柚皮苷对映异构体的分离方法技术

本发明专利技术提供一种柚皮苷对映异构体的分离方法，该分离方法包括：制备供试品溶液；以多糖衍生物类手性色谱柱为固定相，以超临界流体为流动相A、有机溶剂为流动相B，采用超临界色谱法对所述供试品溶液中的柚皮苷对映异构体进行分离。本发明专利技术首次将超临界色谱技术应用到柚皮苷对映异构体的分离中来，特别是通过采用合适的超临界色谱条件构建柚皮苷对映异构体分离平台，该分离平台具有普适性，用其进行柚皮苷对映异构体分离时，供试品溶液不限于柚皮苷纯品制备的溶液，还能够适用于从植物或中药提取物中很好的分离柚皮苷对映异构体，能够有效避免植物或中药原料提取物中所含的其他众多化合物群的干扰。

Separation of enantiomers of naringin

The invention provides a method for separating enantiomers of naringin, which includes preparing sample solution, using polysaccharide derivative chiral column as stationary phase, supercritical fluid as mobile phase A and organic solvent as mobile phase B, and using supercritical chromatography to separate enantiomers of naringin in the sample solution. The invention applies supercritical chromatography technology to the separation of enantiomers of naringin for the first time. Especially, a platform for the separation of enantiomers of naringin is constructed by using suitable supercritical chromatography conditions. The platform has universality. When the platform is used for the separation of enantiomers of naringin, the sample solution is not limited to the solution prepared by the pure naringin product, but also suitable for the plant. The enantiomers of naringin can be well separated from the extracts of herbs or Chinese medicines, which can effectively avoid the interference of many other compounds contained in the extracts of plants or Chinese medicinal materials.

【技术实现步骤摘要】
柚皮苷对映异构体的分离方法
本专利技术涉及化工与制药领域，特别是涉及柚皮苷对映异构体的分离方法。
技术介绍
柚皮苷(Naringin)广泛存在于芸香科柑橘属植物中，具有抗炎、抗病毒、抗氧化、抗癌、神经保护、降血脂、改善糖尿病等多种生理活性，有较高的药用价值。其结构中C-2位是一个手性碳原子，存在一对对映异构体。研究表明，手性药物分子进入生物体时，不同构型的药物分子产生的生物活性如药效和药物动力学可能存在很大的差异，因此进行手性药物的拆分，对药物的质量控制、药效评价，以及新药开发都具有重要的意义。但是，手性药物结构相似，分离困难，因此手性拆分仍是药物分析工作的一个难点。目前虽有文献报道采用高效液相色谱法或环糊精修饰手性毛细管胶束电动色谱法检测柚皮苷对映异构体，但这些方法仅限于检测分析，不适于放量制备。超临界流体色谱(Supercriticalfluidchromatography，SFC)，是以超临界流体CO2作流动相，依靠流动相的溶剂化能力来进行分离、分析的技术，具有分离快、灵敏度高、经济和绿色环保等特点。它能方便将分析方法放大到半制备、制备的纯化方法，从而能够低成本、高效率的获得高纯度的单一对映体化合物。虽然传统的超临界流体色谱检测对对映体化合物的分离提供了有效的途径，但是大多用于化合物纯品中所含对映体化合物的分离，难以推广到含对映体化合物的植物或中药原料中去，植物或中药原料中对映体化合物的分离依然面临困难。
技术实现思路
基于此，本专利技术的主要目的是提供一种柚皮苷对映异构体的分离方法，该分离方法不仅能够从柚皮苷纯品中分离对映异构体，特别是还能够从植物或中药原料中很好的分离柚皮苷对映异构体，避免植物或中药原料中所含的其他众多化合物群的干扰。本专利技术所述的分离方法包括制备方法、分析方法。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：一种柚皮苷对映异构体的分离方法，该分离方法包括：制备供试品溶液；以多糖衍生物类手性色谱柱为固定相，以超临界流体为流动相A、有机溶剂为流动相B，采用超临界色谱法对所述供试品溶液中的柚皮苷对映异构体进行分离。在其中一些实施例中，所述的多糖衍生物类手性色谱柱的柱温为30～50℃，背压为1500～3000psi，检测波长283nm，采用的洗脱方式包括：流动相A的初始比例为100％～80％，于0～30min内变化至40％。在其中一些实施例中，所述的多糖衍生物类手性色谱柱的柱温为33～45℃，背压为1800～2500psi，检测波长283nm，采用的洗脱方式为：流动相A的初始比例为90％，于0～20min内变化至40％。在其中一些实施例中，所述的多糖衍生物类手性色谱柱的柱温为35℃，背压为2100psi，检测波长283nm，采用的洗脱方式为：0～15min，A由90％变化至50％，15～20min，A由50％变化至40％。在其中一些实施例中，所述的多糖衍生物类手性色谱柱的填料包括直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)、纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)、纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)、直链淀粉-3-氯苯基氨基甲酸酯、直链淀粉-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)。所述的超临界流体为超临界CO2，所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、异丙醇中的至少一种，或者所述的有机溶剂为甲醇与酸的混合液、乙醇与酸的混合液、乙腈与酸的混合液、异丙醇与酸的混合液。在其中一些实施例中，所述的多糖衍生物类手性色谱柱的填料为纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)；所述的超临界流体为超临界CO2，所述的有机溶剂为甲醇或0.2％甲酸-甲醇溶液。选用该填料时峰形、分离度都较好。在其中一些实施例中，所述的超临界色谱法采用分析型超临界色谱仪，则：多糖衍生物类手性色谱柱的填料为纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)；流动相A为超临界CO2、流动相B为甲醇；多糖衍生物类手性色谱柱的柱温为35℃；背压2100psi；检测波长283nm；流速为1～5ml/min；采用的洗脱方式为：0～2min，A由90％变化至80％，2～15min，A由80％变化至50％，15～20min，A由50％变化至40％。在其中一些实施例中，所述的超临界色谱法采用制备型超临界色谱仪，则：多糖衍生物类手性色谱柱的填料为纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)；流动相A为超临界CO2、流动相B为甲醇；多糖衍生物类手性色谱柱的柱温为35℃；背压2100psi；检测波长283nm；流速为5～300ml/min；采用的洗脱方式为：0～2min，A由90％变化至80％，2～15min，A由80％变化至50％，15～20min，A由50％变化至40％。在其中一些实施例中，所述的供试品溶液为由柚皮苷纯品制备成的溶液。在其中一些实施例中，所述的供试品溶液为由含柚皮苷的植物或中药提取物制备成的溶液。与现有技术相比，本专利技术具备如下有益效果：本专利技术首次将超临界色谱技术应用到柚皮苷对映异构体的分离中来，特别是通过采用合适的超临界色谱条件构建柚皮苷对映异构体分离方法，该分离方法具有普适性，用其进行柚皮苷对映异构体分离时，供试品溶液不限于柚皮苷纯品制备的溶液，还能够适用于从植物或中药提取物(例如柑、橘、橙、柚、柠檬、化橘红、橘红、橘核、橘络、橘叶、青皮、陈皮、枳实、枳壳、酸枣仁、香橼、佛手、骨碎补等提取出来的含有柚皮苷的提取物)中很好的分离柚皮苷对映异构体，能够有效避免植物或中药提取物中所含的其他众多化合物群的干扰。此外，本专利技术方法不仅适用于含柚皮苷供试品的检测分析，还可实现快速、大量制备柚皮苷对映异构体单体，所获得的单体纯度较高，且该方法有机溶剂消耗量少，易于回收、更加环保。附图说明图1为实施例1所得SFC谱图；图2为实施例2所得SFC谱图；图3为实施例3所得SFC谱图；图4为实施例4所得SFC图谱。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面将对本专利技术进行更全面的描述。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。实施例1本实施例提供一种柚皮苷对映异构体的分离方法，该分离方法包括：(1)制备供试品溶液：取柚皮苷加甲醇溶解，滤过，取续滤液，即得。(2)以多糖衍生物类手性色谱柱为固定相，以超临界流体为流动相A、有机溶剂为流动相B，采用超临界色谱法对所述供试品溶液中的柚皮苷对映异构体进行分离。该步骤选用的分析型超临界色谱仪为WatersACQUITYUPC2系统，多糖衍生物类手性色谱柱的填料为纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)，色谱柱规格为4.6mm×150mm×3μm，流动相A为超临界CO2、流动相B为乙醇，多糖衍生物类手性色谱柱的柱温40℃；背压2000psi；检测波长283nm；流速为2ml/min；采用的洗脱方式为：0～20min内，A由90％变化为40％；进样体积为5μl。结果请参见图1。根据图1可知本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种柚皮苷对映异构体的分离方法，其特征在于，该分离方法包括：制备供试品溶液；以多糖衍生物类手性色谱柱为固定相，以超临界流体为流动相A、有机溶剂为流动相B，采用超临界色谱法对所述供试品溶液中的柚皮苷对映异构体进行分离。

