The invention relates to a primer and a method for detecting SNP loci of genes related to sulfonylurea individualized drug use. The primer can detect the rs7903146 (C/T) locus of TCF7L2 gene. The primer sequence includes wild-type upstream primer, mutant upstream primer and shared downstream primer. The invention is based on ARMS PCR. In order to widen the gap between the amplification efficiency of the 3'terminal base of the specific primer and that of the SNP site on DNA template under the condition of complementarity and non-complementarity of the base of the 3' terminal base of the DNA template, the specific primer introduced the mismatch base at the third position of the 3'terminal of the SNP sequence and shared the downstream primers, thus greatly improving the specificity of the detection. By introducing Real time PCR technology, we can interpret it according to CT value, that is Ct=mutation Ct-wild Ct. Generally, Ct>7 is wild type, Ct<7 is mutation type and 2 Ct<2 is heterozygous type. The invention has the advantages of simple operation, intuitive results, short detection time, low cost and high specificity.
【技术实现步骤摘要】
一种检测磺脲类个体化用药相关基因SNP位点的引物及方法
本专利技术属于医药
,具体涉及一种检测磺脲类个体化用药相关基因SNP位点的引物及方法。
技术介绍
糖尿病是由胰岛素缺乏或生物效应降低所致的内分泌代谢疾病,其发病率逐年上升。世界卫生组织指出,2025年全世界将出现3.8亿名糖尿病患者。2012年1月9日,中国健康教育中心公布的“中国慢性病监测及糖尿病患病率为2.6%,60岁以上老年人患病率高达19.6%,全国有成年糖尿病患者9700万人,已超越印度成为全球糖尿病人数最多的国家”,给患者的身心健康及经济造成沉重的负担。磺脲类药物不仅降糖作用强,还可减少或延缓2型糖尿病慢性并发症的发生,特别是微血管并发症,被多个国内外成人2型糖尿病防治指南推荐为一线备选或二线降糖用药,可作为二甲双胍不耐受或存在禁忌症者的起始治疗或二甲双胍治疗血糖控制不佳时的联合用药之一。研究报道,对于大多数新诊断的2型糖尿病患者,磺脲类药物可使空腹血糖下降50~80mg/dl,使HbAlc(糖化血红蛋白)下降1.0%~2.5%。但其临床应用仍然存在一些问题,如据某项研究报告,每年有5–7%服用磺脲类的患者发生继发性无效;一项大规模随机试验、ADOPT表明,单用磺脲类5年失效率(禁食血糖>180mg/dl)高达34%,而罗格列酮为15%;二甲双胍为21%;UKPDS试验表明,每年约有1%服用磺脲类的患者发生严重低血糖。因此,探讨决定其个体疗效差异的基因多态性位点,是实现糖尿病精准医学的第一步,通过基因分型检测,可以更有效的指导医生进行个体化用药治疗,提高磺脲类药物的治疗 ...
【技术保护点】
1.一种检测磺脲类个体化用药相关基因SNP位点的引物,其特征在于,其对TCF7L2基因rs7903146(C/T)位点进行检测;所述用于TCF7L2基因rs7903146(C/T)位点检测的引物序列包括:野生型上游引物、突变型上游引物及共用下游引物,具体为:SEQ ID NO.01:CAATTAGAGAGCTAAGCACTTTTTAGGTAC,SEQ ID NO.02:AGAGAGCTAAGCACTTTTTAGGTAT,SEQ ID NO.03:CAAGCTAACACTAATGAAGAGGACA。
【技术特征摘要】
1.一种检测磺脲类个体化用药相关基因SNP位点的引物,其特征在于,其对TCF7L2基因rs7903146(C/T)位点进行检测;所述用于TCF7L2基因rs7903146(C/T)位点检测的引物序列包括:野生型上游引物、突变型上游引物及共用下游引物,具体为:SEQIDNO.01:CAATTAGAGAGCTAAGCACTTTTTAGGTAC,SEQIDNO.02:AGAGAGCTAAGCACTTTTTAGGTAT,SEQIDNO.03:CAAGCTAACACTAATGAAGAGGACA。2.一种检测磺脲类个体化用药相关基因SNP位点的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)临床样本DNA提取:按照天根血液基因组DNA提取试剂盒说明书进行提取,将所得的DNA样品用紫外分光光度计进行定量,并将其稀释到40ng/μL,用于后续实验;(2)ARMS-qPCR法扩增临床样本DNA:设置A组(野生型引物扩增组)及B组(突变型引物扩增组),具体操作步骤如下:2.1将检测所需试剂及样本置于冰上融化并轻弹混匀,将样本及试剂加入联管,并按照体积由高到低依次加入反应孔中;2.2加样完...
【专利技术属性】
技术研发人员:李鹏,齐琳洁,冷欢,
申请(专利权)人:西安医臻生物医药科技有限公司,
类型:发明
国别省市:陕西,61
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