一种HPLC法分析及制备3-(N-对甲苯磺酰基-L-丙氨酰氧基)-5-苯基吡咯及其对映异构体的方法技术

本发明专利技术公开了一种HPLC法分析及制备(‑)‑吡咯酯及其对映异构体的方法，以多糖衍生物涂覆型填料为手性固定相，以正己烷‑异丙醇混合溶剂或正己烷‑乙醇混合溶剂为流动相，采用正相色谱法分析分离。该方法能够简单、准确、高效的分析及制备单一旋光性的(‑)‑吡咯酯及其对映异构体，进而实现对其质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种HPLC法分析及制备3-(N-对甲苯磺酰基-L-丙氨酰氧基)-5-苯基吡咯及其对映异构体的方法
本专利技术涉及一种色谱分析分离方法，尤其是一种分析及制备3-(N-对甲苯磺酰基-L-丙氨酰氧基)-5-苯基吡咯及其对映异构体的高效液相色谱法，属于化学原料制备的

技术介绍
尿白细胞是尿常规检测的一项重要指标，吡咯酯是干化法测定尿白细胞的试剂带模块中的重要底物，其测定原理为：白细胞中的中性粒细胞胞浆内含有酯酶，酯酶作用于试纸模块中的吡咯酯，使其发生水解反应并且进一步与重氮盐偶联，形成紫色络合物，其颜色的深浅与中性粒细胞的多少成正比例关系。吡咯酯具体分为(-)-吡咯酯，化学名为3-(N-对甲苯磺酰基-L-丙氨酰氧基)-5-苯基吡咯和(+)-吡咯酯，化学名为3-(N-对甲苯磺酰基-D-丙氨酰氧基)-5-苯基吡咯，其结构如式(1)所示：式1中，A：(-)-吡咯酯；B：(+)-吡咯酯；酯酶对吡咯酯两种对映异构体的立体选择性有所差异，对(-)-吡咯酯选择性水解较强，而对于另一种对映异构体(+)-吡咯酯选择性水解相对较弱，因此，尿白细胞试纸中使用的吡咯酯通常为(-)-吡咯酯。因此，如何分析本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HPLC法分析及制备(‑)‑吡咯酯及其对映异构体的方法，其特征在于，采用手性色谱柱并使用正相色谱法进行分析分离；所述的手性色谱柱填料为多糖衍生物涂覆型手性色谱柱，具体为硅胶表面涂覆有直链淀粉‑三(3,5‑二甲基苯基氨基甲酸酯)、直链淀粉‑三[(S)‑α‑甲基苯基氨基甲酸酯]、纤维素‑三(3,5‑二甲基苯基甲酸酯)、直链淀粉‑三(5‑氯‑2‑甲基苯基氨基甲酸酯)或纤维素‑三(3氯‑4‑甲基苯基氨基甲酸酯)中的一种；所述的正相色谱法所用的流动相为正己烷‑异丙醇混合溶剂或正己烷‑乙醇混合溶剂；所述的分析方法包括以下步骤：(1).(+)‑吡咯酯和(‑)‑吡咯酯对照品分别用乙醇溶解，配置成浓度为...

【技术特征摘要】
1.一种HPLC法分析及制备(-)-吡咯酯及其对映异构体的方法，其特征在于，采用手性色谱柱并使用正相色谱法进行分析分离；所述的手性色谱柱填料为多糖衍生物涂覆型手性色谱柱，具体为硅胶表面涂覆有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)、直链淀粉-三[(S)-α-甲基苯基氨基甲酸酯]、纤维素-三(3,5-二甲基苯基甲酸酯)、直链淀粉-三(5-氯-2-甲基苯基氨基甲酸酯)或纤维素-三(3氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)中的一种；所述的正相色谱法所用的流动相为正己烷-异丙醇混合溶剂或正己烷-乙醇混合溶剂；所述的分析方法包括以下步骤：(1).(+)-吡咯酯和(-)-吡咯酯对照品分别用乙醇溶解，配置成浓度为0.1mg/mL的对照品溶液；(2).(±)-吡咯酯供试品用乙醇溶解，配制成浓度为0.1～1mg/mL的供试品溶液，进样量为5～10μL；(3).设置正己烷-异丙醇混合溶剂或正己烷-乙醇混合溶剂的比例为90：10～0：100；设置流速为0.4～1.0mL/min；设置液相色谱柱温箱温度为20～40℃；检测波长为210nm；(4).精密吸取(+)-吡咯酯和(-)-吡咯酯对照品及(±)-吡咯酯供试品溶液分别注入液相色谱柱，参照(+)-吡咯酯和(-)-吡咯酯对照品保留时间，完成对(-)-吡咯酯及其对映异构体的分析；所述的制备方法包括以下步骤：(1).(+)-吡咯酯和(-)-吡咯酯对照品分别用乙醇溶解，配置成浓度为1mg/mL的对照品溶液；(2).(±)-吡咯酯供试品用乙醇溶解，配制成浓度为5～10mg/mL的供试品溶液；进样量为1-10mL；(3).设置正己烷-异丙醇混合溶剂或正己烷-乙醇混合溶剂的比例为90：10～0：100；设置流速为5～50mL/min；检测波长为210nm；(4).取(+)-吡咯酯和(-)-吡咯酯对照品及(±)-吡咯酯供试品溶液分别注入液相色谱柱，参照(+)-吡咯酯和(-)-吡咯酯对照品保留时间，分别接收对应主峰，浓缩，干燥，完成对(-)-...

【专利技术属性】
技术研发人员：修志明，王淑红，薛晴，李志波，赵春影，
申请(专利权)人：长春百纯和成医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22