一种猕猴桃微嫁接方法以及猕猴桃育苗方法技术

本发明专利技术公开了一种猕猴桃微嫁接方法以及猕猴桃育苗方法，属于植物嫁接技术领域。本发明专利技术以‘红阳’、‘米良1号’猕猴桃两个猕猴桃品种为嫁接对象，建立了两种猕猴桃适合试管内嫁接的快繁体系，通过对用于嫁接的外植体、初代培养基、继代培养基、生根培养基、嫁接方法以及嫁接培养基等方面的系统研究，确定了以‘米良1号’猕猴桃组培苗幼苗作为砧木，以‘红阳’猕猴桃做接穗的试管内快繁嫁接体系，明确了利于提高诱导率、组织增殖、生根数量以及嫁接苗成活率等方面的各个参数，缩短了繁殖时间，延续了两个猕猴桃品种的优良性状，同时由于对嫁接环境参数的控制，嫁接苗成活率大大提高，提高了现有猕猴桃生产体系效率。

【技术实现步骤摘要】
一种猕猴桃微嫁接方法以及猕猴桃育苗方法
本专利技术涉及植物嫁接
，具体涉及一种猕猴桃微嫁接方法以及猕猴桃育苗方法。
技术介绍
猕猴桃是猕猴桃科猕猴桃属多年生落叶藤本果树，别名茅梨、奇异果、阳桃等，拥有非常突出的营养功能，VC的含量更是十分丰富。原产我国，主产亚洲，在我国主要分布于暖温带和亚热带的山区，长江流域及其以南为主产区，其中陕、川、豫、鄂、黔等地均有分布。世界现总猕猴桃品种有66种，中国就有62种，1978年的第一次猕猴桃科研协作会议后，我国猕猴桃产业发展迅速。现今我国猕猴桃生产总面积占世界的53％，达到11万公顷，产量占比达38％，为猕猴桃良种选育提供了充足的材料，但综合品质适宜于栽培生产继而商品化的品种数量不多。主要接穗品种有海沃德、徐香、金艳、红阳等，主要授粉品种有秦雄401(美味猕猴桃)、陶木里(美味猕猴桃)、磨山4号(中华猕猴桃)、岳-3(中华猕猴桃)等。由于猕猴桃雌雄异株，后代性状分离，不利于优良性状的保持。近年来，猕猴桃市场需求量不断加大，传统的实生苗繁殖方式时间长、性状不稳定、成活率低，不足以满足市场要求。而且，猕猴桃产业大多还保持在利用种子获得实生苗、利用田间嫁接进行无性繁殖保持优良品种的方式上。此外，种子实生繁殖获得砧木苗生长周期长，无法确保保持母本优良性状，所以优化猕猴桃快繁体系，使之真正能做到快速育苗、工厂化育苗很有必要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种猕猴桃微嫁接方法以及猕猴桃育苗方法，以解决现有猕猴桃培育繁殖时间长、性状不稳定、成活率低的问题。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种猕猴桃微嫁接方法，包括：(1)获取组培苗:(11)于4月取‘米良1号’猕猴桃当年生新稍茎段1.5-2.5cm，于3月取‘红阳’猕猴桃当年生新稍茎段1-1.5cm，然后分别进行灭菌处理；(12)将‘米良1号’猕猴桃茎段于MS+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+0.5mg/L2,4-D的初代培养基中进行培养，将‘红阳’猕猴桃茎段于MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA的初代培养基中进行培养，诱导愈伤组织产生进而分化出幼芽；(13)将经过初代培养的‘米良1号’猕猴桃茎段于MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.5mg/LGA3的继代培养基中进行培养增殖，将经过初代培养的‘红阳’猕猴桃茎段于MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.1mg/LGA3的继代培养基中进行培养增殖；(14)将经过继代培养的‘米良1号’猕猴桃茎段于1/2MS+0.7mg/LIBA+0.1wt％活性炭的生根培养基中诱导生根，将经过继代培养的‘红阳’猕猴桃茎段于1/2MS+0.7mg/LIBA+0.5wt％活性炭的生根培养基中诱导生根，分别得到‘米良1号’猕猴桃组培苗和‘红阳’猕猴桃组培苗；(2)嫁接、培育：(21)选择建壮的‘米良1号’猕猴桃组培苗，切除生长不完全的顶部、基部以及叶片，保留中段1.8-2.2cm作为砧木；选择健壮的‘红阳’猕猴桃组培苗，切除基部和叶片，保留顶端0.8-1.2cm作为接穗，保持底端切口呈楔形斜面，斜面长度为0.4-0.6cm；(22)采用劈接法，将已经切割好的‘米良1号’砧木，从顶端向下劈切0.5-1.0cm，保持切口长度大于接穗的楔形切口长度，并且保持砧木和接穗的切口均平滑整齐；然后，将接穗插入砧木切口，保持切口严密接触，迅速用锡箔纸包裹切口，将砧木与接穗结合，获得嫁接苗；(23)将嫁接苗竖直插于1/2MS+1.0mg/LIBA+0.5mg/LGA3+40wt％蔗糖的嫁接培养基中培育，嫁接培养基的pH为5.8-6.2，然后用双层薄膜或塑料瓶盖将试管或组培瓶密封，置于20-30℃、光照1500-2000Lx、光照时间12-14h/d下培养40天。