【技术特征摘要】
1.一种柚皮苷对映异构体的分离方法，其特征在于，该分离方法包括：制备供试品溶液；以多糖衍生物类手性色谱柱为固定相，以超临界流体为流动相A、有机溶剂为流动相B，采用超临界色谱法对所述供试品溶液中的柚皮苷对映异构体进行分离。2.根据权利要求1所述的柚皮苷对映异构体的分离方法，其特征在于，所述的多糖衍生物类手性色谱柱的柱温为30～50℃，背压为1500～3000psi，检测波长283nm，采用的洗脱方式为：流动相A的初始比例为100～80％，于0～30min内变化至40％。3.根据权利要求2所述的柚皮苷对映异构体的分离方法，其特征在于，所述的多糖衍生物类手性色谱柱的柱温为33～45℃，背压为1800～2500psi，检测波长283nm，采用的洗脱方式为：流动相A的初始比例为90％，于0～20min内变化至40％。4.根据权利要求3所述的柚皮苷对映异构体的分离方法，其特征在于，所述的多糖衍生物类手性色谱柱的柱温为35℃，背压为2100psi，检测波长283nm，采用的洗脱方式为：0～15min，A由90％变化至50％，15～20min，A由50％变化至40％。5.根据权利要求1至4任一项所述的柚皮苷对映异构体的分离方法，其特征在于，所述的多糖衍生物类手性色谱柱的填料包括直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)、纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)、纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)、直链淀粉-3-氯苯基氨基甲酸酯、直链淀粉-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)；所述的超临界流体为超临界CO2，所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、异丙醇中的至少一种，或者所述的有机溶剂为甲醇与酸的混合液、乙醇与酸的混合液、乙腈与酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：王艳慧，黄洁文，江晓，吴舒楹，杨丽莹，曾仑，王永辉，
申请(专利权)人：广州市香雪制药股份有限公司，广东化州中药厂制药有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44