一种抗猪流行性腹泻、猪瘟、伪狂犬和传染性胃肠炎的四联卵黄抗体可溶性粉及其制备方法技术

本发明专利技术属于免疫学与抗体制备技术领域，具体公开了一种抗猪流行性腹泻、猪瘟、伪狂犬和传染性胃肠炎的四联卵黄抗体可溶性粉及其制备方法。本发明专利技术以干糊精和麦芽糊精为载体，将添加有黄腐酸、蔗糖、山梨酸钾和叠氮钠的抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体喷洒到载体表面，制成高纯度，高稳定性，高疗效，且易于保存的可溶性粉剂，是一种针对猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎具有特异性、治疗效果好、疗效迅速的一种制剂，能够有效防治猪上述四种传染病。

【技术实现步骤摘要】
一种抗猪流行性腹泻、猪瘟、伪狂犬和传染性胃肠炎的四联卵黄抗体可溶性粉及其制备方法
本专利技术属于免疫学与抗体制备
，具体地说，涉及一种抗猪流行性腹泻、猪瘟、伪狂犬和传染性胃肠炎的四联卵黄抗体可溶性粉及其制备方法。
技术介绍
猪瘟俗称“烂肠瘟”，是猪瘟病毒引起的一种急性、发热、接触性传染传染病。各种年龄的猪都可感染，一年四季均可发生。具有高度传染性和致死性。是威胁养猪业的主要传染病之一。猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的一种传染病。伪狂犬病毒能够感染各种年龄猪，哺乳仔猪最为敏感。种猪感染伪狂犬病毒后引起母猪发情障碍、流产、产死胎、木乃伊胎和弱仔；伪狂犬病毒先天感染或早期感染引起哺乳仔猪的神经症状和高死亡率；对育肥猪伪狂犬病毒是呼吸系统免疫综合征的重要病原，引起生长育肥猪的呼吸系统症状和生长迟缓；猪场一旦呈现伪狂犬病阳性必将造成巨大的经济损失。猪传染性胃肠炎和流行性腹泻是猪的一种高度接触性肠道疾病。分别由传染性胃肠炎病毒和流行性腹泻病毒引起的，以呕吐，严重腹泻和脱水为特征的高度接触性肠道传染病。当前对猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎尚无有效的治疗药物，接种疫苗预防是控制上述疾病发生的重要手段，但当前由于免疫抑制、饲料霉变、各种应激、免疫不规范、疫苗质量参差不齐、免疫强度和免疫密度不够等原因，导致猪群长期隐性带毒和持续潜伏感染，时刻威胁猪群健康。当漏免或免疫失败的猪个体或猪场感染上述四种病毒后临床上主要采用抗病毒药物对症治疗和抗生素类药物来预防并发症的发生，但当新生仔猪未能从母乳中得到足够量的母源抗体时一旦感染上述四种病毒由于发病急，致死率高等原因导致上述治疗方法的治疗效果并不理想。因此急需开发一种能够针对上述四种猪常见传染病的特异、特效，治疗效果迅速的治疗制剂，并可适用于新生仔猪的疾病治疗。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术旨在提供一种抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体可溶性粉及其制备方法，可有效的预防和治疗上述四种传染病，同时具有常温条件下稳定性好，保质期长，运输和保存方便的优点。为了实现本专利技术目的，本专利技术的技术方案如下：本专利技术提供了一种抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体可溶性粉，其以干糊精和麦芽糊精作为载体，以抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体作为活性成分。进一步地，所述四联卵黄抗体可溶性粉的制备方法包括如下步骤：(1)制备抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体溶液；(2)向步骤(1)所得的四联卵黄抗体溶液中添加黄腐酸、蔗糖、山梨酸钾和叠氮钠，获得四联卵黄抗体组合溶液；(3)将步骤(2)所得的四联卵黄抗体组合溶液喷在所述载体上。进一步地，所述步骤(2)中，所述黄腐酸、蔗糖、山梨酸钾和叠氮钠的添加质量相对于所述四联卵黄抗体溶液的体积比分别为：3-5％、15-20％、0.01-0.03％和0.01-0.02％；优选为体积比分别为：5％、15％、0.02％和0.02％。进一步地，所述步骤(3)中，所述四联卵黄抗体组合溶液与所述载体的质量比为1:4-1:5。进一步地，所述载体中，干糊精和麦芽糊精的质量比为2:1-1:2，优选为1:1。更进一步地，所述步骤(1)包括如下步骤：S1、以猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎疫苗免疫产蛋高峰青年鸡，而后取该鸡群产的高免鸡蛋；S2、分离所述高免鸡蛋的蛋黄，用泊洛沙姆沉淀法去除油脂，收集含卵黄抗体的上清液；S3、取S2获得的上清液经过浓缩分离超滤系统进行超滤浓缩，即得。作为优选，S1中的免疫策略为：利用猪瘟弱毒疫苗、猪伪狂犬弱毒疫苗和猪流行性腹泻-猪传染性胃肠炎二联弱毒疫苗各免疫3次，再利用猪流行性腹泻-猪传染性胃肠炎二联灭活疫苗免疫2次。本专利技术还进一步提供一种抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体可溶性粉的制备方法，包括如下步骤：(1)制备抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体溶液；(2)向步骤(1)所得的四联卵黄抗体溶液中添加黄腐酸、蔗糖、山梨酸钾和叠氮钠，获得四联卵黄抗体组合溶液；(3)将步骤(2)所得的四联卵黄抗体组合溶液喷在所述载体上。进一步地，所述黄腐酸、蔗糖、山梨酸钾和叠氮钠的添加质量相对于所述四联卵黄抗体溶液的体积比分别为：3-5％、15-20％、0.01-0.03％和0.01-0.02％；优选为体积比分别为：5％、15％、0.02％和0.02％；和/或，所述四联卵黄抗体组合溶液与所述载体的质量比为1:4-1:5；和/或，所述载体中，干糊精和麦芽糊精的质量比为2:1-1:2，优选为1:1。更为优选，所述步骤(1)包括如下步骤：S1、以猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎疫苗免疫产蛋高峰青年鸡，而后取该鸡群产的高免鸡蛋；优选免疫策略为：利用猪瘟弱毒疫苗、猪伪狂犬弱毒疫苗和猪流行性腹泻-猪传染性胃肠炎二联弱毒疫苗各免疫3次，再利用猪流行性腹泻-猪传染性胃肠炎二联灭活疫苗免疫2次；S2、分离所述高免鸡蛋的蛋黄，用泊洛沙姆沉淀法去除油脂，收集含卵黄抗体的上清液；S3、取S2获得的上清液经过浓缩分离超滤系统进行超滤浓缩，即得。可选的，S1所用的疫苗猪瘟活疫苗、猪伪狂犬病活疫苗均购自山东绿都生物科技有限公司；猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻二联活疫苗购自大北农；猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻二联灭活疫苗购自武汉科前生物股份有限公司。优选的，S2具体为：将分离的蛋黄和去离子水搅拌至完全混合，得到蛋黄水溶液；加入泊洛沙姆溶液，使混合溶液中泊洛沙姆浓度不超过1.0w/v％-1.2w/v％，搅拌后静置沉淀蛋黄油脂，分离提取上清液；将上清液过滤去除杂质后，再次加入泊洛沙姆溶液，使混合溶液中泊洛沙姆浓度为0.5w/v％，搅拌后静置再次分离沉淀蛋黄中残余油脂，得到粗提分离的卵黄抗体溶液，即为含卵黄抗体的上清液。进一步地，第一次加入泊洛沙姆溶液后静置的环境温度不超过10℃，静置时间不低于8小时。更为优选的，S2利用泊洛沙姆沉淀法去除油脂，收集含卵黄抗体的上清液具体包括以下步骤：a)用去离子水配制10％(w/v)泊洛沙姆溶液，例如将1千克泊洛沙姆加入到10升去离子水中搅拌溶解；b)将分离的蛋黄和去离子水按1∶6的比例混合后用力搅拌使蛋黄和水完全混合，得到蛋黄水溶液；c)向步骤b)中获得的蛋黄水溶液中加入步骤a)配制的10％(w/v)泊洛沙姆溶液，使混合溶液中泊洛沙姆浓度为1％(w/v)，用力搅拌，获得蛋黄和泊洛沙姆水溶液A；在4℃-10℃下静置8-12小时，沉淀蛋黄油脂，分离提取上清液；d)将步骤c)获得的上清液经过四层医用纱布过滤去除杂质，获得卵黄抗体溶液；e)向步骤d)获得的卵黄抗体溶液中加入10％(w/v)泊洛沙姆溶液，使混合溶液中泊洛沙姆浓度为0.5％(w/v)，用力搅拌充分混匀，获得蛋黄和泊洛沙姆水溶液B；在4℃-10℃下静置2-4小时，再次分离沉淀蛋黄中残余油脂；具体操作可为：用厨纸粘去最上一层油脂后按照步骤d)方法过滤溶液，即得粗提分离的卵黄抗体溶液。优选的，S3为取S2获得的上清液加入到超滤浓缩分离系统的储液罐内，使用截留分子量20000Da的超滤膜，在运行压力0.05-0.15M本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体可溶性粉，其特征在于，其以干糊精和麦芽糊精作为载体，以抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体作为活性成分。

