一种提高枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产量的发酵方法技术

本发明专利技术公开了一种提高枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产量的发酵方法，先获取菌种，然后将获取的菌种先后接种到种子培养基、发酵培养基中进行发酵获得枯草芽孢杆菌抗菌蛋白，根据菌体发酵开始后前6～16小时的对数生长期和菌体发酵开始16小时后至发酵结束的稳定期生长状况按照发酵时间进行分段调整。在枯草芽孢杆菌BNCC 189983抗菌蛋白发酵过程前调控菌种接种量，发酵过程中调控体系的温度、溶氧量、pH值、摇床转速，通过以上参数的调整可使发酵前期菌种能够快速稳定的生长，发酵中后期菌种能够高效稳定的产抗菌蛋白，降低其它副产物的生成。

A Fermentation Method for Increasing the Production of Bacillus subtilis Antibacterial Protein

The invention discloses a fermentation method for increasing the output of Bacillus subtilis antimicrobial protein. The obtained strains are first obtained and then inoculated into seed medium and fermentation medium to obtain Bacillus subtilis antimicrobial protein. According to the logarithmic growth period of 6-16 hours before and after the start of fermentation and the stable period from 16 hours after the start of fermentation to the end of fermentation, the obtained strains are successively inoculated into seed medium and fermentation medium to obtain Bacillus antimicrobial The growth status was adjusted by stages according to the fermentation time. Bacillus subtilis BNCC 189983 can control the inoculation amount of bacteria before the fermentation process, and control the temperature, dissolved oxygen, pH value and shaking speed of the system during the fermentation process. By adjusting the above parameters, the bacteria can grow rapidly and steadily in the early stage of fermentation, and the bacteria in the middle and late stage of fermentation can produce antimicrobial protein efficiently and steadily, and reduce the production of other by-products.

【技术实现步骤摘要】
一种提高枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产量的发酵方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种提高枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产量的发酵方法。
技术介绍
芽孢杆菌作为一类重要的生防菌，可以产生各种抑菌抗菌物质拮抗植物病原菌，具有防治植物病害的潜力，也是生物防治的主要来源。其中枯草芽孢杆菌是一种自然界广泛存在、对人畜无毒无害、不污染环境、对植物病害有抑制作用的非致病性芽孢杆菌。目前，许多科研人员对枯草芽孢杆菌以及其它芽孢杆菌的病原拮抗作用及其抗菌物质的研究非常广泛。芽孢杆菌能够产生多种抑菌物质防治病害，包括细菌素、细胞壁降解酶类、抗菌蛋白、脂肤类抗生素、聚酮类化合物和多肤类化合物等。其中抗菌蛋白是具有抗真菌活性的大分子量蛋白类物质，其氨基酸残基通常在50个以上，分子量大于5kDa。研究芽孢杆菌类生防细菌产生的抗菌蛋白，一方面可以进行发酵生产，形成生物农药用于防治植物病害，替代或减少化学农药使用；另一方面枯草芽孢杆菌已经被证实可以抑制大肠癌细胞的增殖，引起细胞周期阻滞和促进细胞凋亡，并有望在将来成为一种预防肠道肿瘤发生的益生菌。某些枯草芽孢杆菌产生的果聚糖还能促进肿瘤细胞中的乙酸、丙氨酸、乳酸和磷酸的增长本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产量的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：先获取枯草芽孢杆菌株，再将菌株接种到种子培养基中培养，得到种子液，然后将种子液接种到发酵培养基中发酵，在发酵过程中按对数生长期和稳定期进行分段调控发酵体系的温度、溶氧量、pH值以及摇床转速，最终后处理获得枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产物。

【技术特征摘要】
1.一种提高枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产量的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：先获取枯草芽孢杆菌株，再将菌株接种到种子培养基中培养，得到种子液，然后将种子液接种到发酵培养基中发酵，在发酵过程中按对数生长期和稳定期进行分段调控发酵体系的温度、溶氧量、pH值以及摇床转速，最终后处理获得枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产物。2.根据权利要求1所述的一种提高枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产量的发酵方法，其特征在于，控制菌种接种量为2～6％。3.根据权利要求1所述的一种提高枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产量的发酵方法，其特征在于，接种到种子培养基中的培养具体步骤为：将枯草芽孢杆菌株接种于斜面，于36～38℃恒温培养箱中培养，然后将斜面培养基上活化后的菌株制备成菌悬液，再接种于种子培养基中，于36～38℃、200～220r/min的摇床上震荡培养12～16小时得种子液。4.根据权利要求3所述的一种提高枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产量的发酵方法，其特征在于，按照质量百分比计，所述种子培养基包括葡萄糖1.0％，蛋白胨1.0％，NaCl1.0％，KH2PO40.15％，MgSO4·7H2O0.15％，及余量的水；pH值为7.0。5.根据权利1要求所述的一种提高枯草芽孢杆菌抗菌蛋白产量的发酵方法，其特征在于，所述发酵具体步骤为：将种子液按照体...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚国利，刘志强，张曦文，佐静，
申请(专利权)人：陕西科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61