检测白血病细胞的系统和方法技术方案

技术编号:19478326 阅读:49 留言:0更新日期:2018-11-17 09:30
本申请涉及一种检测白血病细胞的系统和方法。所述系统包括扩增模块,该扩增模块包含能够特异性扩增靶标基因的试剂,以获得靶标特异性扩增产物。所述系统能够快速、准确地评价受试者白血病细胞及其残留的水平。

【技术实现步骤摘要】
检测白血病细胞的系统和方法
本申请涉及一种用于检测白血病细胞的系统和方法。特别地,本申请的系统和方法可用于检测白血病细胞的残留,从而为患者提供更有效的预防和/或治疗手段。
技术介绍
检测癌细胞残留(MRD,MinimalResidualDisease)对评估治疗的效果和预测癌症复发有非常重要的作用。国际上,以万分之一为界,超过万分之一的癌细胞残留意味着很大的癌症复发几率。提前检测到癌细胞,意味着准确地把握病情,进行更及时的治疗,从而提高患者存活的机率。目前,检测癌细胞残留的主要手段是采取流式细胞技术,也就是进行细胞水平的检测。细胞水平检测的精度上限仅为万分之一,并且该方法容易受到细胞分化和克隆选择的影响,稳定性不佳。此外,这种方法对接受过骨髓移植的患者无效,适用范围有限。
技术实现思路
本申请提供了用于检测白血病细胞的系统和方法。一方面,本申请提供了一种用于检测受试者中白血病细胞的系统,所述系统可包括扩增模块,该扩增模块可包含能够特异性扩增靶标基因的试剂,以获得靶标特异性扩增产物。在某些实施方式中,所述白血病包括B细胞急性淋巴细胞白血病和/或T细胞急性淋巴细胞白血病。在某些实施方式中,所述靶标基因包括选自下组的一种或多种基因、其片段或其变体:IgH、IgK、T细胞受体A、T细胞受体D、T细胞受体B、T细胞受体G和Tal1。在某些实施方式中,所述白血病为B细胞急性淋巴细胞白血病,且所述靶标基因包括选自下组的一种或多种基因、其片段或其变体:IgH、IgK、T细胞受体A、T细胞受体D、T细胞受体B和T细胞受体G。在某些实施方式中,所述白血病为T细胞急性淋巴细胞白血病,且所述靶标基因包括选自下组的一种或多种基因、其片段或其变体:T细胞受体A、T细胞受体D、T细胞受体B和T细胞受体G。在某些实施方式中,所述靶标基因包括IgH基因重排,且所述能够特异性扩增靶标基因的试剂包括选自下述的一组或多组引物组合:1)正向引物:VH1/7,反向引物:JHcons;2)正向引物:VH2,反向引物:JHcons;3)正向引物:VH3,反向引物:JHcons;4)正向引物:VH4,反向引物:JHcons;5)正向引物:VH5,反向引物:JHcons;6)正向引物:VH6,反向引物:JHcons;7)正向引物:DH1、DH4、DH5及DH7,反向引物:JHcons;8)正向引物:DH2,反向引物:JHcons;9)正向引物:DH3,反向引物:JHcons;和10)正向引物:DH6,反向引物:JHcons。在某些实施方式中,所述引物JHcons包含选自下组的序列:SEQIDNO.19所示、和SEQIDNO.20所示的序列。在某些实施方式中,所述引物VH1/7包含选自下组的序列:SEQIDNO.1所示、SEQIDNO.2所示和SEQIDNO.3所示的序列。在某些实施方式中,所述引物VH2包含选自下组的序列:SEQIDNO.4所示、SEQIDNO.5所示和SEQIDNO.6所示的序列。在某些实施方式中,所述引物VH3包含选自下组的序列:SEQIDNO.7所示、SEQIDNO.8所示和SEQIDNO.9所示的序列。在某些实施方式中,所述引物VH4包含选自下组的序列:SEQIDNO.10所示、SEQIDNO.11所示和SEQIDNO.12所示的序列。在某些实施方式中,所述引物VH5包含选自下组的序列:SEQIDNO.13所示、SEQIDNO.14所示和SEQIDNO.15所示的序列。在某些实施方式中,所述引物VH6包含选自下组的序列:SEQIDNO.16所示、SEQIDNO.17所示和SEQIDNO.18所示的序列。在某些实施方式中,所述引物DH1包含选自下组的序列:SEQIDNO.21所示和SEQIDNO.22所示的序列。在某些实施方式中,所述引物DH2包含选自下组的序列:SEQIDNO.23所示和SEQIDNO.24所示的序列。在某些实施方式中,所述引物DH3包含选自下组的序列:SEQIDNO.25所示和SEQIDNO.26所示的序列。在某些实施方式中,所述引物DH4包含选自下组的序列:SEQIDNO.27所示和SEQIDNO.28所示的序列。在某些实施方式中,所述引物DH5包含选自下组的序列:SEQIDNO.29所示和SEQIDNO.30所示的序列。在某些实施方式中,所述引物DH6包含选自下组的序列:SEQIDNO.31所示和SEQIDNO.32所示的序列。在某些实施方式中,所述引物DH7包含选自下组的序列:SEQIDNO.33所示和SEQIDNO.34所示的序列。在某些实施方式中,所述靶标基因包括IgK基因重排,且所述能够特异性扩增靶标基因的试剂包括选自下述的一组或多组引物组合:1)正向引物:Vk1,反向引物:Kdel;2)正向引物:Vk2,反向引物:Kdel;3)正向引物:Vk3,反向引物:Kdel;和4)正向引物:IntronRSS,反向引物:Kdel。