一种检测抗苗勒管激素的荧光微流控芯片制造技术

本实用新型专利技术提供一种检测抗苗勒管激素的荧光微流控芯片，所述芯片包括基底、试剂层、避光层、位于避光层下方的亲水层、位于亲水层下方的微流控通道结构层、位于微流控通道结构层下方的回收层。本实用新型专利技术通过对荧光微流控芯片结构进行设计改造，增加单向清洗通道和包被室以及在标记抗体涂布处增加微柱结构，实现了对AMH抗体快速、准确、定量地对测量，有效消除反应体系中残余荧光微球对检测的影响，提高微流控芯片检测的荧光信号范围以及检测的精密度，实现抗苗勒管激素在微流体环境中的快速、准确、定量的测定。

【技术实现步骤摘要】
一种检测抗苗勒管激素的荧光微流控芯片
本技术涉及临床医学测试领域，尤其涉及一种抗苗勒管激素定量检测微流控芯片。
技术介绍
现代女性婚育龄的推迟已然成为大趋势，同时国家生育政策的放开，高龄高危产妇人口数量陡然增高，其中，不孕、不育、难孕人群比例与孕育风险不断提升。AMH的检测旨在辅助医师评估女性绝经时间和生育能力，从而达到指导女性不孕症治疗，甚至试管婴儿的特异化诊断治疗具有重大意义。激素水平的检测是临床判断卵巢储备能力的传统方法之一，包括评估女性生殖激素六项指标，即促卵泡生成素（Follicle-stimulatinghormone，FSH）、催乳激素（Prolactin，PRL）、促黄体生成激素（Luteinizinghormone，LH）、孕酮（Progesterone，P）、雌二醇（Estradiol2，E2）、睾酮（Testosterone，T）。传统最佳检测生殖激素的时间是在女性月经周期的第二至第三天进行。相较于其它指标，AMH检测不受月经周期的影响，可在一个月经周期内随时反映卵巢储备功能，而且检测结果稳定。微流控芯片技术采用微机电加工技术协同生物化学反应技术在芯片上构建微流路反应系统，将生化反应与分析的过程浓缩至相互联系贯通的路径和固化空间组成的微芯片结构上，生物样品和反应液进入系统后，经过毛细虹吸、电水力泵和电渗流等方法驱动通道中反应体系的流动、混合、反应，形成微流路，从而达到芯片上完成一种或连续多种的生化反应。激光诱导荧光、电化学和化学等多种检测系统以及与光谱分析等技术手段结合的检测手段被用在微流控芯片样本检测过程，对样品进行快速、准确和高通量分析技术水平。但常规设计的微流控芯片用于免疫荧光检测时存在检测过程背景较高、检测灵敏度以及检测准确度较差等问题。本专利技术通过对现有常规微流控设计进行改造，通过增加单向清洗通道和包被室以及在标记抗体涂布处增加微柱结构可以有效的解决上述问题，从而最终实现对目标产物快速、准确、定量地测量。
技术实现思路
为了达到对样品中抗苗勒管激素快速、准确的分析，本技术通过对微流控通道进行设计改造，增加两个单向清洗通道，可消除通道内残余荧光微球对检测的影响。设计两个包被室，提高抗原的捕获能力。从而定量检测抗苗勒管激素完成了本技术。本技术的技术方案如下：一种检测抗苗勒管激素的荧光微流控芯片，所述芯片包括基底、试剂层、避光层、位于避光层下方的亲水层、位于亲水层下方的微流控通道结构层、位于微流控通道结构层下方的回收层；所述避光层包含遮光涂层、包被室视窗、加样孔、气孔及液体进入指示试剂视窗；所述亲水层包含亲水性涂层、加样孔、气孔及液体进入指示试剂视窗；所述避光层和亲水层中的加样孔、气孔及液体进入指示试剂视窗的规格一致；所述的微流控通道结构层包括加样孔、缓冲分流区、单向清洗通道、荧光微球室、S反应通道、包被室和回收通道入口；所述荧光微球室、S反应通道和包被室一起组成样本反应区；所述的回收通道入口连接微流控通道结构层和回收层；所述回收层包含气孔、回收入口和储备废液的回收腔；所述的回收层的回收入口连接微流控通道结构层的回收通道入口。所述微流控通道结构层中，缓冲分流区为树形分支结构，避免相同位置出现分枝结构。所述微流控通道结构层中，单向清洗通道包括气孔、单向阀及通道，单向清洗通道有2个。所述单向清洗通道辅助检测，流体流向时间高于主通道反应时间，清楚主通道中残留荧光微球。所述微流控通道结构层中，荧光微球室包括微柱和标有抗体的荧光微球，微柱的直径范围为0.1μm~1μm，微柱均匀分散于标记室内，所述微柱结构为圆柱、立方体或锥形。所述标有抗体的荧光微球，可特异性标记一种或多种抗体。所述微流控通道结构层中，S反应通道宽度为5μm~20μm。所述微流控通道结构层中，包被室有2个，包被室具有微引流通道；包被室微引流通道宽度0.5μm~5μm。每个包被室包被一种或多种抗体。所述包被室透过亲水层、避光层，对外可见，包括微球标记室在内的其它结构为避光层遮挡，对外不可见。所述微流控通道结构层中，回收通道入口包括通往下方回收层的开口和液体进入指示试剂，所述指示试剂在有液体通过时会由白色变成红色。回收通道入口的液体进入指示试剂可穿过亲水层、避光层被肉眼观测或设备检测。所述的避光层中指示试剂视窗的位置尺寸与微流控通道结构层中的回收通道入口的液体进入指示试剂位置尺寸一致。所述的亲水层，是由PET材质做成，以PET材质的塑料作为支撑层，在支撑层上涂有亲水物质做成的亲水涂层，且支撑层上开有加样孔及透气孔，所述亲水层为无色透明，所述加样孔为圆形、方形或不规则形状，容积为50μL-500μL，所述透气孔直径2μm-20μm。所述的亲水层，所述亲水层支撑材料除PET，还适用：PVC、PE、PP、PS中的任意一种。所述亲水涂层的接触角为40°-60°。所述回收层的厚度范围为400~800μm，长度范围为80~800mm，宽度范围为20~200mm。所述微流控通道结构层的厚度范围为200~500μm，长度范围为80~800mm，宽度范围为20~200mm。所述亲水层的厚度范围为100~400μm，长度范围为80~800mm，宽度范围为20~200mm。所述避光的厚度范围为200~600μm，长度范围为80~800mm，宽度范围为20~200mm。从以上技术方案可以看出，本技术通过对荧光微流控芯片结构进行设计改造，增加单向清洗通道和包被室以及在标记抗体涂布处增加微柱结构，实现了对AMH抗体快速、准确、定量地对测量，有效消除反应体系中残余荧光微球对检测的影响，提高微流控芯片检测的荧光信号范围以及检测的精密度，实现抗苗勒管激素在微流体环境中的快速、准确、定量的测定。附图说明图1为本技术的检测抗苗勒管激素荧光微流控芯片的整体结构图。图2为本技术的微流控芯片避光层的结构图。图3为本技术的微流控芯片亲水层的结构图。图4为本技术的微流控芯片通道结构层的示意图。图5为本技术的微流控芯片回收层的结构图。图6为本技术的微流控芯片荧光微球标记室的示意图。图7为本技术的微流控芯片捕获抗体包被室的示意图。图8为本技术的微流控芯片单向清洗通道出口的结构图。图9为本技术的微流控芯片回收通道入口的结构图。图10a-图10b为本技术的微流控芯片单向清洗通道或S反应通道可替代结构。其中，A为避光层，A1为加样孔，A2为气孔1号，A3为包被室1号视窗，A4为气孔2号，A5为包被室2号视窗，A6为气孔3号，A7为包被室3号视窗，A8为液体进入指示试剂视窗，B为亲水层，B1为加样孔，B2为气孔1号，B3为气孔2号，B4为液体进入指示试剂视窗，C为微流控通道结构层，C1为样品池，C2为单向清洗通道1号，C3为单向清洗通道2号，C4为荧光微球室，C5为S反应通道，C6为包被室1号，C7为包被室2号，C8为包被室3号（即质控室），C9为回收通道入口，D为回收层，D1、D2、D4、D5为气孔，D3为回收入口。具体实施方式为了本
的人员能够理解本技术方案，结合本技术实施例附图，对本技术实施例中的技术方案进行完整明确地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本技术部分实施例，而不是全部的实施例本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测抗苗勒管激素的荧光微流控芯片，其特征在于，所述芯片包括基底、试剂层、避光层、位于避光层下方的亲水层、位于亲水层下方的微流控通道结构层、位于微流控通道结构层下方的回收层；所述避光层包含遮光涂层、包被室视窗、加样孔、气孔及液体进入指示试剂视窗；所述亲水层包含亲水性涂层、加样孔、气孔及液体进入指示试剂视窗；所述避光层和亲水层中的加样孔、气孔及液体进入指示试剂视窗的规格一致；所述的微流控通道结构层包括加样孔、缓冲分流区、单向清洗通道、荧光微球室、S反应通道、包被室和回收通道入口；所述荧光微球室、S反应通道和包被室一起组成样本反应区；所述的回收通道入口连接微流控通道结构层和回收层；所述回收层包含气孔、回收入口和储备废液的回收腔；所述的回收层的回收入口连接微流控通道结构层的回收通道入口。

