一种靶向EGFR二聚化界面的单链抗体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种靶向EGFR二聚化界面的单链抗体及其应用。所述融合蛋白含有从5’到3’依次连接的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的重链可变区蛋白、连接肽、氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示的轻链可变区蛋白的氨基酸序列。本发明专利技术构建并优化了靶向EGFR二聚化界面的单链抗体的基因及毕赤酵母工程菌，通过发酵及分离纯化获得了该单链抗体，即通过基因工程技术成功高效地制备了靶向EGFR二聚化界面的单链抗体，该抗体，相对分子质量较小，穿透性好，在对实体瘤治疗中，抑瘤效果大大提高，能有效抑制EGFR异常表达肿瘤细胞的增殖生长，这将为后续EGFR新型抑制剂的开发打下基础，有巨大的应用价值。

A Single Chain Antibody Targeting Dimerization Interface of EGFR and Its Application

The invention discloses a single chain antibody targeting the dimerization interface of EGFR and its application. The fusion protein contains amino acid sequences of heavy chain variable region protein, ligand peptide and light chain variable region protein, such as SEQ ID NO:3, which are sequentially linked from 5'to 3', such as SEQ ID NO:1. The invention constructs and optimizes the gene of single-chain antibody targeting EGFR dimerization interface and Pichia pastoris engineering bacteria, and obtains the single-chain antibody through fermentation and purification. That is to say, the single-chain antibody targeting EGFR dimerization interface has been successfully and efficiently prepared by genetic engineering technology. The antibody has small relative molecular weight and good penetration, and has great anti-tumor effect in the treatment of solid tumors. Great improvement can effectively inhibit the proliferation and growth of tumor cells with abnormal expression of EGFR, which will lay a foundation for the development of new inhibitors of EGFR and have great application value.

【技术实现步骤摘要】
一种靶向EGFR二聚化界面的单链抗体及其应用
本专利技术涉及EGFR异常表达的肿瘤的治疗
，更具体地，涉及一种靶向EGFR二聚化界面的单链抗体及其应用。
技术介绍
表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor，简写为EGFR)是酪氨酸激酶Ⅰ型受体家族的一个成员，该家族的其他成员包括HER2、HER3及HER4。EGFR受体分为三部分，即胞外配体结合区、跨膜固定区和胞内酪氨酸激酶区。特异性的配体和EGFR受体结合后，引起受体由无活性的单体状态转变为激活的二聚化状态，EGFR与自身或家族其它成员之间形成二聚体，进而激活胞内的酪氨酸激酶，其胞内段的酪氨酸残基被自身磷酸化或交叉磷酸化，招募含有SH2结构域的信号转导蛋白或信号蛋白，与残基紧密结合，形成多蛋白的复合物进行信号转导，引起下游包括PI3K-Akt、MAPK-Erk等信号通路的激活，调控细胞的生长和增殖。EGFR正常表达与细胞的基本生理活动密切相关，但当EGFR异常表达时，常会促进肿瘤细胞的生长、迁移、浸润和抗凋亡。EGFR已成为肿瘤治疗的重要靶标。到目前为止，针对EGFR已经开发出单克隆抗体(M本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种靶向EGFR二聚化界面的单链抗体的重链可变区蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

【技术特征摘要】
1.一种靶向EGFR二聚化界面的单链抗体的重链可变区蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。2.一种靶向EGFR二聚化界面的单链抗体的重链可变区基因，其特征在于，可以编码权利要求1所述重链可变区蛋白；优选地，其核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。3.一种靶向EGFR二聚化界面的单链抗体的轻链可变区蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：3所示。4.一种靶向EGFR二聚化界面的单链抗体的轻链可变区基因，其特征在于，可以编码权利要求3所述重链可变区蛋白；优选地，其核苷酸序列如SEQIDNO：4所示。5.一种靶向EGFR二聚化界面的单链抗体的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白含有从5’到3’依次连接的权利要求1所述重链可变区蛋白、连接肽、权利要求3所述轻链可变区蛋白的氨基酸序列。6.根据权利要求5所述的融合蛋白，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵林，李黄金，蔡金艳，郭土敬，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：广东,44