一种硼替佐米的杂质及其制备方法技术

本发明专利技术涉及硼替佐米的杂质及其制备方法，其作为硼替佐米质量控制参照标准品的用途和硼替佐米及其杂质的测试方法，可提高硼替佐米原料药的质量。

An Impurity of Bortezomib and Its Preparation Method

The present invention relates to the impurities of bortezomib and its preparation method. Its use as a reference standard for quality control of bortezomib and the test method for bortezomib and its impurities can improve the quality of bortezomib raw material.

【技术实现步骤摘要】
一种硼替佐米的杂质及其制备方法
本专利技术属于药物化学及药物分析领域，具体涉及硼替佐米的杂质及其制备方法，以及其作为硼替佐米质量控制参照标准品的用途和硼替佐米及其杂质的测试方法。
技术介绍
硼替佐米（Bortezomib），化学名称为[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧-3-苯基-2-[(吡嗪羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]-硼酸，CAS：179324-69-7，结构式如式I所示。硼替佐米，商品名为万珂（Velcade），是由美国千年制药公司（MillenniumPharmaceuticals）研发的一种二肽硼酸类蛋白酶体抑制剂，也是第一个用于临床的蛋白酶体抑制剂，目前主要用于多发性骨髓瘤（MM）和套细胞淋巴瘤（MCL）的治疗。该药物于2003年5月获得美国食品药品管理局（FDA）批准，用于治疗复发性和难治性多发性骨髓瘤。随后在欧洲、澳大利亚、马来西亚和中国等国家陆续上市，用于治疗复发性和难治性多发性骨髓瘤。硼替佐米作为一种新型高效专一的蛋白酶体抑制剂，其可逆地与26S蛋白酶体结合，阻断蛋白的降解通道，从而防止肿瘤细胞的恶性增殖。26S蛋白酶体是一种大的蛋白质复合体，可降解被泛素化的蛋白质。泛素蛋白酶体通道对调节特异蛋白在细胞内的浓度中起到重要作用，以维持细胞内环境的稳定。蛋白水解会影响细胞内多级信号串联，这种对正常细胞内环境的破坏会导致细胞的死亡。而对26S蛋白酶体的抑制可防止特异蛋白的水解。体外试验证明，硼替佐米对多种类型的癌细胞具有细胞毒性，除对多发性骨髓瘤的治疗外，还对套细胞型淋巴瘤及其他B细胞类型淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤等多种肿瘤有较强的抗肿瘤活性，同时还具有化疗耐药性，是第一个对血液系统和实体性恶性肿瘤都具有抗癌效应的蛋白酶体抑制剂，因此，硼替佐米作为肿瘤治疗的重要药物，具有广阔的应用前景和研究价值。制备专利WO2005097809（同族专利CN1960996）公开了一种硼替佐米的制备方法，该方法以(1S,2S,3R,5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯盐酸盐（式VII）为原料，在O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸(TBTU)作用下，与哌嗪甲酸（式VIII）偶联得中间体(1S,2S,3R,5S)-蒎烷二醇-N-(2-吡嗪羰基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯（式IX），再与异丁基硼酸（式X）在酸性条件下脱保护即得硼替佐米（式I），进一步通过重结晶等纯化手段即可制备高纯度硼替佐米，其合成路线如下：本领域已知出于对人体给药安全考虑，在一种活性药物成分（API）产品商业化之前需要由国家和国际的管理机构建立毒理学上非特征性杂质的鉴定的极低下限。通常，每种杂质的限量少于约0.15%重量比。未鉴定的和/或非特征性杂质的限量明显更低，通常少于0.1%重量比。本领域中也已知，硼替佐米或任何活性药物成分（API）中的杂质可能来自API本身的降解（这与纯API在储存过程中的稳定性相关）和制造过程，包括化学合成。工艺杂质包括未反应的原材料、原材料中所含的杂质的化学衍生物、合成副产物和降解产物。除稳定性外，商业制造的API的纯度也明显是商业化的必要条件。在商业制造过程中引入的杂质必须限制在极小量，并且最好基本上不存在。例如，供API制造商使用的internationalconferenceonharmonizationoftechnicalrequirementsforhumanuse(“ICH”)Q7A指南要求通过规定原材料的质量、控制工艺参数，如温度、压力、时间和化学计量比和在制造法中加入提纯步骤，如结晶、蒸馏和萃取来使工艺杂质保持在设定限额以下。化学反应的产物很少是具有符合药物标准的足够纯度的单一化合物。反应副产物以及该反应中所用的原材料多少也存在于产物混合物中。在API如硼替佐米制备过程中的某些阶段，通常必须通过HPLC、TLC或GC分析法分析其纯度，以测定其是否适用于继续加工和最终用在药品中。API不需要绝对纯净，因为绝对纯净是通常不可实现的理论目标。相反，设定纯度标准以确保API尽可能不含杂质，并因此对临床应用而言尽可能安全。如上所述，在美国，FoodandDrugAdministration(食品和药品管理)指南推荐，一些杂质的量仅限于低于0.1%。通常用光谱和/或其它物理方法鉴定杂质，然后得到一个峰位置，或TLC板中的斑点，之后鉴定杂质，例如通过它在色谱图中的相对位置来鉴定，色谱图中的相对位置成为“保留时间”。根据仪器使用条件以及很多其它因素，保留时间每天或甚至在一天之中都在变化。为了减少这些变化影响到杂质的准确识别，通常用“相对保留时间（RRT）”来鉴定杂质。杂质的RRT是用它的保留时间除以主峰的保留时间。本领域已知，参照标准品可以用于未知混合物中参照标准化合物的定性和定量，当参照标准的已知浓度的溶液和未知混合物用相同技术分析时，参照标准是“外标”,可以通过比较检测器的响应强度来测定混合物中所述化合物的量。如本领域技术人员已知的，通过了解其化学结构和合成途径，及通过鉴定终产品的杂质和确定终产品的杂质的量来大大加强工艺杂质的控制。目前，已有多篇文献资料报道了硼替佐米的制备或纯化方法。硼替佐米制备专利WO2005097809描述了硼替佐米的制备及其纯化方法，该专利采用乙酸乙酯或甲基叔丁基醚重结晶进行纯化，纯化效果不明显。其它专利WO2009036281、WO2011098963、CN101812026、CN105601705、CN104822688、CN103897028等也存在同样的问题，且文献报道中也未公开关于硼替佐米杂质的控制方法。因此，现有的硼替佐米制备技术中，存在产品纯度不高，缺乏对单个杂质的控制等不足之处。针对现有技术中的不足，本专利技术对硼替佐米产品中的杂质控制进行了研究，制备了两种以前未鉴定过的硼替佐米杂质即式V化合物和式VI化合物，这两个化合物均可能在硼替佐米的合成过程或储存期间形成，就申请人所知，这两个化合物从未被独立制备以及与硼替佐米分离，因此，我们专利技术了将这两个化合物作为杂质参照标准用于硼替佐米纯度分析定量的方法。。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种式V化合物，其为硼替佐米的降解杂质，即(S,Z)-N-[1-(3-甲基丁烯氨)-1-氧-3-苯基丙烷-2-基]吡嗪-2-甲酰胺。上述式V化合物在一些实施方案中被分离为具有至少50%的纯度，或者至少60%的纯度，或者至少70%的纯度，或者至少80的纯度，或者至少90%的纯度，或者至95%的纯度，或者至少96%的纯度，或者至少97%的纯度，或者至少98%的纯度，或者至少99%的纯度。该纯度一般为HPLC面积归一化法的纯度。本专利技术还提供一种式V化合物和式VI化合物的制备方法，包括如下步骤：（1）、在至少一种有机溶剂中，用至少一种乙酰化试剂和一种碱乙酰化式II化合物，得到式III化合物。（2）、在至少一种有机溶剂中，用至少一种碱与式III化合物进行消除反应，得到式IV化合物。（3）、利用至少一种纯化手段将式IV化合物进行分离、纯化，分别得到式V化合物和式VI化合物。其中，步骤（1）和（2）中所述有机溶剂选自二氯甲烷、四氢呋喃和二氧六环。其中，步骤（1）中所述乙酰化试剂选自乙酸酐、乙酸和乙酰氯，优选本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种式V化合物，

