核酸提取仪制造技术

技术编号:20102310 阅读:30 留言:0更新日期:2019-01-16 06:29
本实用新型专利技术公开了一种核酸提取仪,具有操作空间,操作空间内具有磁棒‑磁棒套模块和驱动传动机构,驱动传动机构使磁棒‑磁棒套模块往复或移动,操作空间内有裂解区域和前处理区域,裂解区域和前处理区域相互独立,磁棒‑磁棒套模块在裂解区域和前处理区域往复。本实用新型专利技术提供了一种核酸提取步骤简化、提取耗时短、提高核酸提取成功率且核酸提取量损失少的核酸提取仪。

Nucleic acid extractor

The utility model discloses a nucleic acid extractor, which has an operation space, in which there are magnetic rod 1086 Regional reciprocation. The utility model provides a nucleic acid extractor with simplified steps, short extraction time, improved success rate of nucleic acid extraction and less loss of nucleic acid extraction amount.

【技术实现步骤摘要】
核酸提取仪
本技术涉及核酸提取领域,更具体的说,它涉及一种核酸提取仪以及提取方法。
技术介绍
核酸,例如DNA或者RNA,的提取目前主要采用离心柱法和磁珠法两种提取方法。传统的离心柱技术也应用膜进行核酸纯化,它的膜的原理属于硅吸附方法,这种膜只对核酸有较强的亲和力和吸附力。操作时首先应用蛋白酶在56℃温度条件下对样本进行裂解,然后将裂解液加入柱子中离心,核酸被吸附于膜上,而其他杂质被甩出,最后用洗脱液将核酸洗脱下来。此方法提取效果好,但是裂解时需要加热,核酸纯化时需要多次离心,整个提取过程耗时2个小时左右,其成本高、操作复杂、耗时长、依赖实验室环境,并难以提取易降解的RNA。磁珠法核酸提取是以纳米生物磁珠为载体的一种新型核酸提取技术,核酸分子可与磁珠表面的硅羟基发生特异性识别与结合,在外部磁场的作用下发生聚集或分散,从而进行核酸分离纯化。目前,对于DNA的提取,磁珠法核酸提取一般包括裂解、结合、洗涤、洗脱四个主要步骤,每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。如果对于RNA的提取,相比DNA的提取,更为复杂,目前任然采用过柱的方法进行提取和纯化,同时需要加入防治RNA降解的诸多酶,传统的RNA的提取方法耗时长,所用的材料多,总体成本高。磁珠法核酸提取仪器可分为:移液式和磁棒式。移液式核酸提取是通过转移反应溶液来实现核酸的提取纯化,其步骤包括:向样本加入裂解液,吹打混匀,反复磁珠吸附、移走裂解液、加入洗涤液洗涤磁珠、对磁珠吸附、移走洗涤液、加入洗脱缓冲液等操作,从而得到纯化的核酸。然而移液式仪器有一个致命的缺陷,为了尽可能彻底地除废液,移液吸头需要伸入到深孔板底部,如果吸头靠磁珠太近,会使得磁珠和废液一起吸掉,从而导致每次这样吸取废液时会有小部分残液留在管底部,从而影响后续的洗脱效率和核酸的扩增,例如PCR扩增反应的成功率。磁棒式核酸提取仪器采用磁棒法的磁性分离方式,通过特制的磁棒套进行转移磁珠同时转移样本,磁珠定向团聚在磁棒表面的专门的磁棒套上,通过精确的运动来实现磁珠从样本裂解液到洗涤液在到洗脱液,从而完成核酸测自动化提取过程。具体操过程如下:步骤1、加样本:撕开封膜,加入液体样本到裂解液孔中;步骤2、裂解/结合:裂解液裂解样本(反应一段时间,期间底部会加热加速裂解),期间磁棒套(只有磁棒套、无磁棒)插入到液面下进行上下振荡混匀,使核酸悬浮在裂解液中;裂解完成后,带磁棒的磁棒套伸入磁珠孔将磁珠吸起,转移到裂解液孔中,磁棒取出,磁棒套上下振荡混匀使得磁珠均匀分散到裂解液中吸附核酸,静置一段时间后,磁棒插入然后静置或上下振荡至磁珠都吸附在磁棒套上;步骤3、盐洗:将从裂解液中吸附磁珠转移到盐洗的孔中,磁棒取出,磁棒套上下振荡混匀使得磁珠均匀分散到盐洗液中,静置一段时间后,磁棒插入然后静置或上下振荡至磁珠都吸附在磁棒套上;步骤4、洗涤:将盐洗后的磁珠取出,转移到洗涤液中,磁棒套上下振荡混匀使得磁珠均匀分散到洗涤液中,静置一段时间后,磁棒插入然后静置或上下振荡至磁珠都吸附在磁棒套上;步骤5、洗脱:将洗涤后的磁珠取出,磁棒取出,磁棒套上下振荡混匀使得磁珠均匀分散到洗脱液中,一般加热至65℃/5min静置、加热使核酸与磁珠脱离,在较高的温度下、磁棒插入然后静置或上下振荡至磁珠都吸附在磁棒套上,回收磁珠,如此,核酸提取仪的工作完成。