本发明专利技术公开了一种分离盐酸雷莫司琼和其S型对映异构体的高效液相色谱方法，色谱条件如下：色谱柱为Zorbax SB‑苯基柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为含有10mM(R)‑4‑苯基‑2‑恶唑烷酮的乙腈∶0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调至pH 3.0)(35∶65)；0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液的配制方法为：称取磷酸二氢钾，加水溶解混匀至所需浓度，用磷酸调至pH 3.0，0.45μm滤膜抽滤。本发明专利技术提供的方法为常规的HPLC色谱分离法，仅需要使用普通的苯基色谱柱即可有效分离盐酸雷莫司琼和其S型对映异构体，重复性好且色谱耗材成本低。
A high performance liquid chromatography method for the separation of ramosetron hydrochloride and its S-type enantiomers
The invention discloses a high performance liquid chromatography method for separating ramosetron hydrochloride and its S-type enantiomers. The chromatographic conditions are as follows: the chromatographic column is Zorbax SB phenyl column (4.6 mm *250 mm, 5 um); the mobile phase is acetonitrile 0.02mol/L potassium dihydrogen phosphate buffer containing 10 mM (R)4 phenyl 2 oxazolidone (adjusted to pH 3.0 with phosphoric acid) (35:65); and 0.02mol/L potassium dihydrogen phosphate slow-release solution. The preparation method of the fluids is as follows: the potassium dihydrogen phosphate is weighed, dissolved and mixed with water to the desired concentration, and then filtered with phosphoric acid adjusted to pH 3.0, 0.45 um filter membrane. The method provided by the invention is a conventional HPLC chromatographic separation method. Ramosetron hydrochloride and its S-type enantiomer can be effectively separated by using only a common phenyl chromatographic column, with good repeatability and low cost of chromatographic consumables.
【技术实现步骤摘要】
一种分离盐酸雷莫司琼和其S型对映异构体的高效液相色谱方法
本专利技术属于医药检测领域，涉及盐酸雷莫司琼和其S型对映异构体的分离检测。
技术介绍
盐酸雷莫司琼(ramosetronhydrochloride，1盐酸盐)是日本山之内公司研发的强效5-羟色胺(5-HT3)受体拮抗剂，主要用于预防和治疗抗恶性肿瘤药物治疗所引起的恶心、呕吐等消化道症状，以及术后的恶心、呕吐症状。1在吲哚结构和羰基连接处有一个手性中心。据报道，在小鼠母神经细胞中，(R)-型的1对5-HT3受体的亲和性是其对映异构体2[(S)-型]的112倍。临床使用的1为(R)-型，由于对映体在药理学、药动学和毒理学方面可能存在差异，越来越多的药物临床以单一对映体给药。因此，在药物处方工艺研究和贮藏条件选择中，应充分考察异构体杂质产生的影响因素及其质量控制方法。现有技术主要采用HPLC手性柱分离法和毛细管电泳法分离1和2，但是：毛细管电泳法重复性较差；HPLC手性柱分离法需要依赖于昂贵的手性柱。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种分离盐酸雷莫司琼和其S型对映异构体的高效液相色谱方法。本专利技术上述目的通过如下技术方案实现：一种分离盐酸雷莫司琼和其S型对映异构体的高效液相色谱方法，色谱条件如下：色谱柱为ZorbaxSB-苯基柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为含有10mM(R)-4-苯基-2-恶唑烷酮的乙腈∶0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调至pH3.0)(35∶65)；0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液的配制方法为：称取磷酸二氢钾，加水溶解混匀至所需浓度，用磷酸调至pH3.0，0.45μm滤膜抽滤。优选地，流速为1.0ml/min。优选地，检测波长为306nm。优选地，柱温为30℃。优选地，进样量为20μl。有益效果：本专利技术提供的方法为常规的HPLC色谱分离法，仅需要使用普通的苯基色谱柱即可有效分离盐酸雷莫司琼和其S型对映异构体，重复性好且色谱耗材成本低。附图说明图1为实施例1混合对照品溶液HPLC分离效果图；图2为实施例2混合对照品溶液HPLC分离效果图；图3为实施例3混合对照品溶液HPLC分离效果图。具体实施方式下面结合附图和实施例具体介绍本专利技术实质性内容，但并不以此限定本专利技术的保护范围。实施例1：一、仪器与试药LC-20A型高效液相色谱仪(日本Shimadzu公司，配有四元泵、在线脱气装置、自动进样器、DAD检测器、LCsolution化学工作站)。盐酸雷莫司琼对照品购自中国食品药品检定研究院，纯度不低于99％；S型对映异构体对照品购自TLCPharmaChem.,Inc.，纯度不低于99％。乙腈为色谱纯，磷酸二氢钾为优级纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。