测定醋酸阿托西班有关物质的方法技术

本发明专利技术涉及化学分析领域，具体而言，涉及一种测定醋酸阿托西班有关物质的方法。测定醋酸阿托西班有关物质的方法，包括以下步骤：采用球状蛋白亲水改性硅胶为色谱柱填料并对供试品溶液进行上样，而后利用溶液呈酸性的流动相A和有机溶剂为流动相B进行洗脱后进行检测。其中，洗脱时流动相A和流动相B以体积为60‑90：10‑40的比例进行洗脱。其能快速、有效地分离并检测出醋酸阿托西班原料药和注射液中的有关物质。

【技术实现步骤摘要】
测定醋酸阿托西班有关物质的方法
本专利技术涉及化学分析领域，具体而言，涉及一种测定醋酸阿托西班有关物质的方法。
技术介绍
阿托西班作为目前欧洲药物总署批准用于治疗早产的唯一具有子宫特异性的宫缩抑制剂，其作用机制是与催产素竞争子宫肌层、蜕膜、胎膜上的催产素受体，减少催产素的功效，减少肌细胞上的钙离子水平，从而抑制子宫收缩。阿托西班在生产及储存过程中，易产生杂质，而杂质易引起过敏反应、毒性及其他不良反应，但是现有技术中没有对醋酸阿托西班的杂质的分析鉴定方法。
技术实现思路
本专利技术提供了一种测定醋酸阿托西班有关物质的方法，其能快速、有效地分离并检测出醋酸阿托西班原料药和注射液中的有关物质。本专利技术是这样实现的：一种测定醋酸阿托西班有关物质的方法，包括以下步骤：采用球状蛋白亲水改性硅胶为色谱柱填料并对供试品溶液进行上样，而后利用溶液呈酸性的流动相A和有机溶剂为流动相B进行洗脱后进行检测；其中，洗脱时流动相A和流动相B以体积为60-90：10-40的比例进行洗脱。本专利技术的有益效果是：本专利技术的测定醋酸阿托西班有关物质的方法，选择球状蛋白亲水改性硅胶和溶液呈酸性的流动相A和有机溶剂为流动相B便于醋酸阿托西班有关物质的分离和洗脱，充分揭示了醋酸阿托西班的杂质，能够快速检测醋酸阿托西班有关物质提高产品的安全性，该方法科学、可靠，可控醋酸阿托西班有关物质。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。图1为本专利技术实施例1提供的含有已知杂质的阿托西班的标准品的HPLC图谱；图2为本专利技术实施例1提供的检测样品结果的HPLC图谱；图3为本专利技术实施例2提供的检测样品结果的HPLC图谱；图4为本专利技术实施例3提供的检测样品结果的HPLC图谱；图5为本专利技术实施例4提供的检测样品结果的HPLC图谱；图6为本专利技术实施例5提供的检测样品结果的HPLC图谱；图7为本专利技术灵敏度测试的检测限色谱图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例的测定醋酸阿托西班有关物质的方法进行具体说明。醋酸阿托西班的分子量为994.19，在醋酸阿托西班生产或者存放的过程中，受到光照、温度、湿度或者酸碱等影响，使得醋酸阿托西班发生聚合反应，得到二聚体或者多聚体，但是得到的聚合物具体的结构无法确定，也无法确定聚合物的分子量，或者聚合物的种类，不利于醋酸阿托西班的鉴定。因此，本专利技术提供测定醋酸阿托西班有关物质的方法，可以有效对醋酸阿托西班进行分离鉴定。一种测定醋酸阿托西班有关物质的方法，包括以下步骤：S1、配置供试品溶液；将待测样品溶解在混合溶液中得到的供试品溶液，其中，供试品溶液的质量百分数为0.7-1.8mg/ml，优选，为1-1.5mg/ml。供试品溶液采用上述质量百分数能够便于溶液内的各个物质分离，便于后续洗脱得到不同分子量的聚合物和阿托西班。进一步地，待测样品是阿托西班经过强酸、强光、强碱、高温加热发生强降解反应后自制的待测样品，通过该强降解反应，模拟阿托西班变质的过程，而后可以用于检测分离。混合溶液是流动相A和所述流动相B按照体积比为60-90:10-40的比例混合后制备得到的溶液。混合溶液与洗脱时的溶剂一致，可以减小溶剂峰，排除溶剂峰对杂质检出的干扰。S2、洗脱和检测；采用球状蛋白亲水改性硅胶为色谱柱填料并将其填充进色谱柱内，球状蛋白亲水改性硅胶是硅胶微球表面键合亲水性聚合物以及亲水性二醇基官能团，使得其对不同分子量的高分子聚合物有不同的吸附效果，同时具有良好的稳定性。进一步地，采用的球状蛋白亲水改性硅胶的分子量为1000-10000，由于醋酸阿托西班的分子量为994.19，阿托西班的二聚体的分子量约在2000左右，而阿托西班的其他多聚物或高分子杂质的分子量也在3000-6000之间，有些聚合物的分子量可达到10000，因此采用上述分子量的球状蛋白亲水改性硅胶能够对醋酸阿托西班以及其聚合物进行良好的分离，更具有专属性。若选择其他分子量更高的硅胶，不能对醋酸阿托西班以及其聚合物进行良好的分离，继而影响检测效果。上样完成后利用溶液呈酸性的流动相A和有机溶剂为流动相B进行洗脱，洗脱时流动相A和流动相B以体积为60-90：10-40的比例进行洗脱。在该范围内对阿托西班中的聚合物与高分子杂质与阿托西班主成分的分离效果更好，均能满足分离度大于1.5的要求，且各成分的峰形较好，理论板数也高。对阿托西班中的聚合物与高分子杂质的能够得到更有效的控制与检测。当流动相组分或比例不在以上范围内，则阿托西班中的聚合物与高分子杂质与阿托西班不能完全分离，且各成分的峰形较差，理论板数较低。无法有效的控制和检测其聚合物。进一步地，流动相A为pH为2.0-5.0的强碱弱酸盐或者在水溶液中不完全电离的酸。进一步地，强碱弱酸盐为强碱弱酸盐缓冲溶液；优选，0.01-1mol/ml磷酸盐缓冲液或者0.01-1mol/ml醋酸盐溶液；在水溶液中不完全电离的酸为一元酸或者多元酸；优选，所述一元酸为质量百分数为1.0～5.0％冰醋酸或者0.01～2.0％三氟乙酸，所述多元酸为0.01～2.0％磷酸。采用上述酸性溶液，基线噪音小，有利于杂质的检出。而利用枸橼酸缓冲盐或者其他溶剂作为流动相A则容易造成基限噪音大，不利于杂质的检出。同时，采用上述酸性溶液可以快速浸润固定相表面，继而使得各物质间分离良好，各峰理论塔板数较高。进一步地，流动相B为氰类溶剂或者醇类溶剂，优选，所述氰类溶剂为乙腈，所述醇类溶剂为一元醇溶剂，更优选为甲醇或者异丙醇。采用上述流动相B与流动相A组分进行混合分析时，色谱系统易容易平衡，稳定性较好，色谱柱的压力较低，对阿托西班中的聚合物与高分子杂质与阿托西班主成分的分离效果更好，均能满足分离度大于1.5的要求，且各成分的峰形较好，理论板数也高。对阿托西班中的聚合物与高分子杂质的能够得到更快速的、有效的控制与检测的同时，还能够保护色谱柱，延长色谱柱的使用寿命。如果采用其他有机溶剂，则会导致色谱系统难于平衡，甚至无法达到平衡，尤其是色谱柱本身对有机溶剂有一定选择性，因此对色谱柱具有一定的损害，因而选择甲醇或乙腈或异丙醇为流动相B是非常重要的。进一步地，在进行测试过程中，本专利技术还增设了保护柱，采用TSK-gelGuardcolummSWXL保护柱，采用的填料技术与检测用色谱柱相一致，保护柱不仅对样品检测不会产生影响，而且在样品分析量大时，避免伤柱子，延长色谱柱的寿命，保证了检测数据的准确性与重现性的同时，也降低了色谱柱损耗的成本。同时利用高效液相分析进行检测，检测波长为210-230nm。利用高效液相分析进行检测时流速为0.4-1.1ml/min，柱温为20～40℃，进样量为20μl。S3、参照图谱；进一步地，醋酸阿托西班内聚合物的结构不能确定，其分子量等信息也不能确定，因此本专利技术实施例通过设置参照图谱，便于快速找到高分子杂质的分子量。具体地，在对所述供试品溶液进行检测前，利用含有已知杂质的阿托西班的标准品进行分析，得到本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定醋酸阿托西班有关物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：采用球状蛋白亲水改性硅胶为色谱柱填料并对供试品溶液进行上样，而后利用溶液呈酸性的流动相A和有机溶剂为流动相B进行洗脱后进行检测；其中，洗脱时流动相A和流动相B以体积为60‑90：10‑40的比例进行洗脱。

