一种益生菌制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及水产养殖领域，公开了一种益生菌制剂及其制备方法和应用。所述益生菌制剂为由芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌和光合菌通过液态发酵制备得到，所述芽孢杆菌由枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌组成，所述乳酸菌由植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌组成，所述酵母菌由产朊假丝酵母和酿酒酵母组成，所述光合菌为沼泽红假单胞菌。该益生菌制剂能够有效降解水产养殖水体中的氨氮、亚硝酸盐，并分解水体有机物，调节水体的pH值，提高水体溶氧量，同时还能够抑制养殖水体中的有害病原菌。此外，当该益生菌制剂还可以改善水产动物肠道微生态环境，调节肠道菌群平衡，抑制有害菌生长，有助于增加营养吸收，提高饲料利用率。

A probiotic preparation and its preparation method and Application

The invention relates to the field of aquaculture, and discloses a probiotic preparation, its preparation method and application. The probiotic preparation is prepared by liquid fermentation of Bacillus subtilis, Lactobacillus lactis, yeast and photosynthetic bacteria. The bacillus is composed of Bacillus subtilis and Bacillus natto. The lactobacillus is composed of Lactobacillus plantarum, Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus casei. The yeast is composed of Candida priona and Saccharomyces cerevisiae, and the photosynthetic bacteria is Rhodopseudomonas palustris. Bacilli. The probiotic preparation can effectively degrade ammonia nitrogen and nitrite in aquaculture water, decompose organic matter in aquaculture water, regulate the pH value of water, increase dissolved oxygen in aquaculture water, and inhibit harmful pathogens in aquaculture water. In addition, the probiotics can also improve the intestinal microecological environment of aquatic animals, regulate the intestinal flora balance, inhibit the growth of harmful bacteria, help to increase nutrient absorption and improve feed utilization.

【技术实现步骤摘要】
一种益生菌制剂及其制备方法和应用
本专利技术属于水产养殖领域，具体涉及一种益生菌制剂及其制备方法和应用。
技术介绍
水产动物养殖主要是以利用可养殖的淡水或海水水域，按照养殖水产动物的生物学特性和对水域环境条件的要求，运用水产养殖技术和设施，从事水生经济动物养殖。近年来，随着我国的生活水平、经济条件的不断提高，水产品的供应量也大幅度提升，水产养殖已经受到人们越来越多的关注。然而，在水产养殖过程中也出现了一系列问题，例如，由于过量投饵料、施肥，致使有害微生物、有害藻类快速繁殖，以及出现排泄物与残饵污染，氨氮、亚硝酸盐含量增加，破坏养殖水体微生态平衡，以及各种生活、工业、农业的污水和污染养殖用水导致水质恶化；另一方面，养殖用户为了治疗或预防水产疾病，在养殖过程使用鱼药或抗生素，虽然取得了一定的应急治疗效果，但是却带来诸多问题，如抗药性、药物在水产动物或环境中残留。因此，采用某种无毒无害、绿色环保的产品来调节、改善养殖水体环境显得尤其重要。采用益生菌群调水不仅具有无污染、无残留、无副作用、成本低等优势，还能够抑制病原微生物繁殖、提高水产动物自身免疫力、维持养殖生态环境平衡，因此益生菌产品已经成为当今研究热点，它是实施水产健康养殖的重要技术手段之一，故深受广大用户喜爱并被广泛接受，是未来养殖业发展的必然趋势。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服现有技术的以上缺陷，而提供一种新的益生菌制剂及其制备方法和应用。