一种AFF细胞制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种AFF细胞及其制备方法。所述AFF细胞的制备方法，包括以下主要步骤：1)抽取患者外周血，进行ctDNA外显子测序，或者以肿瘤组织进行全外显子测序，筛选出突变位点，进行抗原表位预测并合成突变多肽；2)使用外周血制备永生化DC，并负载所述突变多肽，与PBMC共孵育，获得AFF细胞。

An AFF cell

The invention belongs to the field of biotechnology, in particular to an AFF cell and a preparation method thereof. The preparation method of AFF cells includes the following main steps: 1) extracting peripheral blood of patients, sequencing the exon of ctDNA, or sequencing the whole exon of tumor tissue, screening mutation sites, predicting antigen epitopes and synthesizing mutated polypeptide; 2) preparing immortalized DC using peripheral blood, loading the mutated polypeptide, and co-incubating with PBMC to obtain AFF cells.

【技术实现步骤摘要】
一种AFF细胞
：本专利技术属于生物
，具体地说，涉及一种AFF细胞及其制备方法。
技术介绍
：目前，在肿瘤的特异性免疫治疗方面，现有的LAK、DC、CIK、DC-CIK细胞和方法基本被证明是无效的，而NK、CAR-NK、TIL、等细胞技术还有待成熟，CAR－T细胞在安全性和实体瘤治疗中还有缺陷。现有技术一般通过改造DC细胞，由DC递呈T细胞产生特异杀伤。有些实验室在尝试用病毒做为载体的方法进行转染递呈T细胞，诱导T细胞的特异性杀伤。我们也曾用突变混合多肽直接刺激PBMC，诱导T细胞。还有实验室利用TCR-T技术，靶向递呈MAGEA3抗原。以上治疗方法并不成熟，尤其是体外诱导DC细胞及DC细胞负载肿瘤抗原技术理论上研究较多，但在具体实施过程中还有许多问题，缺乏明确的、肿瘤细胞发生发展关键的信号传导通路相关分子作为诱导抗原，因为肿瘤抗原不明及肿瘤微环境免疫抑制的障碍，使实现特异性细胞靶向免疫治疗难以顺利实施。另外，有的虽然进行了抗原体外冲击，但没有进行体外共培育和体外扩增，让较为单薄的特异性细胞直接面对复杂的肿瘤微环境，因此，很难起到预期的效果。也有的虽然也可以体外递呈和共培育，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种AFF细胞，其特征在于，所述AFF细胞由以下步骤制备：1)抽取患者外周血，进行ctDNA外显子测序，或者以肿瘤组织进行全外显子测序，筛选出突变位点，进行抗原表位预测并合成突变多肽；2)使用外周血制备永生化DC，并负载所述突变多肽，与PBMC共孵育，获得AFF细胞。

【技术特征摘要】
1.一种AFF细胞，其特征在于，所述AFF细胞由以下步骤制备：1)抽取患者外周血，进行ctDNA外显子测序，或者以肿瘤组织进行全外显子测序，筛选出突变位点，进行抗原表位预测并合成突变多肽；2)使用外周血制备永生化DC，并负载所述突变多肽，与PBMC共孵育，获得AFF细胞。2.如权利要求1所述AFF细胞，其特征在于，所述患者外周血也可以是市售工程细胞系。3.如权利要求1所述AF...

【专利技术属性】
技术研发人员：焦顺昌，张嵘，周子珊，陈小彬，张天赋，王海燕，陈红利，
申请(专利权)人：北京鼎成肽源生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11