二、方法与结果2.1色谱条件色谱柱为ZorbaxSB-苯基柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为含有10mM(R)-4-苯基-2-恶唑烷酮的乙腈∶0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调至pH3.0)(35∶65)；0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液的配制方法为：称取配方量的磷酸二氢钾，加水至配方体积，溶解混匀，用磷酸调至pH3.0，0.45μm滤膜抽滤；流速为1.0ml/min；检测波长为306nm；柱温为30℃；进样量为20μl。2.2溶液配制盐酸雷莫司琼对照品溶液：精密称取盐酸雷莫司琼对照品用35％乙腈水溶液溶解定容至100μg/ml；S型对映异构体对照品溶液：精密称取S型对映异构体对照品用35％乙腈水溶液溶解定容至100μg/ml；混合对照品溶液：分别精密称取盐酸雷莫司琼对照品、S型对映异构体对照品用35％乙腈水溶液溶解定容至各自浓度为100μg/ml；2.3分离效果取盐酸雷莫司琼对照品溶液、S型对映异构体对照品溶液、混合对照品溶液与空白溶剂，按上述色谱条件分别进样测定，记录色谱图(见图1)。结果显示，在该色谱条件下，盐酸雷莫司琼与S型对映异构体分离度大于2.0，理论板数大于10000。实施例2：一、仪器与试药LC-20A型高效液相色谱仪(日本Shimadzu公司，配有四元泵、在线脱气装置、自动进样器、DAD检测器、LCsolution化学工作站)。盐酸雷莫司琼对照品购自中国食品药品检定研究院，纯度不低于99％；S型对映异构体对照品购自TLCPharmaChem.,Inc.，纯度不低于99％。乙腈为色谱纯，磷酸二氢钾为优级纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。二、方法与结果2.1色谱条件色谱柱为ZorbaxSB-苯基柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为含有10mM(2S,3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁酸的乙腈∶0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调至pH3.0)(35∶65)；0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液的配制方法为：称取配方量的磷酸二氢钾，加水至配方体积，溶解混匀，用磷酸调至pH3.0，0.45μm滤膜抽滤；流速为1.0ml/min；检测波长为306nm；柱温为30℃；进样量为20μl。2.2溶液配制盐酸雷莫司琼对照品溶液：精密称取盐酸雷莫司琼对照品用35％乙腈水溶液溶解定容至100μg/ml；S型对映异构体对照品溶液：精密称取S型对映异构体对照品用35％乙腈水溶液溶解定容至100μg/ml；混合对照品溶液：分别精密称取盐酸雷莫司琼对照品、S型对映异构体对照品用35％乙腈水溶液溶解定容至各自浓度为100μg/ml；2.3分离效果取盐酸雷莫司琼对照品溶液、S型对映异构体对照品溶液、混合对照品溶液与空白溶剂，按上述色谱条件分别进样测定，记录色谱图(见图2)。结果显示，在该色谱条件下，盐酸雷莫司琼与S型对映异构体分离度大于2.0，理论板数大于10000。实施例3：对比实施例一、仪器与试药LC-20A型高效液相色谱仪(日本Shimadzu公司，配有四元泵、在线脱气装置、自动进样器、DAD检测器、LCsolution化学工作站)。盐酸雷莫司琼对照品购自中国食品药品检定研究院，纯度不低于99％；S型对映异构体对照品购自TLCPharmaChem.,Inc.，纯度不低于99％。乙腈为色谱纯，磷酸二氢钾为优级纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。二、方法与结果2.1色谱条件色谱柱为ZorbaxSB-苯基柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈∶0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调至pH3.0)(35∶65)；0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液的配制方法为：称取配方量的磷酸二氢钾，加水至配方体积，溶解混匀，用磷酸调至pH3.0，0.45μm滤膜抽滤；流速为1.0ml/min；检测波长为306nm；柱温为30℃；进样量为20μl。2.2溶液配制盐酸雷莫司琼对照品溶液：精密称取盐酸雷莫司琼对照品用35％乙腈水溶液溶解定容至100μg/ml；S型对映异构体对照品溶液：精密称取S型对映异构体对照品用35％乙腈水溶液溶解定容至100μg/ml；混合对照品溶液：分别精密称取盐酸雷莫司琼对照品、S型对映异构体对照品用35％乙腈水溶液溶解定容至各自浓度为100μg/ml；2.3分离效果取盐酸雷莫司琼对照品溶液、S型对映异构体对照品溶液、混合对照品溶液与空白溶剂，按上述色谱条件分别进样测定，记录色谱图(见图3)。本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种分离盐酸雷莫司琼和其S型对映异构体的高效液相色谱方法，其特征在于，色谱条件如下：色谱柱为Zorbax SB‑苯基柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为含有10mM(R)‑4‑苯基‑2‑恶唑烷酮的乙腈∶0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调至pH 3.0)(35∶65)；0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液的配制方法为：称取磷酸二氢钾，加水溶解混匀至所需浓度，用磷酸调至pH 3.0，0.45μm滤膜抽滤。
【技术特征摘要】
1.一种分离盐酸雷莫司琼和其S型对映异构体的高效液相色谱方法，其特征在于，色谱条件如下：色谱柱为ZorbaxSB-苯基柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为含有10mM(R)-4-苯基-2-恶唑烷酮的乙腈∶0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调至pH3.0)(35∶65)；0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液的配制方法为：称取磷酸二氢钾，加水溶...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑嘉荣，陈志文，
申请(专利权)人：淮安安莱生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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