基于流感荧光素酶报告病毒的动物模型的建立方法和应用技术

本发明专利技术公开了基于流感荧光素酶报告病毒的动物模型的建立方法和应用。该方法主要利用一种携带Gaussia荧光素酶基因的重组流感病毒感染小鼠，并通过检测小鼠肺组织荧光素酶的表达水平评价小鼠的感染程度。本发明专利技术还公开了一种基于流感荧光素酶报告病毒技术筛选和评价抗流感药物的方法。该方法主要通过检测抗病毒处理对感染小鼠肺组织荧光素酶的表达水平的影响，筛选具有预防/治疗效果的抗流感药物。本发明专利技术通过对阳性药物利巴韦林、磷酸奥司他韦的检测证明，本发明专利技术公开的方法在新型抗流感药物的筛选、研发和评价等方面具有广泛的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
基于流感荧光素酶报告病毒的动物模型的建立方法和应用
本专利技术属于生物
，涉及一种基于流感荧光素酶报告病毒技术的动物模型建立方法，以及利用该动物模型筛选及评价抗流感药物的方法。
技术介绍
流感病毒是引起呼吸道感染的重要致病原之一，在冬季容易地区性或全球性爆发。这些大爆发通常是由甲型流感病毒的H1N1、H3N2亚型和乙型流感病毒引起的。甲型流感病毒感染是全球流感发病及死亡的主要原因。目前，抗流感感染主要有两种方式：抗病毒药物和疫苗。抗流感的药物根据其作用机制的不同可将其分为以下几种类型：作用于神经氨酸酶(NA)的药物，奥司他韦，扎那米韦等；作用于M2离子通道的药物，金刚烷胺，金刚乙胺等；作用于病毒其他蛋白的药物以及作用于宿主的药物，利巴韦林等。其中目前临床使用最多的是奥司他韦，但是由于该药的持续使用，流感病毒对其产生了较为严重的耐药性。流感病毒每年都在变化，而每年上市的流感病毒疫苗是基于WHO的专家对可能会流行的病毒种类的预测。但这种预测并不总是对的，一旦预测错误疫苗就不会产生效果。因此，新型流感疫苗及抗流感药物的研发是一项重要课题，而动物模型在流感疫苗及抗流感药物效果评价中具有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用流感病毒建立流感病毒感染动物模型的方法。

【技术特征摘要】
1.一种利用流感病毒建立流感病毒感染动物模型的方法。2.一种基于流感荧光素酶报告病毒技术的动物模型建立方法，其特征在于按照以下步骤进行：(1)将病毒液用PBS稀释至每30μlPBS中含有1000-100000TCID50的PR8-NS1-Gluc病毒；(2)将4-6周龄雌性BALB/c小鼠利用异氟烷呼吸麻醉，取30μl稀释的PR8-NS1-Gluc病毒液滴鼻感染小鼠；(3)分别于感染后1至8天，每天处死3只小鼠并解剖，取肺组织，加500ulPBS匀浆处理；(4)取50μl肺组织匀浆，用PBS稀释至1ml，从中取20μl利用BioLuxGaussiaLuciferaseAssayKit按照说明书指导测定荧光素酶活性；(5)测定的Gluc信号值代表小鼠肺组织荧光素酶的表达水平，根据Gluc信号值的高低评价动物模型的建模效果。3.一种利用基于流感荧光素酶报告病毒技术建立的流感感染动物模型筛选抗流感病毒感染药物的方法，其特征在于按照以下步骤进行：(1)将病毒液用PBS稀释至每30μlPBS中含有10...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜瑞坤，崔清华，杨勇，荣立军，张颖颖，李萍，
申请(专利权)人：山东中医药大学，
类型：发明
国别省市：山东,37