一种在293FT细胞内表达成熟家蚕素Ⅱ的方法技术

本发明专利技术公开一种在293FT细胞内表达成熟家蚕素Ⅱ的方法。通过改造家蚕素Ⅱ基因表达B链蛋白与C链蛋白的相关基因的核苷酸序列，致使蛋白的氨基酸序列发生改变，使家蚕素基因在293FT细胞表达家蚕素原后，切掉C链，形成A与B链结合的成熟的家蚕素。从而在真核非内分泌细胞实现成熟家蚕素Ⅱ的表达，提供一种研究家蚕素的生物学功能所需研究材料来源的技术方法。

A Method for Expressing Mature Bombyx Mori Factor II in 293FT Cells

The invention discloses a method for expressing mature silkworm hormone II in 293FT cells. By modifying the nucleotide sequence of B-chain protein and C-chain protein related genes expressed in silkworm element II gene, the amino acid sequence of the protein was changed. After the silkworm element gene expressed in 293FT cells, the C-chain was cut off to form mature silkworm element bound to A-chain and B-chain. Thus, the expression of mature silkworm hormone II in eukaryotic non-endocrine cells can be realized, and a technical method for studying the source of materials needed for the biological function of silkworm hormone can be provided.

【技术实现步骤摘要】
一种在293FT细胞内表达成熟家蚕素Ⅱ的方法
本专利技术属于基因工程
,具体涉及一种在293FT真核细胞内表达出成熟家蚕素Ⅱ蛋白的方法。
技术介绍
二十世纪早期，日本学者从家蚕的大脑中提取和鉴定了一个分子量大小约为5KD的多肽，该多肽能像家蚕促前胸腺激素（prothoracicotropichormone，PTTH）那样活化蓖麻蚕的前胸腺。随后证实5KD的肽作为家蚕生理剂量无生物活性，而是一个30KD的肽在家蚕本身具有生物活性。因此，生物学家们对5KD肽的基因结构与生物学功能进行了大量的研究，发现含有两条氨基酸链，A链与B链,其中A链由20个氨基酸组成,B链由26或28个氨基酸组成。家蚕素的A链与B链之间有两个二硫键相连,链自身由一个二硫键相连。家蚕素与人类胰岛素具有高度同源性,其A链与B链对应人胰岛素的A链与B链的相似度分别达50%和30%,第一次在分子水平证明无脊椎动物存在胰岛素或胰岛素相关肽，该蚕蛾胰岛素相关肽就是家蚕素（Bombyxin，Bbx）。在研究家蚕素过程中，如何获得家蚕素蛋白是研究家蚕素生物学功能的关键步骤。当前获得家蚕素蛋白的方法包括：(1)通过生物化学方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种在293FT细胞内表达成熟家蚕素Ⅱ的方法。

【技术特征摘要】
1.一种在293FT细胞内表达成熟家蚕素Ⅱ的方法。2.权利要求1所述的通过改造家蚕素Ⅱ蛋白氨基酸序列所完成，具体改造的蛋白序列特征为将B链27位的結氨酸（v）突变成精氨酸（R）；C肽第1位的赖氨酸（K）变成精氨酸（R），将C肽的19位丝氨酸（S）突变成精氨酸（R），2...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜珍武，李红霞，张桂珍，
申请(专利权)人：张桂珍，
类型：发明
国别省市：吉林,22