马疱疹病毒1型gB-gD融合蛋白、重组载体和真核细胞株及其制备方法和疫苗技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体而言，提供了一种马疱疹病毒1型gB‑gD融合蛋白、重组载体和真核细胞株及其制备方法和疫苗。本发明专利技术提供一种马疱疹病毒1型gB‑gD融合蛋白重组载体，包括真核表达载体片段和马疱疹病毒1型gB‑gD基因片段。该重组载体可以实现马疱疹病毒1型糖蛋白gB和gD同时在外源系统中的随时表达。本发明专利技术提供的构建方法，包括将含有上述重组载体的CHO细胞进行筛选，得到稳定表达马疱疹病毒1型gB‑gD融合蛋白的CHO细胞株。该构建方法简便，易操作，可以成功筛选出稳定、高表达马疱疹病毒1型gB‑gD融合蛋白的真核细胞株，为后续的各项研究包括制备疫苗等应用提供了可行的技术方案。

Equine Herpes Virus Type 1 gB-gD Fusion Protein, Recombinant Vector and Eukaryotic Cell Line, Preparation Method and Vaccine

The invention relates to the field of biotechnology, in particular to providing a equine herpesvirus type 1 gB gD fusion protein, a recombinant vector, an eukaryotic cell line, a preparation method and a vaccine. The present invention provides a recombinant vector of equine herpesvirus type 1 gB gD fusion protein, including eukaryotic expression vector fragment and equine herpesvirus type 1 gB gD gene fragment. The recombinant vector can express equine herpesvirus type 1 glycoprotein gB and gD at any time in the exogenous system. The construction method provided by the invention includes screening CHO cells containing the recombinant vector and obtaining CHO cell lines stably expressing equine herpesvirus type 1 gB gD fusion protein. The method is simple and easy to operate. Eukaryotic cell lines with stable and high expression of equine herpesvirus type 1 gB gD fusion protein can be successfully screened. It provides a feasible technical scheme for subsequent research, including preparation of vaccines and other applications.

【技术实现步骤摘要】
马疱疹病毒1型gB-gD融合蛋白、重组载体和真核细胞株及其制备方法和疫苗
本专利技术涉及生物
，具体而言，涉及一种马疱疹病毒1型gB-gD融合蛋白、重组载体和真核细胞株及其制备方法和疫苗。
技术介绍
马鼻肺炎是由2个亲缘关系密切的马疱疹病毒引起的马属动物传染病，即马疱疹病毒1型(EHV-1)和马疱疹病毒4型(EHV-4)。马疱疹病毒属于水痘病毒属，具有很强的传染性。糖蛋白包括gB，gC，gD，gE，gG，gI，gK，gM，gH和gL。其中，gB和gD已被证实可以诱发被感染的宿主产生中和抗体。EHV-l比EHV-4具有更广泛的宿主。EHV-l能够通过gD结合各种细胞受体，从而进入宿主细胞，产生的宿主范围非常广泛。另一方面，EHV-4的gD只可以结合固定受体，因此，限制了病毒的宿主范围。马鼻肺炎感染马属动物，给马产业经济带来不可估量的经济损失，目前，已成为马病中重要的防控疾病之一，严重制约了养马业的发展。该病易引起呼吸道疾病，病毒会在呼吸道上皮滋生，还可继发感染，引起孕马的流产和马驹的死亡并给种马、赛马或娱乐马带来精神障碍的后遗症。但是，目前还没有可以预防马鼻肺炎的亚单位疫苗。有鉴本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种马疱疹病毒1型gB‑gD融合蛋白重组载体，其特征在于，包括真核表达载体片段和马疱疹病毒1型gB‑gD基因片段。

【技术特征摘要】
1.一种马疱疹病毒1型gB-gD融合蛋白重组载体，其特征在于，包括真核表达载体片段和马疱疹病毒1型gB-gD基因片段。2.根据权利要求1所述的马疱疹病毒1型gB-gD融合蛋白重组载体，其特征在于，所述真核表达载体片段包括pcDNA3.1片段、pEE6.4片段或pEE12.4片段，优选为pcDNA3.1片段；优选地，所述马疱疹病毒1型gB-gD基因片段为gB基因序列和gD基因序列连接的重组片段；优选地，所述马疱疹病毒1型gB-gD基因片段的序列如SEQIDNO.1所示。3.根据权利要求1所述的马疱疹病毒1型gB-gD融合蛋白重组载体，其特征在于，所述真核表达载体片段的5’端和所述马疱疹病毒1型gB-gD基因片段的3’端具有相同的双酶切位点，所述真核表达载体片段的3’端和所述马疱疹病毒1型gB-gD基因片段的5’端具有相同的双酶切位点；优选地，所述真核表达载体片段的3’端具有HindⅢ酶切位点，5’端具有XbaⅠ酶切位点；优选地，所述马疱疹病毒1型gB-gD基因片段的5’端具有HindⅢ酶切位点，3’端具有XbaⅠ酶切位点。4.权利要求1-3任一项所述的马疱疹病毒1型gB-gD融合蛋白重组载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将马疱疹病毒1型gB-gD基因片段，插入到真核表达载体片段中，重组构建得到马疱疹病毒1型gB-gD融合蛋白重组载体。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将马疱疹病毒1型gB-gD...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺笋，任立松，李延涛，陈泽良，任郭子君，
申请(专利权)人：天康生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：新疆,65