The invention relates to the field of molecular biology, in particular to a drug-induced gene transcription activation method. By transfection (ER)
【技术实现步骤摘要】
一种药物诱导的基因转录激活方法
本专利技术涉及分子生物学领域，具体地说，涉及一种药物诱导的基因转录激活方法。
技术介绍
从靶向基因组编辑到转录调控，TALE蛋白以被广泛应用于不同领域。Tal蛋白包括一系列的重复区域，每个重复区域包含33-34个氨基酸。中间重复可变的双氨基酸序列区域(repeatvariablediresidues，RVDs)决定了最先结合的碱基。简单的一对一的“Tal密码”连接在一起决定了Tal阵列与DNA结合的特异性，因此当TAL与基因或表观调控相关的效应因子融合时，可以靶向到特定基因位点发挥作用。例如，当TALE与转录激活结构域(activatordomain，AD)如VP64融合时，靶向启动子序列的Tal阵列可以介导特异性地基因转录激活。许多生物过程是受到高度动态的分子反应来调控的。因此，为了更精确的理解这些过程，条件的和可诱导的调控系统显得尤为必要。现阶段一种广泛应用的药物诱导技术是通过配体结合激发雌激素受体蛋白(EstrogenReceptor，ER)从细胞质到细胞核的转运过程(Metzger，D.，Clifford，J.，Chiba，...
【技术保护点】
1.一种药物诱导的基因转录激活方法，其特征在于，通过转染(ERT2)n‑TALE‑ADs系统或共转染HIT TALE‑SunTag体系至细胞质内，在特定需要的时间利用4‑OHT和/或TAM和/或他们的衍生物进行药物诱导，实现特定基因的转录激活；所述(ERT2)n‑TALE‑ADs系统为可表达(ERT2)n‑TALE‑ADs融合蛋白的载体；其中，n＝2‑5，ADs为转录效应因子组合；所述HIT TALE‑SunTag体系为可分别表达融合蛋白(1)与融合蛋白(2)中的一种或多种的载体组合：(1)NLS‑TALE‑GCN4或ERT2‑TALE‑GCN4或(ERT2)n‑TALE‑...
【技术特征摘要】
1.一种药物诱导的基因转录激活方法，其特征在于，通过转染(ERT2)n-TALE-ADs系统或共转染HITTALE-SunTag体系至细胞质内，在特定需要的时间利用4-OHT和/或TAM和/或他们的衍生物进行药物诱导，实现特定基因的转录激活；所述(ERT2)n-TALE-ADs系统为可表达(ERT2)n-TALE-ADs融合蛋白的载体；其中，n＝2-5，ADs为转录效应因子组合；所述HITTALE-SunTag体系为可分别表达融合蛋白(1)与融合蛋白(2)中的一种或多种的载体组合：(1)NLS-TALE-GCN4或ERT2-TALE-GCN4或(ERT2)n-TALE-GCN4，(2)ScFv-ERT2-ADs或ScFv-(ERT2)n-ADs，其中，n＝2-5，ADs为转录效应因子组合；上述融合蛋白由左至右为N端至C端，各元件之间可以通过3～20个氨基酸的linker相连；其中，(ERT2)n为n个串联的ERT2，GCN4为5-30个拷贝的来自酵母转录激活因子GCN4的一段抗原表位短肽，ScFv为抗GCN4肽的...
【专利技术属性】
技术研发人员：王宇，赵晨，张月，
申请(专利权)人：中国科学院动物研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11
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