一种免疫抑制药物及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种免疫抑制药物及其制备方法。所述免疫抑制药物包含胰腺基质细胞诱导的具有免疫负向调节作用的树突状细胞。本发明专利技术还提供一种制备所述免疫抑制药物的方法，包括1)由哺乳动物血液获取单个核细胞，并将其诱导为成熟树突状细胞；2)胰腺基质细胞与树突状细胞共培养，诱导调节性树突状细胞；3)收集发挥免疫负向调节作用的调节性树突状细胞。本发明专利技术提供的免疫抑制药物具有良好的免疫抑制作用，可用于治疗类风湿性关节炎和I型糖尿病，并具有良好的使用安全性。

【技术实现步骤摘要】
一种免疫抑制药物及其制备方法
本专利技术涉及一种免疫调节药物及其制备方法，尤其涉及一种免疫抑制药物及其制备方法。
技术介绍
树突状细胞是免疫应答的中心环节。外来抗原进入机体后，树突状细胞能够对其进行识别、加工、处理，并递呈给CD4T细胞和CD8T细胞，激发后者的免疫应答。2004年报道了一群具有免疫负向调节能力的树突状细胞亚群(1)。该亚群低表达MHC-II类分子，低表达CD40、CD80、CD86等共刺激分子；与CD4T细胞、CD8T细胞共培养能够显著抑制matureDC对T细胞的扩增能力，发挥免疫负向调节效应，因此被命名为调节性树突状细胞。进一步研究发现，调节性树突状细胞可通过分泌NO发挥免疫抑制效应。免疫过激性疾病是由于免疫系统过度活化，导致对携带自身抗原的自身组织细胞进行攻击和破坏而引发的疾病，包括类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、糖尿病等。目前对于免疫过激性疾病的治疗方法多为激素治疗，并开始有IL-6抗体、间充质干细胞等免疫治疗方法的应用，但尚无应用调节性树突状细胞治疗免疫过激性疾病的专利。本专利技术将提出一种应用调节性树突状细胞治疗类风湿性关节炎和糖尿病的应用场景。
技术实现思路
本专利技术提供一种免疫抑制药物，包含胰腺基质细胞诱导的具有免疫负向调节作用的树突状细胞。所述免疫抑制药物具有良好的免疫抑制作用，并具有良好的使用安全性。本专利技术还提供了所述的免疫抑制药物在制备用于治疗类风湿性关节炎和I型糖尿病的药物中的应用。本专利技术还提供了一种治疗类风湿性关节炎和I型糖尿病用的组合物，包含所述的免疫抑制药物作为有效成分。在本专利技术的方案中，胰腺基质细胞诱导的具有免疫负向调节作用的树突状细胞(表示为DCreg细胞)表面上表达显著低于成熟树突状细胞(表示为mDC)的MHC-II类分子、CD40、CD80和CD86。在本专利技术的一个方案中，出于增加调节性树突状细胞总数量(避免分选操作造成大量调节性树突状细胞丢失)从而延长回输后血中调节性树突状半衰期的考虑，本专利技术的所述免疫抑制药物允许包含一定比例的非调节性树突状细胞。具体的，在本专利技术的方案中，所述免疫抑制药物中所包含的胰腺基质细胞诱导的具有免疫负向调节作用的树突状细胞占总树突状细胞的比例为50％以上，优选60％以上，更优选70％以上，最优选80％以上。更进一步的，所述免疫抑制药物中所包含的胰腺基质细胞诱导的具有免疫负向调节作用的树突状细胞占总树突状细胞的比例为100％。在本专利技术的方案中，所述调节性树突状细胞源自哺乳动物。所述哺乳动物可以是健康动物和患病动物。进一步的，所述哺乳动物为健康动物。更进一步的，所述哺乳动物可以是牛科动物、马科动物、猫科动物、犬科动物、兔科动物、猪科动物、骆驼科动物、啮齿类动物和灵长类动物中的一种或多种。更进一步的，所述哺乳动物可以是牛、马、犬、山羊、绵羊、猫、兔、猪、骆驼、羊驼、大鼠、小鼠、豚鼠、非人灵长类动物(诸如猿、猴、狒狒、猩猩)和人中的一种或多种。本专利技术所述哺乳动物也可以是常见的宠物。进一步，所述宠物包括猫、龙猫、仓鼠、小白鼠、沙鼠、金花鼠、八齿鼠、松鼠、鼯鼠、大花鼠，兔、貂、刺猬、豚鼠、猪、狗和猴中的一种或多种。本专利技术提供的免疫抑制药物可以是任何适于临床应用的剂型和用药规格，例如，可以是注射剂。所述免疫抑制药物的制备方法还包括按照常规的药物制备方法制成所需要的剂型，例如制成注射剂，可以是通过加入生理盐水制成注射针剂等。本专利技术提供的免疫抑制药物可以通过腹腔或皮下注射给药，缓解类风湿性关节炎或I型糖尿病的症状。如果用于50kg体重人体临床应用，所述免疫抑制药物每次注射量在1×106～1×108个细胞，优选1～10×107个细胞，所述细胞为调节性树突状细胞。本专利技术还提供了所述的免疫抑制药物在制备用于治疗类风湿性关节炎和I型糖尿病的药物中的应用。本专利技术还提供了一种治疗类风湿性关节炎和I型糖尿病的药物组合物，包含所述的免疫抑制药物作为有效成分。