本专利技术以‘红阳’、‘米良1号’猕猴桃两个猕猴桃品种为嫁接对象，建立了两种猕猴桃适合试管内嫁接的快繁体系，通过对用于嫁接的外植体、初代培养基、继代培养基、生根培养基、嫁接方法以及嫁接培养基等方面的系统研究，确定了以‘米良1号’猕猴桃组培苗幼苗作为砧木，以‘红阳’猕猴桃做接穗的试管内快繁嫁接体系，明确了利于提高诱导率、组织增殖、生根数量以及嫁接苗成活率等方面的各个参数，缩短了繁殖时间，延续了‘红阳’和‘米良1号’猕猴桃两个猕猴桃品种的优良性状，同时由于对嫁接环境参数的控制，嫁接苗成活率大大提高，从而大大提高了现有猕猴桃生产体系效率。进一步地，在本专利技术较佳的实施例中，步骤(11)中，‘米良1号’猕猴桃茎段和‘红阳’猕猴桃茎段的灭菌方法为：采用70-80v％酒精溶液处理15-25s后，用0.05-0.15v％升汞溶液处理4-6min。进一步地，在本专利技术较佳的实施例中，采用75v％酒精溶液处理20s后，用0.1v％升汞溶液处理5min。进一步地，在本专利技术较佳的实施例中，步骤(22)中：嫁接培养基的pH为6。一种猕猴桃育苗方法，包括：根据上述的猕猴桃微嫁接方法获得猕猴桃嫁接苗；在炼苗移栽2周前，将装有嫁接苗的试管或组培瓶从组培室中取出，于室温下进行初步炼苗；然后在炼苗移栽1周前，先松开试管或组培瓶的双层薄膜或塑料瓶盖，1-2天后，再将试管管口或组培瓶瓶口部分敞开，然后在3-5天内将试管管口或组培瓶瓶口逐渐敞开直至全部敞开；炼苗完成后，用流水将嫁接苗根部洗净，然后移栽至土壤中培养；其中，土壤包括质量比为1:2:1的珍珠岩、泥炭土和蛭石。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术以中华猕猴桃‘红阳’、美味猕猴桃‘米良1号’两个猕猴桃品种猕猴桃当年生枝条为材料，探索建立两种猕猴桃适合试管内嫁接的快繁体系，同时以‘米良1号’猕猴桃组培苗幼苗作为砧木，以‘红阳’猕猴桃做接穗进行试管内嫁接体系的建立，摸索砧木和接穗的最适合的取材部位和嫁接方法。通过本专利技术的试管内嫁接技术，大大提高了现有猕猴桃生产体系效率，在一定程度上实现猕猴桃嫁接苗病毒脱除，减少田间嫁接带来的病害。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。实施例1：本实施例的猕猴桃微嫁接方法，包括：(1)获取组培苗:(11)于4月取‘米良1号’猕猴桃当年生新稍茎段1.5cm，于3月取‘红阳’‘红阳’猕猴桃当年生新稍茎段1cm，然后分别进行灭菌处理；灭菌方法为：采用70v％酒精溶液处理25s后，用0.05v％升汞溶液处理6min；(12)将‘米良1号’猕猴桃茎段于MS+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+0.5mg/L2,4-D的初代培养基中进行培养，将‘红阳’猕猴桃茎段于MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA的初代培养基中进行培养，诱导愈伤组织产生进而分化出幼芽；(13)将经过初代培养的‘米良1号’猕猴桃茎段于MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.5mg/LGA3的继代培养基中进行培养增殖，将经过初代培养的‘红阳’猕猴桃茎段于MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.1mg/LGA3的继代培养基中进行培养增殖；(14)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种猕猴桃微嫁接方法，其特征在于，包括：(1)获取组培苗:(11)于4月取‘米良1号’猕猴桃当年生新稍茎段1.5‑2.5cm，于3月取‘红阳’猕猴桃当年生新稍茎段1‑1.5cm，然后分别进行灭菌处理；(12)将‘米良1号’猕猴桃茎段于MS+0.5mg/L 