一种Tau蛋白检测试剂条及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种Tau蛋白检测试剂条及其应用，所述试剂条(1)包括从上到下依次设置的储液腔层、流道层和反应腔层；所述储液腔层设置有至少一个储液腔(4)；所述反应腔层设置有至少一个反应腔(2)；所述流道层设置有微流通道(8)，用于连通储液腔(4)和反应腔(2)。本发明专利技术的试剂条基于微流控技术，将检测试剂集成一体化，避免了试剂污染，降低了运输成本，所述试剂条装载于检测仪器上，实现了自动化分子检测，消除了开放体系可能存在的污染和人为操作引起的实验误差，在Tau蛋白早期检测中具有重要应用。

【技术实现步骤摘要】
一种Tau蛋白检测试剂条及其应用
本专利技术属于蛋白检测领域，涉及一种Tau蛋白检测试剂条及其应用，尤其涉及一种基于磁微粒和化学发光技术的Tau蛋白检测试剂条及其应用。
技术介绍
据统计，全球有近3000万阿尔兹海默症(Alzheimerdisease，AD)患者。阿尔兹海默症对老年人的危害及其严重，确诊后平均生存期仅10年，目前仍属于医学界无法治愈的恶性老年精神疾病。对于60岁以上的人群，随着年龄的增长，阿尔兹海默症的发病率急剧升高。在中国，65岁以上人群的阿尔兹海默症发病率为7％，85岁以上人群的发病率为25％，而95岁以上人群的发病率则高达60％。早期阿尔兹海默症无明显症状，难以诊断，极易被误诊。阿尔兹海默症研究协会认为，阿尔兹海默症的病变进展缓慢，早期诊断、早期干预能够显著延缓病变的发生，对于降低发病率至关重要，有利于维持患者的正常生活。同时，早期诊断有助于区分阿尔兹海默症患者和阿尔兹海默症疑似病患者，提高诊断准确性。Tau蛋白是存在于正常脑组织中的磷酸蛋白，是微管相关蛋白的一种。微管系统在细胞间物质运输和信号传递中发挥重要的作用。研究发现，在阿尔兹海默症发病早期，患者脑组织中的Tau蛋白通常会发生异常磷酸化并堆积，Tau蛋白总量明显增多。过度磷酸化的Tau蛋白极大地干扰了微管系统的正常运行，使正常轴突转运受损，引起突触丢失和神经元损伤，导致脑神经退行性病变。因此，检测Tau蛋白的含量有助于阿尔兹海默症的早期诊断，降低患病风险。CN103487587A公开了老年痴呆症体外检测用检测板及其检测试剂盒，检测板含有多个检测区或检测槽，检测区或检测槽上含有下述任何两种或两种以上组合的生物标志物的蛋白，或其所对应的受体蛋白或特异抗体，或根据其所对应的mRNA而设计的DNA引物：Tau，Aβ，TNF-α，IL-11，IL-6，ANG-2，TRAIL-R4，IL8，IGFBP6，ICAM-1，CCL18和PDGF-BB。本专利技术可用于体外血液检测，简单、安全、成本低，多种生物标志物同时检测提高诊断准确率，尤其适合于老年痴呆症的早期筛查。然而所述检测板的制备过程繁琐，检测试剂盒的检测方法复杂且灵敏度低。因此，提供一种灵敏度高、特异性强、与自动化检测设备兼容性强的Tau蛋白检测试剂条，在阿尔兹海默症研究领域具有重要意义。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供一种Tau蛋白检测试剂条及其应用，所述试剂条基于微流控技术和磁微粒化学发光技术，特异性强、灵敏度高、准确性好，Tau蛋白检测试剂均装载于试剂条上，实现了试剂条的集成一体化，与检测分析设备相配合，实现了Tau蛋白的自动化、高灵敏、快速检测，在于阿尔兹海默症的早期诊断领域具有重要意义。为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：第一方面，本专利技术提供了一种试剂条，所述试剂条1包括从上到下依次设置的储液腔层、流道层和反应腔层；所述储液腔层设置有至少一个储液腔4；所述反应腔层设置有至少一个反应腔2；所述流道层设置有微流通道8，用于连通储液腔4和反应腔2。本专利技术的试剂条采用微流通道连通储液腔和反应腔，不仅提高了检测效率，而且减少了样品和试剂的消耗量，有利于装载于自动化检测装置上实现分子的自动化可控检测。优选地，所述试剂条1还包括至少一个封口塞3，装载于储液腔4内。本专利技术中，将封口塞置于储液腔中，不仅保证了储液腔的密封性，避免了检测试剂在存储和运输过程中被污染，而且通过封口塞与动力挤压装置相互配合，将储液腔中的检测试剂压入微流通道进入反应腔，实现了试剂条的检测功能。优选地，所述封口塞3的外表面上设置有至少一个卡扣6，所述储液腔4的内表面上设置有至少两个卡槽7，通过与卡扣6连接限定封口塞3的位置。本专利技术中，通过卡扣与卡槽的连接，限定了封口塞在储液腔内的位置，当封口塞上的卡扣与储液腔内的第一卡槽相连接，封口塞处于储液位，检测试剂未流出，当封口塞上的卡扣与储液腔内的第二卡槽相连接，封口塞处于液体释放位，封口塞挤压储液袋使储液袋破裂，检测试剂流出。优选地，所述反应腔层的长度不小于所述储液腔层的长度。本专利技术中，反应腔层相对于储液腔层凸出的部分作为加样孔加入待测样本。优选地，所述反应腔层设置有隔板9，所述隔板9的高度小于所述反应腔层的高度。