包括以下步骤：(1)原料处理将黄精除去杂质并洗净后置于烘箱中烘至近干，然后恒温恒湿干燥器内烘至恒重，使得黄精的含水率低于0.01%，然后粉碎并过100目筛后，得到黄精粉末（第一产物）；(2)超临界二氧化碳萃取步骤(1)得到的第一产物用超临界萃取设备进行萃取，得到固液混合物（第二产物）；(3)粗提步骤(2)得到的固液混合物进行过滤，得到的滤渣用提取溶剂洗涤3次，洗涤之后的滤渣合并，得到黄精皂甙粗产品（第三产物）；(4)树脂吸附先将工业级LICHROLUTEN树脂进行预处理，以除掉LICHROLUTEN树脂中含有的少量未聚合单体、交联剂、致孔剂以及其它有害有机、无机杂质；将步骤(3)得到的第三产物加水配置成浓度10.0mg/mL的溶液，接着用预处理过的工业级LICHROLUTEN树脂对所述水溶液进行吸附，然后在水浴中振荡24h，保持水浴温度恒定为40℃，振荡频率为900~1000r/min，得到第四产物；(5)成品制备将步骤(4)的吸附第四产物后的LICHROLUTEN树脂过滤，过滤后的树脂用蒸馏水洗涤两次，待树脂滤干后用乙醇进行动态洗脱，洗脱液浓缩后真空冷冻干燥，得到黄精皂甙提取物固体（第五产物）。根据本专利技术的一种优选实施方案，步骤(1)中所述烘箱的温度为50~60℃，所述的恒温恒湿干燥器的温度为100~110℃。根据本专利技术的另一种优选实施方案，在步骤(2)中，萃取使用的夹带剂是甲醇或乙醇，其浓度为60%~80%，所述黄精粉末与所述夹带剂按照黄精粉末的质量与夹带剂的体积比1:30~1:50(mg/mL)的比例进行混合。根据本专利技术的另一种优选实施方案，在步骤(2)中，萃取条件为温度30~50℃、压力50~70MPa，萃取时间为1~2h。根据本专利技术的另一种优选实施方案，在步骤(3)中，所述的提取溶剂是液态CO2，滤渣的质量与提取溶剂的体积比为1:40~1:60（g/mL）。根据本专利技术的另一种优选实施方案，在步骤(4)中，用预处理过的工业级LICHROLUTEN树脂对所述水溶液进行吸附，吸附流速为0.8~1.0BV/h，吸附时间为2h。根据本专利技术的另一种优选实施方案，在步骤(5)中，所述的乙醇的浓度是70%，洗脱速率为1.0~2.0BV/h。根据本专利技术的另一种优选实施方案，在步骤(5)中，洗脱液在60℃条件下浓缩到原有体积的10~15%，然后在-20~-10℃温度和0.05~0.1MPa压力条件下进行真空冷冻干燥。下面将更详细地描述本专利技术。本专利技术涉及一种提高自由基清除能力的黄精皂甙的提取方法，所述方法包括以下步骤：(1)原料处理将黄精除去杂质并洗净后置于50~60℃烘箱中烘至近干，然后在100~110℃恒温恒湿干燥器内烘至恒重，使得黄精的含水率低于0.01%，然后粉碎并过100目筛后，得到黄精粉末，备用。在该原料处理步骤中，烘干黄精的烘箱温度50~60℃是适宜的，如果高于60℃，会造成黄精表面组织水分散失过快带来组织体的萎缩，如果低于50℃则会导致黄精原料预处理时间过长。恒温恒湿干燥器的温度100~110℃是适宜的，如果温度高于110℃，会造成黄精原料组织内活性物质的降解，如果低于100℃则会导致水分清除不彻底。使用的恒温恒湿干燥器是本
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【技术保护点】
1.一种提高自由基清除能力的黄精皂甙的提取方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)原料处理将黄精除去杂质并洗净后置于烘箱中烘至近干，然后在恒温恒湿干燥器内烘至恒重，使得黄精的含水率低于0.01%，然后粉碎并过100目筛后，得到黄精粉末（第一产物）；(2)超临界二氧化碳萃取步骤(1)得到的第一产物用超临界萃取设备进行萃取，得到固液混合物（第二产物）；(3)粗提步骤(2)得到的第二产物进行过滤，得到的滤渣用提取溶剂洗涤3次，洗涤之后的滤渣合并，得到黄精皂甙粗产品（第三产物）；(4)树脂吸附先将工业级LICHROLUT EN树脂进行预处理，以除掉LICHROLUT EN树脂中含有的少量未聚合单体、交联剂、致孔剂以及其它有害有机、无机杂质；将步骤(3)得到的第三产物加水配置成浓度10.0mg/mL的溶液，接着用预处理过的工业级LICHROLUT EN树脂对所述水溶液进行吸附，然后在水浴中振荡24h，保持水浴温度恒定为40℃，振荡频率为900~1000r/min，得到第四产物；(5)成品制备将步骤(4)的吸附第四产物后的LICHROLUT EN树脂过滤，过滤后的树脂用蒸馏水洗涤两次，待树脂滤干后用乙醇进行动态洗脱，洗脱液浓缩后真空冷冻干燥，得到黄精皂甙提取物固体（第五产物）。...

【技术特征摘要】
1.一种提高自由基清除能力的黄精皂甙的提取方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)原料处理将黄精除去杂质并洗净后置于烘箱中烘至近干，然后在恒温恒湿干燥器内烘至恒重，使得黄精的含水率低于0.01%，然后粉碎并过100目筛后，得到黄精粉末（第一产物）；(2)超临界二氧化碳萃取步骤(1)得到的第一产物用超临界萃取设备进行萃取，得到固液混合物（第二产物）；(3)粗提步骤(2)得到的第二产物进行过滤，得到的滤渣用提取溶剂洗涤3次，洗涤之后的滤渣合并，得到黄精皂甙粗产品（第三产物）；(4)树脂吸附先将工业级LICHROLUTEN树脂进行预处理，以除掉LICHROLUTEN树脂中含有的少量未聚合单体、交联剂、致孔剂以及其它有害有机、无机杂质；将步骤(3)得到的第三产物加水配置成浓度10.0mg/mL的溶液，接着用预处理过的工业级LICHROLUTEN树脂对所述水溶液进行吸附，然后在水浴中振荡24h，保持水浴温度恒定为40℃，振荡频率为900~1000r/min，得到第四产物；(5)成品制备将步骤(4)的吸附第四产物后的LICHROLUTEN树脂过滤，过滤后的树脂用蒸馏水洗涤两次，待树脂滤干后用乙醇进行动态洗脱，洗脱液浓缩后真空冷冻干燥，得到黄精皂甙提取物...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘艺，赵震毅，宋俊和，李国斌，周志强，凌玮玮，饶兴福，
申请(专利权)人：华宝香精股份有限公司，
类型：发明
国别省市：西藏,54