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长链非编码RNA-HOXA-AS2在骨组织损伤修复中的应用制造技术

技术编号:20009873 阅读:47 留言:0更新日期:2019-01-05 20:06
本发明专利技术提供了长链非编码RNA‑HOXA‑AS2在骨组织损伤修复中应用。实验证明,过表达HOXA‑AS2能够显著促进间充质干细胞中的钙离子沉积,显著增强间充质干细胞中的碱性磷酸酶活性,显著提高间充质干细胞中成骨分化标志物RUNX2、SP7、SPP1基因的表达量,并能显著抑制NF‑κB信号的活性。

Application of Long Chain Non-coding RNA-HOXA-AS2 in Bone Tissue Injury Repair

The invention provides the application of long-chain non-coding RNA HOXA AS2 in repairing bone tissue damage. Experiments showed that overexpression of HOXA_AS2 could significantly promote calcium deposition in mesenchymal stem cells, significantly enhance alkaline phosphatase activity in mesenchymal stem cells, significantly increase the expression of osteogenic differentiation markers RUNX2, SP7 and SPP1 genes in mesenchymal stem cells, and significantly inhibit the activity of NF_kappa B signal.

【技术实现步骤摘要】
长链非编码RNA-HOXA-AS2在骨组织损伤修复中的应用
本专利技术属于干细胞生物工程
,更具体的说,涉及长链非编码RNA-HOXA-AS2在骨组织损伤修复中的应用。
技术介绍
骨骼损伤修复和再生,一直以来都是医学界的一大难题。对于运动性的骨骼损伤,医学界常常采用自体骨移植、同种异体骨移植、带血供的游离骨移植以及生物材料替代等传统方法进行治疗,但这些方法存在来源少、并发症多、免疫排斥以及医源性感染等诸多问题,治疗效果并理想。随着骨组织工程技术的不断发展,人们逐渐开始运用组织工程的方法,来解决骨组织损伤修复的问题。间充质干细胞作为一类具有良好增值能力以及多向分化潜能的种子细胞,走进了人们的视野。研究发现,间充质干细胞可以从骨髓、脂肪等多种组织中分离获取;在特定的条件下,间充质干细胞还可以分化成软骨细胞、成骨细胞和脂肪细胞等多种细胞;此外,间充质干细胞还具有很低的免疫原性。这些特有的特性使得间充质干细胞成为了临床上骨组织损伤修复和再生的种子细胞。大量研究证据表明:间充质干细胞的成骨分化,在分子水平上受到多种调控因子的影响,其中包括一些重要的转录调控因子,例如RUNX2和SP7等,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.长链非编码RNA‑HOXA‑AS2在骨组织损伤修复中的应用,所述长链非编码RNA‑HOXA‑AS2的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】
1.长链非编码RNA-HOXA-AS2在骨组织损伤修复中的应用,所述长链非编码RNA-HOXA-AS2的核苷酸序列如序列表中SEQIDNO:1所示。2.一种用于骨组织损伤修复的过表达载体pLV-HOXA-AS2,其特征在于:由HOXA-AS2基因片段与慢病毒空载体pLV构建而成;所述HOXA-AS2基因片段的核苷酸序列如序列表中SEQIDNO:2所示,所述慢病毒空载体pLV的核苷酸序列如序列表中SEQIDNO:3所示。3.权利要求2所述过表达载体pLV-HOXA-AS2的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:采用限制性内切酶BamHI和XbaI分别对慢病毒载体pLV以及HOXA-AS2基因片段进行双酶切,并采用T4DNA连接酶体系对酶切后的HOXA-AS2基因片段以及线性慢病毒载体pLV进行连接反应,然后转化感受态细胞,筛选阳性菌落,提取阳性菌落的质粒,得到所述的过表达载体pLV-HOXA-AS2。4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:所述HOXA-AS2基因片段的制备方法,包括以下步骤:依据所述长链非编码RNA-HOXA-AS2的核苷酸序列,采用DNA合成仪,根据固相亚磷酰胺三酯法原理对HOXA-AS2基因片段进行双链合成,同时在其5’末端和3’末端上分别添加BamHI和XbaI酶切位点,得到含有特异性酶切位点的HOXA-AS2基因片段。5.一种用于骨组织损伤修复的诱导型细胞,其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱鑫星林俊堂于金金钟根深郭睿杜江杨芬
申请(专利权)人:新乡医学院
类型:发明
国别省市:河南,41

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