在某些实施方式中,所述引物Vk1包含选自下组的序列:SEQIDNO.35所示和SEQIDNO.36所示的序列。在某些实施方式中,所述引物Vk2包含选自下组的序列:SEQIDNO.37所示和SEQIDNO.38所示的序列。在某些实施方式中,所述引物Vk3包含选自下组的序列:SEQIDNO.39所示和SEQIDNO.40所示的序列。在某些实施方式中,所述引物Vk4包含选自下组的序列:SEQIDNO.41所示和SEQIDNO.42所示的序列。在某些实施方式中,所述引物IntronRSS包含选自下组的序列:SEQIDNO.43所示和SEQIDNO.44所示的序列。在某些实施方式中,所述引物Kdel包含选自下组的序列:SEQIDNO.45所示和SEQIDNO.46所示的序列。在某些实施方式中(例如,当所述白血病为B细胞急性淋巴细胞白血病时),所述靶标基因包括T细胞受体区域的基因重排;所述T细胞受体区域的基因包括选自下组的一个或多个:T细胞受体A、T细胞受体D、T细胞受体B和T细胞受体G;且所述能够特异性扩增靶标基因的试剂包括选自下述的一组或多组引物组合:1)正向引物:Vd2,反向引物:Dd3;2)正向引物:Dd2,反向引物:Dd3;3)正向引物:Vd2,反向引物:Ja29;4)正向引物:Vd2,反向引物:Ja9、Ja29、Ja30、Ja48、Ja49、Ja52、Ja54、Ja55、Ja56、Ja57、Ja58、Ja59和Ja61;5)正向引物:Vg1,反向引物:Jg1和Jg2;6)正向引物:Vg2,反向引物:Jg1和Jg2;7)正向引物:Vg4,反向引物:Jg1和Jg2;8)TCRB多引物组合A;9)TCRB多引物组合B;和10)TCRB多引物组合C。在某些实施方式中,所述引物Vg1包含选自下组的序列:SEQIDNO.47所示和SEQIDNO.48所示的序列。在某些实施方式中,所述引物Vg2包含选自下组的序列:SEQIDNO.49所示和SEQIDNO.50所示的序列。在某些实施方式中,所述引物Vg4包含选自下组的序列:SEQIDNO.53所示和SEQIDNO.54所示的序列。在某些实施方式中,所述引物Jg1包含选自下组的序列:SEQIDNO.55所示和SEQIDNO.56所示的序列本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测受试者中白血病细胞的系统,所述系统包括扩增模块,该扩增模块包含能够特异性扩增靶标基因的试剂,以获得靶标特异性扩增产物。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测受试者中白血病细胞的系统,所述系统包括扩增模块,该扩增模块包含能够特异性扩增靶标基因的试剂,以获得靶标特异性扩增产物。2.根据权利要求1所述的系统,其中所述靶标基因包括选自下组的一种或多种基因、其片段或其变体:IgH、IgK、T细胞受体A、T细胞受体D、T细胞受体B、T细胞受体G和Tal1。3.根据权利要求1-2中任一项所述的系统,其中所述靶标基因包括IgH基因重排,且所述能够特异性扩增靶标基因的试剂包括选自下述的一组或多组引物组合:1)正向引物:VH1/7,反向引物:JHcons;2)正向引物:VH2,反向引物:JHcons;3)正向引物:VH3,反向引物:JHcons;4)正向引物:VH4,反向引物:JHcons;5)正向引物:VH5,反向引物:JHcons;6)正向引物:VH6,反向引物:JHcons;7)正向引物:DH1、DH4、DH5及DH7,反向引物:JHcons;8)正向引物:DH2,反向引物:JHcons;9)正向引物:DH3,反向引物:JHcons;和10)正向引物:DH6,反向引物:JHcons。4.根据权利要求1-3中任一项所述的系统,其中所述靶标基因包括IgK基因重排,且所述能够特异性扩增靶标基因的试剂包括选自下述的一组或多组引物组合:1)正向引物:Vk1,反向引物:Kdel;2)正向引物:Vk2,反向引物:Kdel;3)正向引物:Vk3,反向引物:Kdel;和4)正向引物:IntronRSS,反向引物:Kdel。5.根据权利要求1-4中任一项所述的系统,其中所述靶标基因包括T细胞受体区域的基因重排;所述T细胞受体区域的基因包括选自下组的一个或多个:T细胞受体A、T细胞受体D、T细胞受体B和T细胞受体G;且所述能够特异性扩增靶标基因的试剂包括选自下述的一组或多组引物组合:1)正向引物:Vd2,反向引物:Dd3;2)正向引物:Dd2,反向引物:Dd3;3)正向引物:Vd2,反向引物:Ja29;4)正向引物:Vd2,反向引物:Ja9、Ja29、Ja30、Ja48、Ja49、Ja52、Ja54、Ja55、Ja56、Ja57、Ja58、Ja59和Ja61;5)正向引物:Vg1,反向引物:Jg1和Jg2;6)正向引物:Vg2,...

【专利技术属性】
技术研发人员:张超井多辉
申请(专利权)人:杭州赫玛生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:浙江,33

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