表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒灭活疫苗及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗及其制备方法与应用。该疫苗包括：重组杆状病毒rBac‑JX148HA，该重组杆状病毒能够表达H7N9禽流感病毒主要免疫抗原HA蛋白，其免疫佐剂为SEPPIC佐剂；其中所述的HA蛋白的核酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明专利技术疫苗免疫鸡后，能诱导较高的抗体滴度、提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒的完全临床保护、有效抑制排毒。该疫苗安全性高，克服了传统的鸡胚生产疫苗具有鸡胚供应不稳定、外源病毒污染、废弃物产量大等缺陷，在H7N9亚型禽流感的防控上具有较好的应用前景，且符合兽用疫苗利用悬浮细胞培养技术进行大规模生产的趋势。

Recombinant baculovirus inactivated vaccine expressing hemagglutinin protein of H7N9 subtype avian influenza virus and its preparation and Application

The invention relates to a recombinant baculovirus vaccine expressing hemagglutinin protein of H7N9 subtype avian influenza virus, a preparation method and application thereof. The vaccine includes: recombinant baculovirus rBac_JX148HA, which can express HA protein, the main immune antigen of H7N9 avian influenza virus, and its immune adjuvant is SEPPIC adjuvant. The nucleic acid sequence of the HA protein mentioned above is shown as SEQ ID NO:1. The vaccine can induce higher antibody titer, provide complete clinical protection against H7N9 subtype highly pathogenic avian influenza virus and effectively inhibit detoxification after immunizing chickens. The vaccine has high safety, overcomes the shortcomings of the traditional chicken embryo production vaccine, such as unstable supply of chicken embryo, contamination of exogenous virus and large waste production. It has good application prospects in the prevention and control of H7N9 subtype avian influenza, and conforms to the trend of large-scale production of veterinary vaccine using suspension cell culture technology.

【技术实现步骤摘要】
表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒灭活疫苗及其制备方法与应用
本专利技术涉及一种疫苗
，具体涉及一种表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗及其制备方法与应用。技术背景H7N9禽流感病毒(AvianInfluenzavirus,AIV)可感染禽类、哺乳动物与人类，是一种严重威胁养禽业与人类健康的人兽共患病原。自2013年至今，我国经历了六波H7N9流感疫情流行，并在第五波流行季的人群和禽类中检测发现H7N9变异株，其HA蛋白裂解位点插入4个碱性氨基酸“KRTA”，标志着H7N9亚型AIV出现了由低致病性向高致病性的转变。H7N9亚型高致病性AIV的出现为中国的公共卫生和养禽业带来了更大的威胁和挑战，更引发了全球对AIV的关注。家禽是H7N9病毒的来源，因此控制家禽中H7N9病毒的流行是防控H7N9疫情的关键。接种疫苗是减少流感病毒感染与控制疫情发展的最佳方法之一，而传统的鸡胚生产疫苗具有鸡胚供应不稳定、外源病毒污染、废弃物产量大等缺陷。近年来，利用MDCK细胞、Vero细胞的大规模悬浮培养技术生产的禽流感疫苗也陆续出现，但是AIV在细胞中扩增会本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒灭活疫苗，其特征在于，包括：重组杆状病毒rBac‑JX148HA，该重组杆状病毒能够表达H7N9禽流感病毒主要免疫抗原HA蛋白，其免疫佐剂为SEPPIC佐剂；其中所述的HA蛋白的核酸序列如SEQ ID NO：1所示。

【技术特征摘要】
1.一种表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒灭活疫苗，其特征在于，包括：重组杆状病毒rBac-JX148HA，该重组杆状病毒能够表达H7N9禽流感病毒主要免疫抗原HA蛋白，其免疫佐剂为SEPPIC佐剂；其中所述的HA蛋白的核酸序列如SEQIDNO：1所示。2.权利要求1所述的表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)重组杆状病毒rBac-JX148HA的制备：用RT-PCR方法扩增HA基因，所得的序列如SEQIDNO：1所示，然后将SEQIDNO：1克隆到杆状病毒转移载体pVL1393载体中，构建包含H7N9JX148株HA基因的重组转移载体，基于同源重组的原理，将重组转移载体与苜蓿银纹夜蛾多核型多角体病毒AcMNPV线性化的基因组DNA共转染至昆虫细胞Sf9，成功拯救重组杆状病毒rBac-JX148HA，重组杆状病毒经过连续...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘秀梵，胡娇，梁艳艳，胡增垒，李如梦，王晓泉，顾敏，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32