一种临床级别无血清细胞冻存液制造技术

本发明专利技术公开了一种无血清细胞冻存液，由氨基酸组分、无机盐组分、细胞外冷冻保护剂、细胞内冷冻保护剂等组成。本发明专利技术的细胞冻存液，含有双重保护成份，从细胞内和细胞外同时保护细胞免受冻存时冰晶的损伤，大大提高了细胞的复苏率，适应广泛的细胞系保存（可用于细胞长期的保存，可应用于细胞库的建立，科研细胞株保存，临床间充质干细胞、单核细胞、免疫细胞以及所涉及到的所有哺乳动物细胞的长期保存），同时本发明专利技术的细胞冻存液中为完全无血清、无蛋白、无DMSO冻存液，避免了临床应用中引入的异种外源成份，更加安全。

A clinical grade serum-free cryopreservation solution

The present invention discloses a serum-free cell cryopreservation solution, which is composed of amino acid component, inorganic salt component, extracellular cryoprotectant, intracellular cryoprotectant, etc. The cell cryopreservation solution of the present invention contains double protective components, which can protect cells from ice crystal damage both inside and outside cells, greatly improve the recovery rate of cells and adapt to extensive cell line preservation (can be used for long-term cell preservation, can be used for the establishment of cell bank, the preservation of scientific cell lines, clinical mesenchymal stem cells, monocytes and immune cells). At the same time, the cell cryopreservation solution of the present invention is completely serum-free, protein-free and DMSO-free, avoiding the introduction of exogenous ingredients in clinical application, and is safer.

【技术实现步骤摘要】
一种临床级别无血清细胞冻存液
本专利技术涉及一种临床级别无血清细胞冻存液。
技术介绍
细胞冻存液在保存细胞时，通过冷冻保护剂在冻存过程对细胞进行保护，传统的细胞保护剂仅为细胞内保护剂，细胞受冻存时容易受到冰晶的损伤，细胞复苏率低，无法有效保护细胞。另外，现有技术中的细胞冻存液通常含有动物源性物质，成分复杂，在临床应用上存在潜在的风险，也增加了污染的几率，同时目前大多数冻存液都含有DMSO（二甲基亚砜），临床应用存在一定的毒性。
技术实现思路
针对上述现有技术，本专利技术提供了一种临床级别无血清细胞冻存液，可用于细胞长期的保存，可应用于细胞库的建立，科研细胞株保存，临床间充质干细胞、单核细胞、免疫细胞以及所涉及到的所有哺乳动物细胞的长期保存，同时冻存液中不含DMSO成分，以及动物源成分，更安全，符合临床需要。本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种临床级无血清细胞冻存液，是由以下浓度的组分组成的，各浓度单位若无特别说明，均为mg/L：L-精氨酸100～300；CuSO4·5H2O0.0005～0.005；L-天门冬酰胺25～75；L-天门冬氨酸10～30；L-谷氨酸10～30；Ni（NO3本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种无血清细胞冻存液，其特征在于：是由以下浓度的组分组成的，各浓度单位若无特别说明，均为mg/L：L‑精氨酸 100～300；CuSO4·5H2O 0．0005～0.005；L‑天门冬酰胺25～75；L‑天门冬氨酸10～30；L‑谷氨酸 10～30；Ni（NO3）2· 6H2O 0．00002～0.0002；L‑谷氨酰胺 0～500；ZnSO4· 7H2O 0．06～0.6；甘氨酸 5～15；CoCl2· 6H2O 0．001～0.008；L‑组氨酸10～30；NaSiO3· 9H2O 0.001～0.01；L‑异亮氨酸 25～75；Na3VO4· 12H2O 0.0005～0.005；L...

【技术特征摘要】
1.一种无血清细胞冻存液，其特征在于：是由以下浓度的组分组成的，各浓度单位若无特别说明，均为mg/L：L-精氨酸100～300；CuSO4·5H2O0．0005～0.005；L-天门冬酰胺25～75；L-天门冬氨酸10～30；L-谷氨酸10～30；Ni（NO3）2·6H2O0．00002～0.0002；L-谷氨酰胺0～500；ZnSO4·7H2O0．06～0.6；甘氨酸5～15；CoCl2·6H2O0．001～0.008；L-组氨酸10～30；NaSiO3·9H2O0.001～0.01；L-异亮氨酸25～75；Na3VO4·12H2O0.0005～0.005；L-赖氨酸盐酸20～60；SnC12·2H2O0．00001～0.0001；L-蛋氨酸10～30；Na2SeO30．002～0.01；L-苯丙氨酸10～30；FeSO4·7H2O0．2～1.6；L-脯氨酸10～30；葡萄糖1000～4000；L-丝氨酸15～45；维生素CO.176～0．704；L-苏氨酸10～30；对羟基苯甲酸0．5～1．5；L-色氨酸5～15；丙酮酸钠55～550；L-缬氨酸1O～30；亚油酸0．01～0.05；L-亮氨酸25～75；β-巯基乙醇0．8～4.0；二水L-酪氨酸二钠144～432；L-胱氨酸二盐酸25～75；细胞外冷冻保护剂1000～6000；细胞内冷冻保护剂1000～6000；余量为水。2.根据权利要求1所述的无血清细胞冻存液，其特征在于：所述细胞外冷冻保护剂选自羟乙基淀粉。3.根据权利要求1或2所述的无血清细胞冻存液，其特征在于：是由以下浓度的组分组成的，各浓度单位若无特别说明，均为mg/L：L-精氨酸200；CuSO4·5H2O0．001；L-天门冬酰胺50；L-天门冬氨酸20；L-谷氨酸20；Ni（NO3）2·6H2O0．0001；L-谷氨酰胺250；ZnSO4·7H2O0．3；甘氨酸10；CoCl2·6H2O0．004；L-组氨酸20；NaSiO3·9H2O0.005；L-异亮氨酸50；Na3VO4·12H2O0.002；L-赖氨酸盐酸40；SnC12·2H2O0．00005；L-蛋氨酸20；Na2SeO30．006；L-苯丙氨酸20；FeSO4·7H2O1.0；L-脯氨酸20；葡萄糖2500；L-丝氨酸30；维生素CO.500；L-苏氨酸20；对羟基苯甲酸1.0；L-色氨酸10；丙酮酸钠300；L-缬氨酸20；亚油酸0．03；L-亮氨酸50；β-巯基乙醇2.0；二水L-酪氨酸二钠300；L-胱氨酸二盐酸50；细胞外冷冻保护剂250...

【专利技术属性】
技术研发人员：李海峰，张莹莹，
申请(专利权)人：王晓柯，
类型：发明
国别省市：北京,11