具体地，本专利技术提供了一种益生菌制剂，其中，所述益生菌制剂为由芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌和光合菌通过液态发酵制备得到，所述芽孢杆菌由枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌组成，所述乳酸菌由植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌组成，所述酵母菌由产朊假丝酵母和酿酒酵母组成，所述光合菌为沼泽红假单胞菌。优选地，所述益生菌制剂中芽孢杆菌的活菌个数为3×107CFU/mL-9×107CFU/mL，所述乳酸菌的活菌个数为1×109CFU/mL-9×109CFU/mL，所述酵母菌的活菌个数为1×107CFU/mL-7×107CFU/mL，所述光合菌的活菌个数为4×105CFU/mL-6×105CFU/mL。优选地，所述芽孢杆菌中枯草芽孢杆菌的活菌个数为4×107CFU/mL-9×107CFU/mL，纳豆芽孢杆菌的活菌个数为3×107CFU/mL-8×107CFU/mL；所述乳酸菌中植物乳杆菌的活菌个数为2×109CFU/mL-8×109CFU/mL，嗜酸乳杆菌的活菌个数为1×109CFU/mL-8×109CFU/mL，干酪乳杆菌的活菌个数为1×109CFU/mL-5×109CFU/mL；所述酵母菌中产朊假丝酵母的活菌个数为1×107CFU/mL-6×107CFU/mL，酿酒酵母的活菌个数为4×107CFU/mL-6×107CFU/mL；所述光合菌中沼泽红假单胞菌的活菌个数为4×105CFU/mL-6×105CFU/mL。优选地，所述益生菌制剂的pH值为3.5以下。本专利技术还提供了一种益生菌制剂的制备方法，该方法包括将芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌和光合菌进行液态发酵，所述芽孢杆菌由枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌组成，所述乳酸菌由植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌组成，所述酵母菌由产朊假丝酵母和酿酒酵母组成，所述光合菌为沼泽红假单胞菌。优选地，所述液态发酵的方法包括以下步骤：(1)原菌种活化：将枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌分别接种到已灭菌的斜面培养基I中好氧培养直至长出菌落，将冷冻保藏的植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌分别接种到已灭菌的斜面培养基II中好氧培养直至长出菌落，将产朊假丝酵母和酿酒酵母分别接种到已灭菌的斜面培养基III中好氧培养直至长出菌落，将沼泽红假单胞菌接种到已灭菌的斜面培养基IV中厌氧培养直至长出菌落，得到各自活化斜面菌种；所述斜面培养基I含有牛肉膏1-5g、蛋白胨5-15g、氯化钠2-8g、琼脂10-30g和蒸馏水1L且pH值为7.2-7.5；所述斜面培养基II含有蛋白胨5-15g、牛肉粉2-8g、酵母粉2-8g、葡萄糖10-30g、吐温800.5-2mL、磷酸氢二钾1-5g、乙酸钠2-8g、柠檬酸三铵1-5g、硫酸镁0.1-1g、硫酸锰0.01-0.1g、琼脂粉10-30g和蒸馏水1L且pH值为6.2-6.5；所述斜面培养基III含有葡萄糖10-30g、蛋白胨10-30g、酵母膏5-15g、氯霉素0.05-0.2g、琼脂粉10-30g和蒸馏水1L且pH自然；所述培养基IV含有蛋白胨1-5g、酵母膏1-5g、氯化钙0.1-1g、硫酸镁0.1-1g、琼脂粉10-30g和蒸馏水1L且pH值为6.8-7.0；(2)一级种子液的制备：分别将由步骤(1)得到的枯草芽孢杆菌斜面菌种和纳豆芽孢杆菌斜面菌种至少部分接种到已灭菌的液体培养基I中，于30-40℃好氧培养20-30h，分别得到各自芽孢杆菌原菌液；分别将由步骤(1)得到的植物乳杆菌斜面菌种、嗜酸乳杆菌斜面菌种和干酪乳杆菌斜面菌种至少部分接种到已灭菌的液体培养基II中，于30-40℃厌氧培养18-30h，分别得到各自乳酸菌原菌液；分别将由步骤(1)得到的产朊假丝酵母斜面菌种和酿酒酵母斜面菌种至少部分接种到已灭菌的液体培养基III中，于28-30℃好氧培养40-50h，分别得到各自酵母菌原菌液；将步骤(1)得到的沼泽红假单胞菌斜面菌种至少部分接种到已灭菌的液体培养基IV中，在钨丝灯照射的条件下，于28-30℃厌氧培养2-4d，得到沼泽红假单胞菌原菌液；所述液体培养基I含有牛肉膏1-5g、蛋白胨5-15g、氯化钠2-8g和蒸馏水1L且pH值为7.2-7.5；所述液体培养基II含有蛋白胨5-15g、牛肉粉2-8g、酵母粉2-8g、葡萄糖10-30g、吐温800.5-2mL、磷酸氢二钾1-5g、乙酸钠2-8g、柠檬酸三铵1-5g、硫酸镁0.1-1g、硫酸锰0.01-0.1g和蒸馏水1L且pH值为6.2-6.5；所述液体培养基III含有葡萄糖10-30g、蛋白胨10-30g、酵母膏5-15g、氯霉素0.05-0.2g和蒸馏水1L且pH值自然；所述液体培养基IV含有蛋白胨1-5g、酵母膏1-5g、氯化钙0.1-1g、硫酸镁0.1-1g和蒸馏水1L且pH值为6.8-7.0；(3)二级种子液的制备：将步骤(2)得到的植物乳杆菌原菌液、嗜酸乳杆菌原菌液和干酪乳杆菌原菌液各自独立地按0.5-2wt％的接种量接种到已灭菌的同一发酵培养基I中，于30-40℃厌氧培养18-20h，得到复合乳酸菌二级种子液；(4)益生菌发酵：将枯草芽孢杆菌原菌液、纳豆芽孢杆菌原菌液、产朊假丝酵母原菌液、酿酒酵母原菌液与沼泽红假单胞菌原菌液各自独立地按0.5-2wt‰接种量接入已灭菌的同一发酵培养基II中，于30-40℃有氧发酵18-20h，之后再以5-10wt％的接种量接入所述复合乳酸菌二级种子液，将pH值调节至6.5-7，之后于30-40℃厌氧发酵24-48h；所述发酵培养基I和第二发酵培养基II的组分相同或不同，且各自独立地含有糖蜜30-50g、酵母膏1-2g、磷酸氢二钾0.2-0.25g、硫酸镁0.2-0.25g、硫酸锰0.05-0.1g和蒸馏水1L且pH值为7.2-7.5。