【技术特征摘要】
1.一种式V化合物，。2.一种制备如权利要求1式V所示化合物的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：（1）在至少一种有机溶剂中，用至少一种乙酰化试剂和一种碱乙酰化式II化合物，得到式III化合物；（2）在至少一种有机溶剂中，用至少一种碱与式III化合物进行消除反应，得到式IV化合物；（3）利用至少一种纯化手段将式IV化合物进行分离、纯化，分别得到式V化合物和式VI化合物。3.根据权利要求2所述方法，其特征在于：步骤（1）和（2）中所述有机溶剂选自二氯甲烷、四氢呋喃和二氧六环。4.根据权利要求2所述方法，其特征在于：步骤（1）中所述乙酰化试剂选自乙酸酐、乙酸和乙酰氯，优选为乙酸酐。5.根据权利要求2所述方法，其特征在于：步骤（1）和（2）中所述碱选自三乙胺、吡啶、吗啉、4-二甲氨基吡啶、1,8-二氮杂二环(5.4.0)十一碳-7-烯和1,5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯，优选为选自三乙胺和4-二甲氨基吡啶。6.根据权利要求2所述方法，其特征在于：步骤（1）和（2）中所述碱选自三乙胺和4-二甲氨基吡啶。7.根据权利要求2所述方法，其特征在于：步骤（3）所述纯化手段选自制备色谱和常规柱层析。8.根据权利要求2所述方法，其特征在于：所述步骤（1）中乙酰化试剂与式II化合物的摩尔比为1~200:1，优选为1~10:1，更优选为3:1。9.根据权利要求2所述方法，其特征在于：所述步骤（1）中碱与式II化合物的摩尔比为0.1~100:1，优选为1~10:1，更优选为3:1；所述步骤（2）中碱与式III化合物的摩尔比为0.1~100:1，优选为1~10:1，更优选为2:1。10.一种制备如权利要求1式V所示化合物的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：（1）、在至少一种有机溶剂中，用至少一种乙酰化试剂和一种碱同时乙酰化和消除式II化合物，得到式IV化合物；（2）、利用至少一种纯化手段将式IV化合物进行分离、纯化，分别得到式V化合物和式VI化合物。11.根据权利要求10所述方法，其特征在于：步骤（1）中所述有机溶剂选自二氯甲烷、四氢呋喃和二氧六环。12.根据权利要求10所述方法，其特征在于：步骤（1）中所述乙酰化试剂选自乙酸酐、...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹益品，黄强，蒋歆，唐远富，邹春兰，袁泉，
申请(专利权)人：重庆医药工业研究院有限责任公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50