本专利技术通过在反应腔层中设置隔板，将反应腔层间隔为不同的反应腔，防止了相邻试剂发生交叉污染，增加了试剂条的准确性；此外，隔板的高度小于反应腔层的高度，使得在隔板上部留有适当空间，供磁微粒在不同反应腔间移动。优选地，所述隔板9的上表面包括平面、斜面或曲面中的任意一种，优选为斜面。优选地，所述试剂条1的底面设置有定位槽5，用于将所述试剂条1固定于检测仪器上。优选地，所述储液腔4的体积为10-500μL，例如可以是10μL、50μL、100μL、150μL、200μL、250μL、300μL、350μL、400μL、450μL或500μL。优选地，所述反应腔2的体积为10-500μL，例如可以是10μL、50μL、100μL、150μL、200μL、250μL、300μL、350μL、400μL、450μL或500μL。优选地，所述试剂条1采用高分子材料注塑形成。优选地，所述高分子材料包括丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物、聚甲基丙烯酸甲酯或聚乙烯中的任意一种或至少两种的组合，优选为聚甲基丙烯酸甲酯。优选地，所述储液腔4中装有检测试剂，所述检测试剂装于密封储液袋中。优选地，所述密封储液袋采用塑料薄膜、铝箔或铝塑复合材料中的任意一种或至少两种的组合制备得到，优选为采用铝塑复合材料制备得到。本专利技术的密封储液袋采用容易撕裂的密封方式密封，在封口塞的压力作用下，储液袋破裂，实现检测试剂的释放。优选地，所述检测试剂包括Tau蛋白捕获抗体偶联磁微粒、清洗液、Tau蛋白检测抗体或反应液中的任意一种或至少两种的组合，优选为Tau蛋白捕获抗体偶联磁微粒、清洗液、Tau蛋白检测抗体和反应液的组合。优选地，所述Tau蛋白捕获抗体偶联磁微粒的粒径为0.1-10μm，例如可以是0.1μm、0.5μm、1μm、2μm、3μm、4μm、5μm、6μm、7μm、8μm、9μm或10μm。优选地，所述检测仪器包括动力挤压装置、磁微粒移动控制装置或信号检测装置中的任意一种或至少两种的组合，优选为动力挤压装置、磁微粒移动控制装置和信号检测装置的组合。本专利技术中，所述试剂条的工作过程如下：(1)将Tau蛋白捕获抗体偶联磁微粒溶液、清洗液、Tau蛋白检测抗体溶液和反应液分别装入储液袋密封，分别放置于相应的储液腔4中；(2)在试剂条1储存和运输时，将封口塞3插入储液腔4，使封口塞3上的卡扣6与储液腔4内的第一卡槽连接，封口塞3处于储液位；(3)在实验中，首先将试剂条1放入检测分析仪器中，仪器的动力挤压装置挤压封口塞3，使封口塞3上的卡扣6与储液腔内的第二卡槽连接，储液袋破裂，检测试剂通过微流通道8流入反应腔2；(4)随后向试剂条1的第一反应腔中加入待测样本，与Tau蛋白捕获抗体偶联磁微粒孵育；(5)仪器的磁微粒移动控制装置将第一反应腔内的磁微粒富集后，通过反应腔之间的隔板9上部的空间，将磁微粒转移至第二反应腔，进行磁微粒清洗；(6)采用相同步骤，将磁微粒分别转移至相邻反应腔，最后分析仪器的信号检测装置采本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种试剂条，其特征在于，所述试剂条(1)包括从上到下依次设置的储液腔层、流道层和反应腔层；所述储液腔层设置有至少一个储液腔(4)；所述反应腔层设置有至少一个反应腔(2)；所述流道层设置有微流通道(8)，用于连通储液腔(4)和反应腔(2)。

【技术特征摘要】
1.一种试剂条，其特征在于，所述试剂条(1)包括从上到下依次设置的储液腔层、流道层和反应腔层；所述储液腔层设置有至少一个储液腔(4)；所述反应腔层设置有至少一个反应腔(2)；所述流道层设置有微流通道(8)，用于连通储液腔(4)和反应腔(2)。2.根据权利要求1所述的试剂条，其特征在于，所述试剂条(1)还包括至少一个封口塞(3)，装载于储液腔(4)内；优选地，所述封口塞(3)的外表面上设置有至少一个卡扣(6)，所述储液腔(4)的内表面上设置有至少两个卡槽(7)，通过与卡扣(6)连接限定封口塞(3)的位置；优选地，所述反应腔层的长度不小于所述储液腔层的长度。3.根据权利要求1或2所述的试剂条，其特征在于，所述反应腔层设置有隔板(9)，所述隔板(9)的高度小于所述反应腔层的高度；优选地，所述隔板(9)的上表面包括平面、斜面或曲面中的任意一种，优选为斜面。4.根据权利要求1-3任一项所述的试剂条，其特征在于，所述试剂条(1)的底面设置有定位槽(5)，用于将所述试剂条(1)固定于检测仪器上。5.根据权利要求1-4任一项所述的试剂条，其特征在于，所述储液腔(4)的体积为10-500μL；优选地，所述反应腔(2)的体积为10-500μL。6.根据权利要求1-5任一项所述的试剂条，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：周小进，缪志刚，
申请(专利权)人：苏州仁端生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32