一种桑葚多酚的提取方法技术

本发明专利技术属于生物与新医药中轻工和化工生物技术的天然产物有效成份的分离提取技术，涉及植物提取物领域具体为一种桑葚多酚的提取方法。该方法首先采用打浆机将新鲜桑葚打浆，得到桑葚浆；然后利用超声辅助的低共熔试剂对桑葚中的多酚进行萃取；最后依次采用超滤，高速逆流色谱，超临界流体萃取对桑葚多酚进行纯化。该方法制备的桑葚多酚纯度高，保健作用明显，可以直接作为食品保健品的功能添加剂。

A Method for Extracting Polyphenols from Mulberry

The invention belongs to the technology of separating and extracting effective components of natural products of light industry and chemical biotechnology in biology and new medicine, and relates to the field of plant extracts, in particular to a method for extracting mulberry polyphenols. First, fresh mulberry was beaten by beater to obtain mulberry pulp; then, polyphenols in mulberry were extracted by low eutectic reagent assisted by ultrasound; finally, mulberry polyphenols were purified by ultrafiltration, high speed countercurrent chromatography and supercritical fluid extraction. The mulberry polyphenols prepared by this method have high purity and obvious health function, and can be directly used as functional additives for food health products.

【技术实现步骤摘要】
一种桑葚多酚的提取方法
本专利技术属于生物与新医药中轻工和化工生物技术的天然产物有效成份的分离提取技术，涉及植物提取物领域，具体为一种桑葚多酚的提取方法。
技术介绍
桑葚，又称桑果、乌葚等，属桑科桑属，是桑树的成熟果实．它含有丰富的维生素、矿物元素以及人体必需氨基酸及其他微量元素，具有补肝益肾、滋阴补血、黑专利技术目和延年益寿等功能，因而深受广大消费者欢迎，被誉为“21世纪的最佳保健果品”。研究表明，成熟桑葚含有丰富的多酚类化合物，桑葚多酚具有抗氧化，减轻机体损伤，延缓衰老，并预防阿兹海默症，降血糖，治疗癌症等作用。目前食品中使用的桑葚多为桑甚汁以及桑葚果肉，食用时丢失了大量的活性成分，使得桑葚产品保健效果不明显。因此开发可食用的桑葚多酚提取物提高桑葚产品的保健效果具有重要的意义。目前对桑葚多酚的萃取研究比较少见。传统的植物多酚的提取方法为有机溶剂浸提法或者超声波辅助提取法，该类方法有机溶剂消耗大，得到的产物提取效率不高且纯化步骤复杂，费时费力，因此开发高效环保地桑葚多酚的提取方法对加速桑葚提取物在食品保健品中的应用具有重要的意义。
技术实现思路
为了提供可食用的桑葚多酚提取物且解决多酚提取技术中提取效率低，有机溶剂消耗大的问题，本专利技术提供了一种高效环保的桑葚多酚的提取方法。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供如下技术方案：一种桑葚多酚的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将新鲜的桑葚洗净后，待表面的水分自然晾干后，用打浆机打浆，得到桑葚浆；（2）将桑葚浆与低共熔试剂-水混合溶液在200-300W，40-60℃条件下超声30-40min后过滤，将滤液过超滤膜除去大分子杂质后将滤液减压浓缩后得桑葚多酚提取液；（3）向桑葚多酚提取液中加入乙醇将低共熔试剂沉淀后过滤得滤液，将固定相注满高速逆流色谱的螺旋管后开启直流电机，将滤液进样后顺时针转动，转速调至400-500r／min，并以1.8-1.4mL／min的流量从首端泵入流动相后用自动收集仪收集出样口流出的液体；（4）将收集的液体减压蒸干后置于超临界流体装置中，将超临界流体萃取纯化后，制备得到桑葚多酚。优选的，步骤（2）中所述的低共熔试剂的制备方法为：将氢键给体与氢键受体按1:2的摩尔比混合后溶于水中，将得到的水溶液置于旋转蒸发仪中，在-0.5—0.8MPa,55-65℃条件下旋蒸，直至水溶液的体积不再变化既得低共熔试剂。优选的，低共熔试剂的制备方法中所述的氢键给体为尿素，甘油以及乙二醇中的一种；所述的氢键受体为氯化胆碱；所述的低共熔试剂的密度为1.35-1.45g/mL。优选的，步骤（2）中所述的低共熔试剂-水混合溶液中低共熔试剂的质量分数为25-45%。优选的，步骤（2）中所述的超滤膜的截留分子量为10000；所述的浓缩后的桑葚多酚提取液的密度为1.15-1.2g/mL优选的，步骤（3）中所述的固定相与流动相的制备方法为：将正己酸-四氢呋喃-水按1：1：2-3的体积比混合均匀后静置20-30min后，过分液漏斗后所得上相为固定相，下相为流动相。