6‑BA+0.5mg/L NAA+0.5mg/L 2,4‑D的初代培养基中进行培养，将‘红阳’猕猴桃茎段于MS+1.0mg/L 6‑BA+0.1mg/L NAA的初代培养基中进行培养，诱导愈伤组织产生进而分化出幼芽；(13)将经过初代培养的‘米良1号’猕猴桃茎段于MS+2.0mg/L 6‑BA+0.1mg/L NAA+0.5mg/L GA3的继代培养基中进行培养增殖，将经过初代培养的‘红阳’猕猴桃茎段于MS+2.0mg/L 6‑BA+0.1mg/L NAA+0.1mg/L GA3的继代培养基中进行培养增殖；(14)将经过继代培养的‘米良1号’猕猴桃茎段于1/2MS+0.7mg/L IBA+0.1wt％活性炭的生根培养基中诱导生根，将经过继代培养的‘红阳’猕猴桃茎段于1/2MS+0.7mg/L IBA+0.5wt％活性炭的生根培养基中诱导生根，分别得到‘米良1号’猕猴桃组培苗和‘红阳’猕猴桃组培苗；(2)嫁接、培育：(21)选择建壮的‘米良1号’猕猴桃组培苗，切除生长不完全的顶部、基部以及叶片，保留中段1.8‑2.2cm作为砧木；选择健壮的‘红阳’猕猴桃组培苗，切除基部和叶片，保留顶端0.8‑1.2cm作为接穗，保持底端切口呈楔形斜面，斜面长度为0.4‑0.6cm；(22)采用劈接法，将已经切割好的‘米良1号’砧木，从顶端向下劈切0.5‑1.0cm，保持切口长度大于接穗的楔形切口长度，并且保持砧木和接穗的切口均平滑整齐；然后，将接穗插入砧木切口，保持切口严密接触，迅速用锡箔纸包裹切口，将砧木与接穗结合，获得嫁接苗；(23)将嫁接苗竖直插于1/2MS+1.0mg/L IBA+0.5mg/L GA3+40wt％蔗糖的嫁接培养基中培育，嫁接培养基的pH为5.8‑6.2，然后用双层薄膜或塑料瓶盖将试管或组培瓶密封，置于20‑30℃、光照1500‑2000Lx、光照时间12‑14h/d下培养40天。...

【技术特征摘要】
1.一种猕猴桃微嫁接方法，其特征在于，包括：(1)获取组培苗:(11)于4月取‘米良1号’猕猴桃当年生新稍茎段1.5-2.5cm，于3月取‘红阳’猕猴桃当年生新稍茎段1-1.5cm，然后分别进行灭菌处理；(12)将‘米良1号’猕猴桃茎段于MS+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+0.5mg/L2,4-D的初代培养基中进行培养，将‘红阳’猕猴桃茎段于MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA的初代培养基中进行培养，诱导愈伤组织产生进而分化出幼芽；(13)将经过初代培养的‘米良1号’猕猴桃茎段于MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.5mg/LGA3的继代培养基中进行培养增殖，将经过初代培养的‘红阳’猕猴桃茎段于MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.1mg/LGA3的继代培养基中进行培养增殖；(14)将经过继代培养的‘米良1号’猕猴桃茎段于1/2MS+0.7mg/LIBA+0.1wt％活性炭的生根培养基中诱导生根，将经过继代培养的‘红阳’猕猴桃茎段于1/2MS+0.7mg/LIBA+0.5wt％活性炭的生根培养基中诱导生根，分别得到‘米良1号’猕猴桃组培苗和‘红阳’猕猴桃组培苗；(2)嫁接、培育：(21)选择建壮的‘米良1号’猕猴桃组培苗，切除生长不完全的顶部、基部以及叶片，保留中段1.8-2.2cm作为砧木；选择健壮的‘红阳’猕猴桃组培苗，切除基部和叶片，保留顶端0.8-1.2cm作为接穗，保持底端切口呈楔形斜面，斜面长度为0.4-0.6cm；(22)采用劈接法，将已经切割好的‘米良1号’砧木，从顶端向...

【专利技术属性】
技术研发人员：张勇，孔令灵，汤浩茹，陈清，罗娅，孙勃，王小蓉，张皓月，程丽娟，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：四川,51