之后,将反应板从一起中取出,手工用移液器将含有核酸的洗脱液转移。传统的磁棒法提取存在的问题是:1、纯化后的核酸洗脱液需要手工转移,转移过程容易出现手动操作失误,造成人为因素的污染,产生假阳性。2、经过盐洗、洗涤、洗脱,洗涤洗脱的步骤多,耗时长,而且出错率会大大提高,特别是需要在较短的时间内处理大量的样本的时候,交叉污染严重,花费的人力多,而且出错率会显著提高。3、磁珠的多次转移,导致核酸含量不可避免的受损,这是因为把磁珠暴露,吸附在磁珠上的核酸暴露在外,容易受到环境存在的杂质,例如灰尘、酶、或者其他物质污染,特别是对于RNA来讲,更容易受到降解。4、核酸经历多次洗涤洗脱和加热,可能导致核酸的完整性显著降低,使核酸的碎片化加剧,不利于后续处理,例如后续的测序、扩增或者其它利用。
技术实现思路
本技术的目的在于提供一种核酸提取步骤简化、提取耗时短、提高核酸提取成功率且核酸提取量损失少的核酸提取仪。本技术解决其技术问题所采用的技术方案是:一方面,本技术提供一种核酸提取仪,具有操作空间,操作空间内具有磁棒-磁棒套模块和驱动传动机构,驱动传动机构使磁棒-磁棒套模块往复或移动,操作空间内有裂解区域和前处理区域,裂解区域和前处理区域相互独立,磁棒-磁棒套模块在裂解区域和前处理区域往复。裂解区域与前处理区域相互独立是指裂解区域跟前处理区域分别独立分区,两个区域之间不交错。如此,裂解区域的温度变化不会影响到前处理区域,避免前处理液出现不必要的蒸发或挥发,保持前处理液的液量准确。在一些优选的方案中,裂解区域由多个裂解工位组成,每个裂解工位具有能容纳腔;前处理区域由多个前处理工位组成,前处理工位承接磁棒和磁棒套从裂解工位转移的磁珠,每个裂解工位必有一个前处理工位与之对应。裂解工位与前处理工位不出现交叉。如此,裂解区域的温度变化不会影响到前处理区域,避免前处理液出现不必要的蒸发或挥发,保持前处理液的液量准确。在一些优选的方案中,裂解区域设加热负载,加热负载包括传热板和容纳腔,所有容纳腔设于传热板。每个容器除开口以外的其余部分均被加热负载包裹,保持整个薄壁管的温度一致性。核酸提取时,先对裂解液升温,裂解后核酸释放,核酸释放后要在低温(或常温)时、核酸才跟磁珠结合,冷却时,加热负载内的薄壁管中各处温度一致,避免蒸汽冷凝在孔位的内壁,防止污染。优选的,多个容纳腔形成一个加热单元;加热负载具有1个或多个加热单元,相邻的加热单元之间独立。相邻的加热单元之间独立指的是相邻的加热单元之间不共用侧壁,尽量减少相邻的加热单元之间交叉传热,提高温度精确性,提高所有孔位中裂解液的温度一致性。优选的,每个容纳腔由一个套筒围成,每个加热单元的套筒之间独立。每个孔位为独立的薄壁管指的是:相邻的孔位不共用侧壁。因此,相邻的孔位之间尽量减少交叉传热,提高每个孔位的温度精确性,使所有孔位的裂解液的温度一致性好。在一些优选的方案中,加热制冷件覆盖裂解区域。优选的,加热制冷件向加热负载传热,加热制冷件完全覆盖加热负载。加热制冷件直接对加热负载的每一个容纳腔加热,提高温度的一致性。优选的,加热制冷件(如帕尔贴)在升温完成后、进行制冷冷却。热裂解的冷却过程才有加热制冷件制冷冷却,使裂解液快速冷却到室温,缩短裂解耗时,进而将整个核酸提取流程控制在半小时内完成。加热制冷片之间无缝拼接。加热制冷件由多片加热制冷片,无缝拼接指的是相邻的两片加热制冷片之间没有明显的空隙或距离。优选的,加热制冷片对应有散热风扇。优选的,加热制冷件由独立的温控器控温,加热负载设有温度控制器,温度控制器与温控器连接。温控板与面向客户的控制端通讯,温控板接收温度传感器传来的实时温度。独立的温控板能够实现对加热制冷件的精确控温。温控板既要控制加热,也要控制制冷。在一些优选的方案中,操作空间具有排风扇,排风扇对准裂解区域;排风扇位于裂解区域的上方或侧上方。在裂解本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.核酸提取仪,具有操作空间,操作空间内具有磁棒‑磁棒套模块和驱动传动机构,驱动传动机构使磁棒‑磁棒套模块往复或移动,其特征在于:操作空间内有裂解区域和前处理区域,裂解区域和前处理区域相互独立,磁棒‑磁棒套模块在裂解区域和前处理区域往复。

