The invention discloses a simulated human antimicrobial peptide and its preparation method. The amino acid sequence HHFFHSFLRRTTFKSAAVKTV LLHTALRRIISS of the antimicrobial peptide is retranslated into a nucleic acid sequence according to the expression preference codon of E.coli. The nucleic acid sequence is fragmented and designed, and the antimicrobial peptide gene is obtained by the designed fragment polymerization, and the antimicrobial peptide gene is constructed. The prokaryotic expression vector of bacteriopeptide gene was transformed into E. coli to obtain the transformant. The transformant of E. coli was induced to express and purified to obtain the antimicrobial peptide. The polypeptide activity test shows that the antimicrobial peptide prepared by the invention has bacteriostatic effect on E. coli and other bacteria, has certain broad-spectrum antimicrobial characteristics, and can be applied in the preparation of antimicrobial drugs.
【技术实现步骤摘要】
一种模拟人源性抗菌肽及其制备方法
本专利技术属于生物
，涉及人源性广谱抗菌肽的筛选与功效研究及其制备方法。
技术介绍
抗菌肽是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽，分子量在2000～7000左右，由20～60个氨基酸残基组成。研究抗菌肽主要经过以下途径：(1)比较抗菌肽分子的一级和二级结构保守氨基酸；(2)利用蛋白质分析软件预测肽段的二级结构；(3)使用软件，结合互联网的数据库进行空间结构的预测和静电势的计算等；(4)根据一级保守结构确定抗菌肽的基本框架，在保守氨基酸位置逐个填入替代氨基酸，使新设计的抗菌肽达到应有的基本抗菌性质；(5)考虑增强分子的抗菌活性和分子的稳定性。抗菌肽具有的特性有：(1)多数抗菌肽具有广谱性抗菌作用；(2)对人体和其他动物、植物生理损害很小；(3)细菌不易对抗菌肽产生耐药性和生理抵制作用；(4)基因工程方法合成抗菌肽具有成本低、合成条件温和、没有序列限制等优点。利用基因工程合成抗菌肽存在以下两个问题：(1)基因片段较小时很难将其克隆到载体上。(2)表达肽链较短容易被细菌体内蛋白酶水解，且分离比较困难。故通常采用先融合表...
【技术保护点】
1.一种模拟人源性抗菌肽，其特征在于：该抗菌肽的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。
【技术特征摘要】
1.一种模拟人源性抗菌肽，其特征在于：该抗菌肽的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。2.根据权利要求1所述一种模拟人源性抗菌肽，其特征在于：所述抗菌肽的基因序列如SEQ.ID.NO.2所示。3.一种模拟人源性抗生肽的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)根据设计的抗菌肽的氨基酸序列确定该抗菌肽的基因序列，根据所述基因序列进行片段化设计，得到用于分段聚合该基因序列完整DNA结构的单链片段；所述抗菌肽的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示；2)经过步骤1)后，利用所述单链片段聚合抗菌肽的基因序列对应的DNA片段，然后将聚合得到的DNA片段接入表达载体；3)经过步骤2)后，将表达载体转化到宿主细胞中，然后诱导宿主细胞表达；4)将表达的产物分离纯化，得到具有抗菌活性的融合蛋白。4.根据权利要求3所述一种模拟人源性抗生肽的制备方法，其特征在于：所述片段化设计得到的单链片段如SEQ.ID.NO.3、SEQ.ID.NO.4、...
【专利技术属性】
技术研发人员：路凡，陈新雨，谢松涛，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61
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