优选地，步骤(1)中，将所述枯草芽孢杆菌、纳豆芽本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌制剂为由芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌和光合菌通过液态发酵制备得到，所述芽孢杆菌由枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌组成，所述乳酸菌由植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌组成，所述酵母菌由产朊假丝酵母和酿酒酵母组成，所述光合菌为沼泽红假单胞菌。

【技术特征摘要】
1.一种益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌制剂为由芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌和光合菌通过液态发酵制备得到，所述芽孢杆菌由枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌组成，所述乳酸菌由植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌组成，所述酵母菌由产朊假丝酵母和酿酒酵母组成，所述光合菌为沼泽红假单胞菌。2.根据权利要求1所述的益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌制剂中芽孢杆菌的活菌个数为3×107CFU/mL-9×107CFU/mL，所述乳酸菌的活菌个数为1×109CFU/mL-9×109CFU/mL，所述酵母菌的活菌个数为1×107CFU/mL-7×107CFU/mL，所述光合菌的活菌个数为4×105CFU/mL-6×105CFU/mL。3.根据权利要求2所述的益生菌制剂，其特征在于，所述芽孢杆菌中枯草芽孢杆菌的活菌个数为4×107CFU/mL-9×107CFU/mL，纳豆芽孢杆菌的活菌个数为3×107CFU/mL-8×107CFU/mL；所述乳酸菌中植物乳杆菌的活菌个数为2×109CFU/mL-8×109CFU/mL，嗜酸乳杆菌的活菌个数为1×109CFU/mL-8×109CFU/mL，干酪乳杆菌的活菌个数为1×109CFU/mL-5×109CFU/mL；所述酵母菌中产朊假丝酵母的活菌个数为1×107CFU/mL-6×107CFU/mL，酿酒酵母的活菌个数为4×107CFU/mL-6×107CFU/mL；所述光合菌中沼泽红假单胞菌的活菌个数为4×105CFU/mL-6×105CFU/mL。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌制剂的pH值为3.5以下。5.一种益生菌制剂的制备方法，其特征在于，该方法包括将芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌和光合菌进行液态发酵，所述芽孢杆菌由枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌组成，所述乳酸菌由植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌组成，所述酵母菌由产朊假丝酵母和酿酒酵母组成，所述光合菌为沼泽红假单胞菌。6.根据权利要求5所述的益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述液态发酵的方法包括以下步骤：(1)原菌种活化：将枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌分别接种到已灭菌的斜面培养基I中好氧培养直至长出菌落，将冷冻保藏的植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌分别接种到已灭菌的斜面培养基II中好氧培养直至长出菌落，将产朊假丝酵母和酿酒酵母分别接种到已灭菌的斜面培养基III中好氧培养直至长出菌落，将沼泽红假单胞菌接种到已灭菌的斜面培养基IV中厌氧培养直至长出菌落，得到各自活化斜面菌种；所述斜面培养基I含有牛肉膏1-5g、蛋白胨5-15g、氯化钠2-8g、琼脂10-30g和蒸馏水1L且pH值为7.2-7.5；所述斜面培养基II含有蛋白胨5-15g、牛肉粉2-8g、酵母粉2-8g、葡萄糖10-30g、吐温800.5-2mL、磷酸氢二钾1-5g、乙酸钠2-8g、柠檬酸三铵1-5g、硫酸镁0.1-1g、硫酸锰0.01-0.1g、琼脂粉10-30g和蒸馏水1L且pH值为6.2-6.5；所述斜面培养基III含有葡萄糖10-30g、蛋白胨10-30g、酵母膏5-15g、氯霉素0.05-0.2g、琼脂粉10-30g和蒸馏水1L且pH自然；所述培养基IV含有蛋白胨1-5g、酵母膏1-5g、氯化钙0.1-1g、硫酸镁0.1-1g、琼脂粉10-30g和蒸馏水1L且pH值为6.8-7.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：林松泉，庄若飞，邹文政，乔欣君，黄榕，
申请(专利权)人：厦门惠盈动物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35