【技术特征摘要】
1.核酸提取仪,具有操作空间,操作空间内具有磁棒-磁棒套模块和驱动传动机构,驱动传动机构使磁棒-磁棒套模块往复或移动,其特征在于:操作空间内有裂解区域和前处理区域,裂解区域和前处理区域相互独立,磁棒-磁棒套模块在裂解区域和前处理区域往复。2.如权利要求1所述的核酸提取仪,其特征在于:裂解区域由多个裂解工位组成,每个裂解工位具有能包裹容器的容纳腔;前处理区域由多个前处理工位组成,前处理工位承接磁棒和磁棒套从裂解工位转移的磁珠,每个裂解工位必有一个前处理工位与之对应。3.如权利要求2所述的核酸提取仪,其特征在于:裂解区域设加热负载,加热负载包括传热板和套筒,套筒与传热板相连,套筒的内腔作为容纳腔。4.如权利要求3所述的核酸提取仪,其特征在于:多个套筒排列形成一个加热单元,加热负载具有一个或多个加热单元,加热单元之间有间距;每个加热单元的套筒相互独立。5.如权利要求1所述的核酸提取仪,其特征在于:操作空间具有排风扇,排风扇对准裂解区域;排风扇位于裂解区域的上方或侧上方;或者,排风扇工作时,磁棒-磁棒套模块暂停于裂解区域外。6.如权利要求1所述的核酸提取仪,其特征在于:每个前处理工位在磁场区域内,磁体设于前处理工位的底部、或者侧面、或者磁体围绕插孔。7.如权利要求1所述的核酸提取仪,其特征在于:操作空间中有封盖模块,封盖模块每次密封管架单元中的所有容器孔位;封盖模块与移动机构连接,移动机构使封盖模块和管盖移动到对准管架单元;封盖模块包括压盖驱动组件和装夹管盖的夹具,压盖驱动...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨尚鑫胡彬刘杰蔡媛媛陶施芳
申请(专利权)人:绍兴迅敏康生物科技有限公司
类型:新型
国别省市:浙江,33

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