【技术特征摘要】
1.一种检测抗苗勒管激素的荧光微流控芯片，其特征在于，所述芯片包括基底、试剂层、避光层、位于避光层下方的亲水层、位于亲水层下方的微流控通道结构层、位于微流控通道结构层下方的回收层；所述避光层包含遮光涂层、包被室视窗、加样孔、气孔及液体进入指示试剂视窗；所述亲水层包含亲水性涂层、加样孔、气孔及液体进入指示试剂视窗；所述避光层和亲水层中的加样孔、气孔及液体进入指示试剂视窗的规格一致；所述的微流控通道结构层包括加样孔、缓冲分流区、单向清洗通道、荧光微球室、S反应通道、包被室和回收通道入口；所述荧光微球室、S反应通道和包被室一起组成样本反应区；所述的回收通道入口连接微流控通道结构层和回收层；所述回收层包含气孔、回收入口和储备废液的回收腔；所述的回收层的回收入口连接微流控通道结构层的回收通道入口。2.根据权利要求1所述的检测抗苗勒管激素的荧光微流控芯片，其特征在于，所述微流控通道结构层中，缓冲分流区为树形分支结构。3.根据权利要求1所述的检测抗苗勒管激素的荧光微流控芯片，其特征在于，所述微流控通道结构层中，单向清洗通道包括气孔、单向阀及通道，单向清洗通道有2个。4.根据权利要求1所述的检测抗苗勒管激素的荧光微流控芯片，其特征在于，所述微流控通道结构层中，荧光微球室包括微柱和标有抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊晶，余占江，陈永强，朱顶峰，李妍，苏娟，郝存，
申请(专利权)人：江苏奥雅生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：江苏,32