The invention provides a method for releasing capsular polysaccharides from S. aureus type 5 or 8 cells, including steps for acid treatment of cells. The invention also provides a process for purifying capsular polysaccharides from Staphylococcus aureus type 5 or 8 cells including the method. Other processing steps may also be included in the process, such as enzymatic treatment, such as removal of nucleic acids, proteins and/or peptidoglycan contaminants; filtration, such as removal of small molecular weight contaminants; anion exchange chromatography, such as removal of residual proteins; and concentration.
【技术实现步骤摘要】
金黄色葡萄球菌5型和8型荚膜多糖的纯化本申请要求2009年10月30日提交的美国临时专利申请序列号61/256,905的优先权，其通过引用全文纳入本文。
本专利技术属于纯化细菌荚膜多糖领域，特别是金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的5型和8型荚膜多糖，并且具体用于制备疫苗。技术背景在抵御有荚膜细菌的疫苗中使用细菌的荚膜糖已有多年历史。然而，由于糖是不依赖于T细胞的抗原，它们的免疫原性很弱。与载体偶联可将T-非依赖性抗原转化成T-依赖性抗原，从而增强记忆应答，并产生保护性免疫。因此，最有效的糖疫苗基于糖偶联物，原型偶联疫苗针对流感嗜血菌(Haemophilusinfluenzae)(‘Hib’)[例如见参考文献96的第14章]。已经记载另一偶联疫苗的细菌是金黄色葡萄球菌(S.aureus)。已经从金黄色葡萄球菌中分离到多种多糖用于糖偶联物。两种特别感兴趣的多糖是5型和8型荚膜多糖。大约60％的人金黄色葡萄球菌菌株是8型，大约30％是5型。有关5型和8型偶联物的大量工作是由Fattom等进行的，可参见文献如参考文献1-9。基于多糖的疫苗的出...
【技术保护点】
1.一种从金黄色葡萄球菌(S.aureus)5型和8型细胞中释放荚膜多糖的方法，所述方法包括酸处理细胞步骤。
【技术特征摘要】
2009.10.30 US 61/256,9051.一种从金黄色葡萄球菌(S.aureus)5型和8型细胞中释放荚膜多糖的方法，所述方法包括酸处理细胞步骤。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞采用湿细胞体的形式或者悬浮在液体培养基中；和/或所述酸处理用乙酸进行；和/或所述酸处理产生O-乙酰化程度为60-100％的荚膜多糖；和/或所述方法还包括中和步骤；和/或所述方法还包括细胞离心和收集含多糖上清液的步骤。3.一种从金黄色葡萄球菌5型或8型细胞中纯化荚膜多糖的工艺，所述工艺包括权利要求1或2所述的方法；其中所述工艺任选还包括用DNase和/或RNase处理荚膜多糖的步骤，和/或用变溶菌素处理荚膜多糖的步骤，和/或渗滤步骤(任选切向流过滤)，和/或阴离子交换色谱步骤，和/或凝胶过滤步骤，和/或多糖浓缩步骤，和/或解聚纯化的多糖形成寡糖的步骤，和/或无菌过滤步骤。4.如权利要求3所述的工艺，其特征在于，所述纯化的多糖分子量是2-3500kDa。5.如权利要求3或4所述的工艺，其特征在于，所述工艺提供包含多糖和肽聚糖污染水平相对于多糖总重小于5％重量的组合物，任选所述肽聚糖污染水平约2％重量。6.如权利要求3-5中任一项所述的工艺，其特征在于，所述工艺提供包含多糖和蛋白质污染水平相对于多糖总重小于5％重量的组合物。7.如权利要求3-6中任一项所述的工艺，其特征在于，所述工艺提供包含多糖和核酸污染水平相对于多糖总重小于1％重量的组合物。8.如权利要求3-7中任一项所述的工艺，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：P·科斯塔蒂诺，M·R·罗马诺，F·伯尔蒂，
申请(专利权)人：诺华股份有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH
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