一种鱼饲料添加剂的制备方法技术

本发明专利技术提供一种鱼饲料添加剂的制备方法，属于水产饲料加工技术领域，该方法先将鱼溶浆进行灭菌、脱脂、酶解处理，然后采用益生菌发酵，取发酵菌液中的益生菌菌体细胞灭活制成悬菌液，再将悬菌液分散于含保护性多糖和纳豆芽孢杆菌菌粉的发酵浓缩液中，最后干燥转变成粉状添加剂；上述益生菌悬菌液是在含有2,6‑二叔丁基对甲酚和2‑羟基‑4‑甲硫基丁酸的生理盐水中采用慢热速冷技术得到的益生菌灭活细胞悬浮液。本发明专利技术中提供的饲料添加剂的制备方法，发酵转化率和灭活完成度高，所制添加剂稳定性和耐加工、贮藏性能佳，低毒、无异味，可食用性和安全性优良，有助于鱼类肠道微生物的增殖和饲料转化率的提高，同时有效提高了废弃资源的利用率和附加值。

【技术实现步骤摘要】
一种鱼饲料添加剂的制备方法
本专利技术属于水产饲料加工
，具体涉及一种鱼饲料添加剂的制备方法。
技术介绍
中国是世界水产养殖大国，水产养殖业为我国民众提供了30％以上的优质蛋白源，其中淡水鱼类养殖总产量占我国鱼类总产量的70％。因此，淡水鱼类是我国食物安全的重要组成部分，主要的动物蛋白质来源之一。随着养殖业规模和集约化程度的提高，动物的生产性能和畜禽产品的产量都显著提高，但是也随之而来了很多问题。由于养殖密度提高，动物的应激水平也增加，动物机体的免疫机能降低，对各种有害微生物的抵抗能力也越来越低。使得动物长期处于亚健康状态，很容易感染各种疾病。在实际生产中，通过在饲料中添加抗生素来预防疾病和提高经济效益，但是抗生素的持续使用会导致细菌耐药性和动物产品药物残留等诸多问题。随着人类健康意识的增强，开发寻找健康、无污染低残留的饲料添加剂和禁止抗生素在饲料中应用的呼声越来越高。目前，市场上已有一些益生菌类饲料添加剂产品，其中以益生菌以乳酸菌类为主，但由于乳酸菌属于兼性厌氧性细菌，其活性难以保持，货架期较短，且乳酸菌不耐高温，在饲料加工过程中死亡率极高，从而导致其无法发挥其应有的效果。研究发现将活性乳酸菌发酵过程中可产生大量的细菌素类物质与乳酸菌细胞同时使用，可黏附小肠肠壁黏膜细胞通过占位效应防止病原物的入侵，也可选择性杀死或抑制肠道病原菌，有效控制肠道病原微生物，从而起到防病抗病的作用。纳豆芽孢杆菌产生蛋白酶、α-淀粉酶和木聚糖酶等，具有丰富的饲用酶系。纳豆芽孢杆菌在生长繁殖后期极容易形成芽孢，在饲用制剂中多以芽孢形式存在。这些芽孢被动物采食进入肠道，能迅速复活并分泌高活性的饲用酶系，产生具有拮抗肠道致病菌的多肽类物质，起到抑菌和防病的效果。同时，纳豆芽孢杆菌是典型的好氧菌，在生长过程中消耗大量氧气，因此可消耗肠道内的氧气造成厌氧环境，有利于肠道内厌氧菌群的繁殖，维持肠道正常的生态平衡。这些芽孢具有耐高温、耐酸碱和耐挤压等特性，有利于推广应用。但无论是乳酸杆菌类还是纳豆芽孢杆菌，在单独使用时，效果不稳定。鱼溶浆是在鱼粉生产过程中产生的废弃物，每生产1吨鱼粉就会产生2～3吨的鱼溶浆，由于含有大量的小分子多肽、氨基酸，牛磺酸，以及矿物质等有益成分，保留了鱼粉特有的未知生长因子，对水产、畜禽养殖动物具有很好的诱食和促生长作用，是很好的优质动物蛋白源、诱食剂和营养补充剂，可增强动物消化吸收功能和肠道发育作用、增强动物免疫机能和抗应激能力。