一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，包括如下步骤：配制培养基1和培养基2；取马铃薯叶芽，水洗，用乙醇水溶液浸泡,取出，再用次氯酸钠溶液浸泡,取出，用无菌水冲洗，吹干；将叶芽均匀放在培养基1上，光照，培养得到不规则形愈伤，更换培养基1培养，叶片产生细丝状根，用手术刀切割叶片，平铺于培养基1内，光照，培养，再转入培养基2，光照，培养，获得大量马铃薯幼苗。本发明专利技术的方法育苗时间短，减少了多次更换培养基的过程，含有50ml培养基的300ml容积培养瓶能够获得60‑80株马铃薯幼苗能够快速获得大量幼苗。

【技术实现步骤摘要】
一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法
本专利技术属于分子生物学和农业
，具体涉及一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法。
技术介绍
马铃薯属茄科茄属，一年生草本植物，产量大营养成分高。在中国是五大主食之一，在全球为第三大重要粮食作物，因此马铃薯的快速育苗技术至关重要。现有的育苗技术主要有种子育苗和种薯育苗，但两种方式都存在对温度敏感、育苗周期长的问题，无法实现快速高效的培育幼苗。因此专利技术一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，对马铃薯快速育苗十分重要。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法。本专利技术的技术方案概述如下：一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，包括如下步骤：(1)将4.75gMS培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1L，混匀，灭菌，降温至50℃，加入1mg萘乙酸和1mg6-苄氨基腺嘌呤，得到培养基1；将4.75gMS培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1L，混匀，灭菌，降温至50℃，加入0.5mg萘乙酸和0.25mg6-苄氨基腺嘌呤，得到培养基2；(2)取马铃薯叶芽，用蒸馏水冲洗3-4次，在无菌台内用体积浓度为75％乙醇水溶液浸泡30-35s,取出，再用蒸馏水稀释1倍的次氯酸钠溶液浸泡8-15min,取出，用无菌水冲洗2-3次，于无菌台内吹干；(3)将步骤(2)获得的叶芽均匀摆入装有培养基1的培养瓶内，光照，23-27℃培养得到不规则形愈伤，更换培养基1培养17-26天，叶片产生细丝状根，用手术刀切割叶片成1cm×1cm范围内，平铺于培养基1内，光照，23-27℃培养12-18天，再转入培养基2，光照，23-27℃培养，获得马铃薯幼苗。本专利技术的优点：本专利技术的方法育苗时间短，减少了多次更换培养基的过程，(含有50ml培养基的300ml容积培养瓶能够获得60-80株马铃薯幼苗)能够快速获得大量幼苗。具体实施方式次氯酸钠溶液市售，以有效氯计10％。各实施例的MS培养基是不含蔗糖的。下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例1一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，包括如下步骤：(1)将4.75gMS培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1L，混匀，灭菌，降温至50℃，加入1mg萘乙酸和1mg6-苄氨基腺嘌呤，得到培养基1；将4.75gMS培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1L，混匀，灭菌，降温至50℃，加入0.5mg萘乙酸和0.25mg6-苄氨基腺嘌呤，得到培养基2；(2)取马铃薯叶芽，用蒸馏水冲洗4次，在无菌台内用体积浓度为75％乙醇水溶液浸泡33s,取出，再用蒸馏水稀释1倍的次氯酸钠溶液浸泡10min,取出，用无菌水冲洗3次，于无菌台内吹干；(3)将步骤(2)获得的叶芽均匀摆入装有培养基1的培养瓶内，光照，25℃培养得到不规则形愈伤，更换培养基1培养20天，叶片产生细丝状根，用手术刀切割叶片成1cm×1cm范围内，取4片平铺于培养基1内，光照，25℃培养15天，再转入培养基2(50ml培养基2是装在300ml容积的培养瓶内)，光照，25℃培养(12天)，获得(79株)大量马铃薯幼苗。实施例2一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，包括如下步骤：(1)同实施例1步骤(1)；(2)取马铃薯叶芽，用蒸馏水冲洗3次，在无菌台内用体积浓度为75％乙醇水溶液浸泡30s,取出，再用蒸馏水稀释1倍的次氯酸钠溶液浸泡8min,取出，用无菌水冲洗2次，于无菌台内吹干；(3)将步骤(2)获得的叶芽均匀摆入装有培养基1的培养瓶内，光照，23℃培养得到不规则形愈伤，更换培养基1培养26天，叶片产生细丝状根，用手术刀切割叶片成1cm×1cm范围内，取4片平铺于培养基1内，光照，23℃培养18天，再转入培养基2(50ml培养基2是装在300ml容积的培养瓶内)，光照，23℃培养(18天)，获得(68株)大量马铃薯幼苗。实施例3一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，包括如下步骤：(1)同实施例1步骤(1)；(2)取马铃薯叶芽，用蒸馏水冲洗4次，在无菌台内用体积浓度为75％乙醇水溶液浸泡35s,取出，再用蒸馏水稀释1倍的次氯酸钠溶液浸泡15min,取出，用无菌水冲洗3次，于无菌台内吹干；(3)将步骤(2)获得的叶芽均匀摆入装有培养基1的培养瓶内，光照，27℃培养得到不规则形愈伤，更换培养基1培养17天，叶片产生细丝状根，用手术刀切割叶片成1cm×1cm范围内，取4片平铺于培养基1内，光照，27℃培养12天，再转入培养基2(50ml培养基2是装在300ml容积的培养瓶内)，光照，27℃培养(12天)，获得大量(74株)马铃薯幼苗。以上内容为本专利技术创造的进一步具体说明，并不用以限制本专利技术创造，凡在本专利技术创造的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术创造的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，其特征是包括如下步骤：(1)将4.75gMS培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1L，混匀，灭菌，降温至50℃，加入1mg萘乙酸和1mg6‑苄氨基腺嘌呤，得到培养基1；将4.75gMS培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1L，混匀，灭菌，降温至50℃，加入0.5mg萘乙酸和0.25mg6‑苄氨基腺嘌呤，得到培养基2；(2)取马铃薯叶芽，用蒸馏水冲洗3‑4次，在无菌台内用体积浓度为75％乙醇水溶液浸泡30‑35s,取出，再用蒸馏水稀释1倍的次氯酸钠溶液浸泡8‑15min,取出，用无菌水冲洗2‑3次，于无菌台内吹干；(3)将步骤(2)获得的叶芽均匀摆入装有培养基1的培养瓶内，光照，23‑27℃培养得到不规则形愈伤，更换培养基1培养17‑26天，叶片产生细丝状根，用手术刀切割叶片成1cm×1cm范围内，平铺于培养基1内，光照，23‑27℃培养12‑18天，再转入培养基2，光照，23‑27℃培养，获得大量马铃薯幼苗。

【技术特征摘要】
1.一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，其特征是包括如下步骤：(1)将4.75gMS培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1L，混匀，灭菌，降温至50℃，加入1mg萘乙酸和1mg6-苄氨基腺嘌呤，得到培养基1；将4.75gMS培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1L，混匀，灭菌，降温至50℃，加入0.5mg萘乙酸和0.25mg6-苄氨基腺嘌呤，得到培养基2；(2)取马铃薯叶芽，用蒸馏水冲洗3-4次，在无菌台内用体积浓度为75...

【专利技术属性】
技术研发人员：季静，樊亚君，王罡，王昱蓉，杨丹，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津,12