【技术特征摘要】
1.一种抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体可溶性粉，其特征在于，其以干糊精和麦芽糊精作为载体，以抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体作为活性成分。2.根据权利要求1所述的四联卵黄抗体可溶性粉，其特征在于，其制备方法包括：(1)制备抗猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎的四联卵黄抗体溶液；(2)向步骤(1)所得的四联卵黄抗体溶液中添加黄腐酸、蔗糖、山梨酸钾和叠氮钠，获得四联卵黄抗体组合溶液；(3)将步骤(2)所得的四联卵黄抗体组合溶液喷在所述载体上。3.根据权利要求2所述的四联卵黄抗体可溶性粉，其特征在于，所述步骤(2)中，所述黄腐酸、蔗糖、山梨酸钾和叠氮钠的添加质量相对于所述四联卵黄抗体溶液的体积比分别为：3-5％、15-20％、0.01-0.03％和0.01-0.02％；优选为体积比分别为：5％、15％、0.02％和0.02％。4.根据权利要求2或3所述的四联卵黄抗体可溶性粉，其特征在于，所述步骤(3)中，所述四联卵黄抗体组合溶液与所述载体的质量比为1:4-1:5。5.根据权利要求1-4任一项所述的四联卵黄抗体可溶性粉，其特征在于，所述载体中，干糊精和麦芽糊精的质量比为2:1-1:2，优选为1:1。6.根据权利要求1-5任一项所述的四联卵黄抗体可溶性粉，其特征在于，所述步骤(1)包括如下步骤：S1、以猪瘟、猪伪狂犬、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎疫苗免疫产蛋高峰青年鸡，而后取该鸡群产的高免鸡蛋；S2、分离所述高免鸡蛋的蛋黄，用泊洛沙姆沉淀法去除油脂，收集含卵黄抗体的上清液；S3、取S2获得的上清液经过浓缩分离超滤系统进行超滤浓缩，即得。7.根据权利要求6所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：乌仁高娃，邱庆，
申请(专利权)人：北京普飞特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11