优选的，步骤（4）中所述的超临界流体萃取条件为：萃取压力为25-30Mpa，CO2流速为15-18L/h，萃取时间为25-30min。优选的，步骤（4）中所述的桑葚多酚中多酚的含量不低于90%。与现有技术相比，本专利技术所述的一种桑葚多酚的提取方法具有以下有益效果：本专利技术采用打浆机将桑葚打碎，加快了桑葚中活性成分的浸出，提高了萃取效率；采用天然绿色的低共熔试剂联合超声辅助对桑葚中的多酚进行萃取，避免了有机溶剂的消耗，提取方法更为环保；本专利技术联合超滤，超临界流体萃取对桑葚多酚进行纯化，使得制备的多酚纯度高，保健作用明显；采用正己酸-四氢呋喃-水形成的两相后将上相即超分子溶剂相作为高速逆流色谱中的固定相，超分子溶剂中的纳米聚集体的强吸附作用显著的提高了多酚的纯化效率。经本专利技术制备的桑葚多酚可以直接作为食品保健品的功能添加剂。具体实施方式【实施例1】一种桑葚多酚的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将新鲜的桑葚洗净后，待表面的水分自然晾干后，用打浆机打浆，得到桑葚浆；（2）将桑葚浆与35%的氯化胆碱-尿素低共熔试剂-水混合溶液在250W，55℃条件下超声35min后过滤，将滤液过截留分子量为10000的超滤膜后除去大分子杂质后将滤液减压浓缩后得桑葚多酚提取液；（3）向桑葚多酚提取液中加入乙醇将低共熔试剂沉淀后过滤得滤液，将固定相注满高速逆流色谱的螺旋管后开启直流电机，将滤液进样后顺时针转动，转速调至500r／min，并以1.4mL／min的流量从首端泵入流动相后用自动收集仪收集出样口流出的液体；（4）将收集的液体减压蒸干后置于超临界流体装置中，在萃取压力为25Mpa，CO2流速为15L/h，萃取时间为25min的条件下萃取纯化后，制备得到桑葚多酚。【实施例2】一种桑葚多酚的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将新鲜的桑葚洗净后，待表面的水分自然晾干后，用打浆机打浆，得到桑葚浆；（2）将桑葚浆与40%的氯化胆碱-乙二醇低共熔试剂-水混合溶液在250W，60℃条件下超声30min后过滤，将滤液过截留分子量为10000的超滤膜后除去大分子杂质后将滤液减压浓缩后得桑葚多酚提取液；（3）向桑葚多酚提取液中加入乙醇将低共熔试剂沉淀后过滤得滤液，将固定相注满高速逆流色谱的螺旋管后开启直流电机，将滤液进样后顺时针转动，转速调至450r／min，并以1.5mL／min的流量从首端泵入流动相后用自动收集仪收集出样口流出的液体；（4）将收集的液体减压蒸干后置于超临界流体装置中，在萃取压力为27Mpa，CO2流速为17L/h，萃取时间为25min的条件下萃取纯化后，制备得到桑葚多酚。【实施例3】一种桑葚多酚的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将新鲜的桑葚洗净后，待表面的水分自然晾干后，用打浆机打浆，得到桑葚浆；（2）将桑葚浆与40%的氯化胆碱-甘油低共熔试剂-水混合溶液在230W，55℃条件下超声35min后过滤，将滤液过截留分子量为10000的超滤膜后除去大分子杂质后将滤液减压浓缩后得桑葚多酚提取液；（3）向桑葚多酚提取液中加入乙醇将低共熔试剂沉淀后过滤得滤液，将固定相注满高速逆流色谱的螺旋管后开启直流电机，将滤液进样后顺时针转动，转速调至500r／min，并以1.4mL／min的流量从首端泵入流动相后用自动收集仪收集出样口流出的液体；（4）将收集的液体减压蒸干后置于超临界流体装置中，在萃取压力为27Mpa，CO2流速为16L/h，萃取时间为25min的条件下萃取纯化后，制备得到桑葚多酚。桑葚多酚含量的测定：标准曲线绘制：准确称取没食子酸标准品44.3mg。用水溶解并定容至100mL。以此溶液配成浓度为8.86μg/mL、17.72μg/mL、35.44μg/mL、70.88μg/mL、88.60μg/mL的溶液。分别取上述不同浓度溶液1mL加到10mL比色管中，然后依次加入1mL去离子水，0.5mL已稀释2倍的福林-酚试液，1.5mL26.7%Na2CO3溶液，最后用水定容至10mL，室温下反应2h，在760nm下测定去吸光度。以标准品溶液浓度为横坐标（x），吸光度为纵坐标（y），进行线性回归，线性回归方程为y=0.0本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种桑葚多酚的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将新鲜的桑葚洗净后，待表面的水分自然晾干后，用打浆机打浆，得到桑葚浆；（2）将桑葚浆与低共熔试剂‑水混合溶液在200‑300W，40‑60℃条件下超声30‑40min后过滤，将滤液过超滤膜除去大分子杂质后将滤液减压浓缩后得桑葚多酚提取液；（3）向桑葚多酚提取液中加入乙醇将低共熔试剂沉淀后过滤得滤液，将固定相注满高速逆流色谱的螺旋管后开启直流电机，将滤液进样后顺时针转动，转速调至400‑500 r／min，并以 1.8‑1.4 mL／min的流速从首端泵入流动相后用自动收集仪收集出样口流出的液体；（4）将收集的液体减压蒸干后置于超临界流体装置中，将超临界流体萃取纯化后，制备得到桑葚多酚。