本专利技术的治疗类风湿性关节炎和I型糖尿病的药物组合物包含本专利技术的免疫抑制药物作为主要活性成分。进一步的，所述治疗类风湿性关节炎和I型糖尿病的药物组合物中还可以含有治疗用途的生物分子(例如，蛋白质、核酸、抗体等)和/或化学药物(例如，化学合成药物)。更进一步的，所述生物分子和/或化学药物的治疗用途与所述免疫抑制药物的治疗用途相同，例如，均用于治疗类风湿性关节炎和I型糖尿病。更进一步的，所述生物分子和/或化学药物的治疗用途与所述免疫抑制药物的治疗用途也可以不同，例如，所述生物分子和/或化学药物可以发挥拮抗类风湿性关节炎或I型糖尿病的并发症或合并症(例如，发热、寒战、焦虑；腹水、恶心、呕吐、腹胀、腹泻、梗阻、心力衰竭、心律失常、干咳、咳嗽、呼吸困难、少尿、多尿、蛋白尿、血尿、疼痛、皮肤过敏、皮肤红斑、皮肤瘙痒等等)的作用。当本专利技术所述的组合物为包含所述免疫抑制药物和治疗用生物分子和/或化学药物的组合形式(所述组合形式可以是混合物的形式，也可以是分开独立包装的形式，在本专利技术中不受任何限制)时，则按重量计本专利技术的所述免疫抑制药物占本专利技术的治疗用组合物中的主要活性成分(即，细胞以及生物分子和/或化学药物的总量)的30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或95％以上，甚至100％，优选50％以上，更优选60％以上，最优选70％以上。在一个优选实施方案中，本专利技术的所述组合物还可以包含药学上可接受或生理学可接受的药用辅料、载体、稳定剂、稀释剂、赋形剂、缓冲液、等渗剂和/或添加剂等。在进一步优选的实施方案中，本专利技术的所述组合物还可以包含常规用于免疫细胞低温保存的抗冻液(例如，ZENOAQ公司CELLBANKER系列细胞冻存液)，从而可以进行深低温(-80℃以下，例如，在液氮中)保存。本专利技术还提供了一种制备免疫抑制药物的方法，包括1)由哺乳动物血液获取单个核细胞，并将其诱导为成熟树突状细胞；2)胰腺基质细胞与成熟树突状细胞共培养，诱导调节性树突状细胞；3)收集发挥免疫负向调节作用的调节性树突状细胞。在本专利技术的制备方法中，采集哺乳动物血液(例如外周血)分离单个核细胞，例如，可以采用体外循环的方法或设备(例如，可以使用人单个核细胞分离机，循环3000～6000mL外周血)。采集哺乳动物骨髓分离骨髓造血前体细胞的方法也不受特别的限制，可以采用本领域中公知的方法。在本专利技术的制备方法中所采用的树突状细胞和胰腺基质细胞的培养技术是本领域中所熟知的，可以采用本领域中常用的方法或设备来完成，在本专利技术中不受任何限制。只要是能够培养和诱导树突状细胞定向分化以及胰腺基质细胞培养的技术均可以在本专利技术中使用。例如，对小鼠树突状细胞的培养多采用取骨髓造血前体细胞后体外培养的方法；而获取人树突状细胞多采用外周血单个核细胞贴壁后取贴壁细胞体外培养的方法。上述方法在许多科学文献中均能找到，或按照相关试剂生产厂商的说明书或者推荐实验流程实施。本领域技术人员完全有能力获得这些具体实施方式或实验流程。上述体外培养过程中，本专利技术的调节性树突状细胞的培养条件不受特别的限制。对于培养基，可以采用常规用于淋巴细胞培养的培养基，如RPMI-1640培养基。对于培养条件，可以采用本领域中淋巴细胞培养的常用条件，例如温度37℃、CO2浓度5v/v％，每3～5天更本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种免疫抑制药物，其特征在于，包含胰腺基质细胞诱导的具有免疫负向调节作用的树突状细胞。

【技术特征摘要】
1.一种免疫抑制药物，其特征在于，包含胰腺基质细胞诱导的具有免疫负向调节作用的树突状细胞。2.根据权利要求1所述的免疫抑制药物，其特征在于，所述免疫抑制药物中所包含的胰腺基质细胞诱导的具有免疫负向调节作用的树突状细胞占总树突状细胞的比例为50％以上，优选60％以上，更优选70％以上，最优选80％以上。3.根据权利要求2所述的免疫抑制药物，其特征在于，所述免疫抑制药物中所包含的胰腺基质细胞诱导的具有免疫负向调节作用的树突状细胞占总树突状细胞的比例为100％。4.根据权利要求1-3中任一项所述的免疫抑制药物，其特征在于，其中所述树突状细胞源自哺乳动物。5.权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：李政媛，王超，
申请(专利权)人：北京中台恒基生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11