一种口蹄疫多型表位肽、疫苗及其应用制造技术

技术编号:19872117 阅读:39 留言:0更新日期:2018-12-22 15:43
本发明专利技术公开了一种口蹄疫多型表位肽、疫苗及其应用,涉及生物技术领域。本发明专利技术的口蹄疫多型表位肽是以瑞士乳杆菌S层蛋白(T‑8)基因为模板,设计引物,将O、A及Asia I3型FMDV的VP1特定表位基因嵌入到所述S层蛋白自我组装区域,再连接表达载体pGEX‑4T‑3,并转化到大肠杆菌BL21中进行表达,表达产物用SDS‑PAGE鉴定,获得口蹄疫多型表位肽。

【技术实现步骤摘要】
一种口蹄疫多型表位肽、疫苗及其应用
本专利技术涉及生物
,尤其涉及一种口蹄疫多型表位肽、疫苗及其应用。
技术介绍
口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种急性、热性和高度接触性传染病,主要感染牛、猪和羊等多种家畜和野生哺乳动物,对畜牧产业和国民经济造成严重的损失。FMD已成世界性分布、虽然化学方法灭活的全病毒肽在FMD的预防和控制过程中发挥着中药的作用,但是,在肽应用实践中凸显出很多不足。如纯化病毒颗粒难度大,病毒株储存条件苛刻,肽接种免疫效果不稳定等。FMDV在血清学上分7个血清型,即A/O/C/SAT/SAT2/SAT3和AsiaI,每一型又多个亚型。在我国目前同时存在A型、O型和AsiaI型。目前口蹄疫基因工程亚单位肽又称生物合成亚单位肽或重组单位肽,是指将保护性抗原基因在原核或真核细胞中表达,并以基因产物-蛋白质或多肽制成肽。目前口蹄疫基因工程亚单位肽大多都是单价苗。由于各血清型之间的抗原性不同,此间又无交叉免疫现象,此单价苗的预防效果比较有限。虽然以FMDV-A/C为代表大的基因工程多价苗已经诞生,在膝鼠和牛体实验中获得了喜人的结果,其对插入基因表达产物的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种口蹄疫多型表位肽,其特征在于,所述表位肽是以核苷酸序列为SEQ ID NO.9的瑞士乳杆菌S层蛋白(T‑8)基因为模板,设计引物,将O、A及Asia I3型FMDV的VP1特定表位基因嵌入到所述S层蛋白自我组装区域,再连接表达载体pGEX‑4T‑3,并转化到大肠杆菌BL21中进行表达,表达产物用SDS‑PAGE鉴定,获得口蹄疫多型表位肽,其氨基酸序列为SEQ ID NO.10。

【技术特征摘要】
1.一种口蹄疫多型表位肽,其特征在于,所述表位肽是以核苷酸序列为SEQIDNO.9的瑞士乳杆菌S层蛋白(T-8)基因为模板,设计引物,将O、A及AsiaI3型FMDV的VP1特定表位基因嵌入到所述S层蛋白自我组装区域,再连接表达载体pGEX-4T-3,并转化到大肠杆菌BL21中进行表达,表达产物用SDS-PAGE鉴定,获得口蹄疫多型表位肽,其氨基酸序列为SEQIDNO.10。2.权利要求1所述的一种口蹄疫多型表位肽,其特征在于,所述构建方法中设计的引物:引物对1的上游引物核苷酸序列为SEQIDNO.1,下游引物核苷酸序列为SEQIDNO.2;引物对2的上游引物核苷酸序列为SEQIDNO.3,下游引物核苷酸序列为SEQIDNO.4;引物对3的上游引物核苷酸序列为SEQIDNO.5,下游引物核苷酸序列为SEQIDNO.6;引物对4的上游引物核苷酸序列为SEQIDNO.7,下游引物核苷酸序列为SEQIDNO.8。3.如权利要求2所述的一种口蹄疫多型表位肽,其特征在于,所述口蹄疫多型表位肽的构建方法具体包括以下步骤:(1)以所述S层蛋白(T-8)核酸为模板,通过所述引物对1进行PCR扩增得到扩增产物1;利用引物对2进行PCR扩增得到扩增产物2;将所述扩增产物1和所述扩增产物2的混合物作为模板,利用所述引物对1的上游引物和所述引物对2的下游引物作为新引物对进行...

【专利技术属性】
技术研发人员:格日勒图吴咪黄天鹏朝木丽格王云冲
申请(专利权)人:内蒙古农业大学
类型:发明
国别省市:内蒙古,15

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