【技术特征摘要】
1.一种桑葚多酚的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将新鲜的桑葚洗净后，待表面的水分自然晾干后，用打浆机打浆，得到桑葚浆；（2）将桑葚浆与低共熔试剂-水混合溶液在200-300W，40-60℃条件下超声30-40min后过滤，将滤液过超滤膜除去大分子杂质后将滤液减压浓缩后得桑葚多酚提取液；（3）向桑葚多酚提取液中加入乙醇将低共熔试剂沉淀后过滤得滤液，将固定相注满高速逆流色谱的螺旋管后开启直流电机，将滤液进样后顺时针转动，转速调至400-500r／min，并以1.8-1.4mL／min的流速从首端泵入流动相后用自动收集仪收集出样口流出的液体；（4）将收集的液体减压蒸干后置于超临界流体装置中，将超临界流体萃取纯化后，制备得到桑葚多酚。2.根据权利要求1所述的一种桑葚多酚的提取方法，其特征在于步骤（2）中所述的低共熔试剂的制备方法为：将氢键给体与氢键受体按1:2的摩尔比混合后溶于水中，将得到的水溶液置于旋转蒸发仪中，在-0.5—0.8MPa,55-65℃条件下旋蒸，直至水溶液的体积不再变化既得低共熔试剂。3.根据权利要求2所述的到低共熔试剂的制备方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨鑫，
申请(专利权)人：杨鑫，
类型：发明
国别省市：福建,35