一种抗稻瘟病、抗螟虫转基因水稻不育系的育种方法技术

技术编号:19684530 阅读:66 留言:0更新日期:2018-12-08 09:34
一种抗稻瘟病、抗螟虫转基因水稻不育系的育种方法,该方法以携带水稻内源抗稻瘟病基因Pi‑1和Pi‑2基因的不育系E农1S为母本、具有无选择标记转抗虫基因Cry1Ab的水稻纯合株系mfb‑MH86为父本,通过先杂交、再依次进行三次回交的育种方式,结合Cry1Ab蛋白试纸条检测、分子检测、育性鉴定以及农艺性状考察,不仅筛选得到了育性起点温度低、育性稳定,聚合抗稻瘟病、抗螟虫的水稻新品种,而且保证了选择结果的高准确度和高可信度,提高了转基因抗虫水稻不育系聚合育种的工作效率。

【技术实现步骤摘要】
一种抗稻瘟病、抗螟虫转基因水稻不育系的育种方法
本专利技术属于植物育种
,具体涉及一种抗稻瘟病、抗螟虫转基因水稻不育系的育种方法。
技术介绍
水稻是我国第一大粮食作物,水稻的年播种面积在3000万公顷左右,总收获量约占我国粮食总产量的40%,水稻生产是保证国家粮食安全的砥柱。目前应用于生产的水稻品种抗病虫能力较差,易受到病虫害的危害而导致水稻的减产和品质表现的不稳定,因此,选育同时具有抗病、抗虫能力的水稻品种是提高水稻抗病、抗虫及产量的综合能力的重要措施。基因聚合是指将分散在不同品种中的目标基因聚合到一个品种中,通过这种方法,就可能在较短的时间内培育出集高产、优质、多抗于一体的优良水稻杂交稻亲本或品种。基因聚合可以增加水稻抗病虫能力的持久性,也可以将不同的抗病虫基因聚合到一个作物品种中,当前水稻聚合育种的主要技术手段是采用杂交回交的方法将抗病基因与抗虫基因聚合到一个种质中。长期以来,危害我国水稻的主要病虫害有稻瘟病、螟虫、褐飞虱等等。稻瘟病是水稻三大主要病害之一,可引起水稻大幅度减产,严重时减产40%-50%,甚至绝收。稻瘟病在我国各大稻区均有不同程度发生,近年来发生逐渐呈上升本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗稻瘟病、抗螟虫转基因水稻不育系的育种方法,其特征在于:所述方法依次包括以下步骤:一、先以携带水稻内源抗稻瘟病基因Pi‑1和Pi‑2的不育系E农1S为母本、具有无选择标记转抗虫基因Cry1Ab的水稻纯合株系mfb‑MH86为父本,两者杂交得到F1种子,再种植F1种子后与母本回交获得BC1F1种子;二、先种植BC1F1种子以获得BC1F1群体,然后在BC1F1群体中选择抗虫基因Cry1Ab得到表达的植株与母本回交得到BC2F1种子;三、先种植BC2F1种子以获得BC2F1群体,然后在BC2F1群体中选择抗虫基因Cry1Ab得到表达的植株与母本回交得到BC3F1种子;四、先种植BC3F1种...

【技术特征摘要】
1.一种抗稻瘟病、抗螟虫转基因水稻不育系的育种方法,其特征在于:所述方法依次包括以下步骤:一、先以携带水稻内源抗稻瘟病基因Pi-1和Pi-2的不育系E农1S为母本、具有无选择标记转抗虫基因Cry1Ab的水稻纯合株系mfb-MH86为父本,两者杂交得到F1种子,再种植F1种子后与母本回交获得BC1F1种子;二、先种植BC1F1种子以获得BC1F1群体,然后在BC1F1群体中选择抗虫基因Cry1Ab得到表达的植株与母本回交得到BC2F1种子;三、先种植BC2F1种子以获得BC2F1群体,然后在BC2F1群体中选择抗虫基因Cry1Ab得到表达的植株与母本回交得到BC3F1种子;四、先种植BC3F1种子以获得BC3F1群体,然后在BC3F1群体中选择多株分子检测结果为阳性且农艺性状优良的植株,单株收种后种植得到BC3F2株系;五、先种植BC3F2种子以获得BC3F2株系,然后在BC3F2株系中选择育性鉴定合格、抗虫基因Cry1Ab得到表达且农艺性状优良的植株多株,单株收种得到BC3F3种子;六、先种植BC3F3种子获得BC3F3株系,然后在苗期对BC3F3株系逐株进行Cry1Ab基因分子检测,并通过人工冷水池处理选择育性转换起点温度低于23.5℃、Cry1Ab基因分子检测结果为纯合的株系多株,在其中筛选出农艺性状与母本差异最小的株系,收获该株系种子继续种植得到BC3F4种子;七、先种植BC3F4种子以获得BC3F4群体,然后收获多个单株获得BC3F5种子,繁殖选中株系得到的自交种子即为培育得到的抗稻瘟病、抗螟虫的水稻新材料,此时,完成育种。2.根据权利要求1所述的一种抗稻瘟病、抗螟虫转基因水稻不育系的育种方法,其特征在于:所述步骤二、三、五中,检测抗虫基因Cry1Ab是否得到表达的方法为Cry1Ab蛋白试纸条检测。3.根据权利要求2所述的一种抗稻瘟病、抗螟虫转基因水稻不育系的育种方法,其特征在于:所述Cry1Ab蛋白试纸条检测为:先取1﹣2cm水稻苗期或成熟期叶片置于EP管中,加入无菌水研磨成匀浆,离心后静置,再取BtCry1Ab蛋白免疫层析试纸条放入EP管中,使EP管的液面不超过试纸条的检测线,5min后观察试纸条,若试纸条上control带和阳性带都出现则判断抗虫基因Cry1Ab得到表达,若试纸条上只出现control带则判断抗虫基因Cry1Ab没有得到表达。4.根据权利要求1﹣3中任一项所述的一种抗稻瘟病、抗螟虫转基因水稻不育系的育种方...

【专利技术属性】
技术研发人员:殷得所査中萍戚华雄万丙良杜雪树李进波夏明元
申请(专利权)人:湖北省农业科学院粮食作物研究所
类型:发明
国别省市:湖北,42

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