但鱼溶浆中含有较多的大分子蛋白质限制了鱼类的消化利用率，通过进一步加工处理，能使鱼溶浆中含有较多的寡肽、氨基酸、活性酶等，对鱼类有很好的诱食和促消化促生长作用，因此将其作为添加剂添加至饲料中有较强的可行性。现有技术如授权公告号为CN101904412B的中国专利技术专利，公开了一种鱼溶浆生产诱食剂的方法，其中选用鱼溶浆为原料，经过蒸煮、加酶制剂、混合、发酵、干燥、包装的步骤，制得能改善水产动物饲料适口性的诱食剂，但其所制诱食剂内部残留的脂肪易对鱼类造成酸中毒，而且对不同鱼溶浆不能有效酶解蛋白质，不宜于完全消化吸收。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种发酵转化率和灭活完成度高、产物稳定性和耐加工贮藏性能佳、低毒无异味、可食用性和安全性优良的鱼饲料添加剂的制备方法。本专利技术为实现上述目的所采取的技术方案为：本专利技术中唾液乳酸杆菌和干酪乳酸杆菌购自广州汇健生物科技有限公司，纳豆芽孢杆菌购自南京赛尔特生物技术有限公司。一种鱼饲料添加剂的制备方法，该方法通过将益生菌悬菌液分散于含保护性多糖和纳豆芽孢杆菌菌粉的发酵浓缩液中，再干燥转变成粉状添加剂；上述益生菌悬菌液是在含有2,6-二叔丁基对甲酚和2-羟基-4-甲硫基丁酸的生理盐水中采用慢热速冷技术得到的益生菌灭活细胞悬浮液。该方法制备所得鱼饲料添加剂中含有灭活的益生菌细胞，具有耐加工、耐贮藏的特点，从而保证了添加剂的稳定性，所制添加剂可以替代或减少抗生素的使用，能提高鱼类机体的免疫力和抗应激能力，并有效抑制或控制疾病发生率，促进鱼类生长，提高饲料转化效率。作为优选，益生菌悬菌液是通过以下步骤制得：将分离出的益生菌菌体细胞悬浮于3～4倍量的含有2,6-二叔丁基对甲酚和2-羟基-4-甲硫基丁酸的生理盐水中制成悬浮液，控制升温速率为1～2℃/min，缓慢加热升温使悬浮液在25～30min内升温至85～90℃，然后保温5～10min，保温结束后，快速降温使悬浮液在8～10min内降温至30～35℃即得，上述2,6-二叔丁基对甲酚和2-羟基-4-甲硫基丁酸在生理盐水中的含量分别为0.035～0.043mM和0.017～0.032mM，上述生理盐水中的2,6-二叔丁基对甲酚和2-羟基-4-甲硫基丁酸可以在慢热过程中，与细菌细胞内蛋白质形成联合，保持蛋白质的序列结构在高温中不易发生氧化和变性，同时在高温将DNA链打开以后，将DNA链进行链接导致DNA失活，且不会因降温而恢复活性，因此灭活后细胞的活性破坏更彻底，增加稳定性和耐加工性，形成的大分子链条不易渗出细胞，增加灭活的有效完成度。采用慢热速冷技术进行细胞灭活，可以保持灭活细胞的完整性，也可以防止菌体在加热高温灭活过程中细胞破裂，减少细胞内容物的渗出，增加在灭活后细胞的完整度。作为优选，发酵浓缩液是通过以下步骤制得：鱼溶浆经灭菌、脱脂、酶解、益生菌发酵后所得发酵菌液，离心并分离出益生菌菌体细胞和培养液后，浓缩培养液即得。鱼溶浆经发酵后，其中的大分子蛋白能充分水解，还含有多种益生菌代谢产物、细菌素类物质，能显著提高添加剂及饲料的适口性和诱食性，同时可以提高鱼类的免疫力和抗病力，也降低了鱼溶浆排放对环境的污染。作为优选，益生菌为乳酸杆菌，上述乳酸菌为唾液乳酸杆菌和/或干酪乳酸杆菌。乳酸杆菌及其发酵产物可以有效抑制或杀死肠道病原菌；灭活乳酸杆菌细胞粘附至小肠黏膜上皮细胞，对病原菌的入侵起到阻隔作用；将代谢产物和细胞素结合可以对病原菌的入侵形成立体屏障，起到保护动物肠道健康的效果。