【技术特征摘要】
1.一种测定醋酸阿托西班有关物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：采用球状蛋白亲水改性硅胶为色谱柱填料并对供试品溶液进行上样，而后利用溶液呈酸性的流动相A和有机溶剂为流动相B进行洗脱后进行检测；其中，洗脱时流动相A和流动相B以体积为60-90：10-40的比例进行洗脱。2.根据权利要求1所述的测定醋酸阿托西班有关物质的方法，其特征在于，所述流动相A为pH为2.0-5.0的强碱弱酸盐或者在水溶液中不完全电离的酸。3.根据权利要求2所述的测定醋酸阿托西班有关物质的方法，其特征在于，所述强碱弱酸盐为强碱弱酸盐缓冲溶液；优选，0.01-1mol/ml磷酸盐缓冲液或者0.01-1mol/ml醋酸盐溶液；在水溶液中不完全电离的酸为一元酸或者多元酸；优选，所述一元酸为质量百分数为1.0～5.0％冰醋酸或者0.01～2.0％三氟乙酸，所述多元酸为0.01～2.0％磷酸。4.根据权利要求1所述的测定醋酸阿托西班有关物质的方法，其特征在于，所述流动相B为氰类溶剂或者醇类溶剂，优选，所述氰类溶剂为乙腈，所述醇类溶剂为一元醇溶剂，更优选为甲醇或者异丙醇。5.根据权利要求1所述的测定醋酸阿托西班有关物质的方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐健峰，张瑾，苏晴，业新龙，王莉萍，吴一飞，
申请(专利权)人：南京康舟医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32