作为优选，纳豆芽孢杆菌菌粉的加入量为发酵浓缩液重量的5～6％，纳豆芽孢杆菌的代谢产生具有拮抗肠道致病菌的多肽类物质，且代谢过程中耗氧，可以在肠道中制造厌氧环境，有利于肠道中厌氧菌群的繁殖，维持肠道的生态平衡。进一步优选，灭菌采用高温高压除菌，压强为55～75MPa，温度为100～115℃，时间为30～40min。高温高压对微生物有致死作用，主要是通过破坏细胞膜抑制酶的活性和影响DNA等遗传物质的复制来实现的。进一步优选，脱脂采用脂肪酶酶解灭菌后的鱼溶浆液，脂肪酶的加入量为3.0～3.5wt％，温度为35～40℃，反应时间为1～1.5h。进行脂肪酶解和脂肪酸氧化，能有效防止脂肪酸的代谢产物使鱼类发生酸中毒。进一步优选，酶解为在碱性环境下向脱脂鱼溶浆中加入3.5～4.5wt％的胰蛋白酶和3.5～4.5wt％弹性蛋白酶，酶解1～1.5h，灭酶后调节为酸性环境，加入3.0～4.0wt％的胃蛋白酶酶解1.5～2.5h，真空度为0.015～0.02MPa。在真空环境下水解可以降低水解后的氨基酸氧化的占比，蛋白质酶解后的产物为寡肽、小分子肽、脂肪酸等，有利于鱼类的消化吸收。进一步优选，益生菌发酵为将酶解的酶解液加热浓缩，待水分为60～65％后停止本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鱼饲料添加剂的制备方法，其特征在于：通过将益生菌悬菌液分散于含保护性多糖和纳豆芽孢杆菌菌粉的发酵浓缩液中，再干燥转变成粉状添加剂；所述益生菌悬菌液是在含有2,6‑二叔丁基对甲酚和2‑羟基‑4‑甲硫基丁酸的生理盐水中采用慢热速冷技术得到的益生菌灭活细胞悬浮液。

【技术特征摘要】
1.一种鱼饲料添加剂的制备方法，其特征在于：通过将益生菌悬菌液分散于含保护性多糖和纳豆芽孢杆菌菌粉的发酵浓缩液中，再干燥转变成粉状添加剂；所述益生菌悬菌液是在含有2,6-二叔丁基对甲酚和2-羟基-4-甲硫基丁酸的生理盐水中采用慢热速冷技术得到的益生菌灭活细胞悬浮液。2.根据权利要求1所述的一种鱼饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述益生菌悬菌液是通过以下步骤制得：将分离出的益生菌菌体细胞悬浮于3~4倍量的生理盐水中制成悬浮液，控制升温速率为1~2℃/min，缓慢加热升温使悬浮液在25~30min内升温至85~90℃，然后保温5~10min，保温结束后，快速降温使悬浮液在8~10min内降温至30~35℃即得。3.根据权利要求1所述的一种鱼饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述发酵浓缩液是通过以下步骤制得：鱼溶浆经灭菌、脱脂、酶解、益生菌发酵后所得发酵菌液，离心并分离出益生菌菌体细胞和培养液后，浓缩培养液即得。4.根据权利要求1或2或3所述的一种鱼饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述益生菌为乳酸杆菌；所述乳酸菌为唾液乳酸杆菌和/或干酪乳酸杆菌。5.根据权利要求3所述的一种鱼饲料添加剂的...

【专利技术属性】
技术研发人员：何秋宏，
申请(专利权)人：何秋宏，
类型：发明
国别省市：贵州,52