超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法及其微乳液的制备方法和应用技术

超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法及其微乳液的制备方法和应用，属于生物医药技术领域。该薏苡仁活性成分的提取方法由以下步骤制得：取脱脂薏苡粉干燥粉碎，过筛，加入蒸馏水混匀，加入淀粉酶，超声波辅助萃取，加入碱性蛋白酶，超声波辅助萃取，灭酶，迅速冷却至室温后进行离心分离，收集上清液得到薏苡仁活性蛋白；离心沉淀，加入乙醇，经沉淀过滤、离心、浓缩干燥得到薏苡仁活性多糖；薏苡仁活性多糖采用凝胶层析柱处理，洗脱，洗脱液经超滤膜膜分离，减压浓缩，得到薏苡仁活性多糖提取浓缩液。本发明专利技术制备提供的超声辅助/复合酶法同步提取的方法，粗多糖的总含量为10‑15%（苯酚硫酸法），降低水提液的黏度。

【技术实现步骤摘要】
超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法及其微乳液的制备方法和应用
本专利技术属于生物医药
，具体涉及超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法及其微乳液的制备方法和应用。
技术介绍
薏苡（Coixlacroyma-jobiL.var.ma-yuenStapf）为禾本科一年生植物，也叫药玉米、米仁。其种子去外壳和种皮为薏苡仁(coixlachryma-jobikernel)，是传统的药食同源食品。薏苡仁中K、Ca、Na、Mg、P五种元素含量较高，对帮助人体维持酸碱平衡、促进人体内某些酶的活性、与蛋白质协同维持机体渗透压中发挥重要的作用，是一种良好的营养平衡的谷物。薏苡仁油中不饱和脂肪酸含量较高，还含有多糖、硫胺素、核黄素、尼克酸、维生素E等。薏苡仁多糖（Coxian）为非硫酸的杂聚多糖，分子中含有乙酰氨基，在溶液中具有较好的分散性。薏苡仁多糖有着显著的生物活性和保健功能，如抗肿瘤、降血糖、降胆固醇、抗细菌感染和增强免疫等多种活性功能。同时，薏苡仁多糖能抑制肌糖原酵解、肝糖原分解、抑制糖异生作用，进而达到使血糖水平降低的目的。同时，薏苡仁多糖可以有效的提高体内的超氧化物歧化酶活性(SOD)、谷肌甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和红细胞内还原型谷肌甘肽(GSH)浓度，降低机体的氧化应激水平，防止脂质的过氧化反应，降低肝脏丙二醛(MDA)含量，实现其体内的抗氧化作用，减少和修复肝细胞所受到的损害。对其水提物进行分离筛选，得到多糖A、B、C的分别组成为：多糖A(鼠李糖：阿拉伯糖：木糖：甘糖露糖：半乳糖)由(1：1：1：11：10)组成；多糖B(鼠李糖:阿拉伯糖：木糖：甘露糖：半乳糖：葡萄糖)由(3：18：13：3：10：5)组成；多糖C为一种葡聚糖。在我国2型糖尿病是多基因遗传和异质性疾病，患病率逐年增多。我国成人血降、血脂异常患病率为18.6%，已经成为严重的社会问题；全球每年约有120-160万人死于心血管病和脑中风。高血压的治疗措施是综合的，饮食的调理是治疗的一个重要方面，在天然产物中寻找糖尿病、高血压补充治疗的功能性食品，开发相关药物和预防性功能食品，以期减少药物的副作用并改善症状，提高生活质量。目前未见复合酶法超声辅助同步提取薏苡仁多糖用于降三高功能性产品的开发。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于设计提供一种超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法及其微乳液的制备方法和应用的技术方案。本专利技术采用无毒、无害、无残留危险，以超临界CO2提取薏苡仁酯后副产物-脱脂薏苡粉为加工原料，通过超声辅助，调节料液，加入高温淀粉酶，调节pH值加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解后灭酶，迅速冷却至室温后进行离心分离，收集上清液并定容，测定蛋白质含量。以提取的蛋白提取液为原料，按1：5加入无水乙醇，经沉淀过滤、离心、浓缩干燥得到多糖类活性物，获得的薏苡仁多糖活性组分。该超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁蛋白、多糖活性组分，制备薏苡仁多糖微乳液，通过动物实验表明具有明显降低血清总胆固醇指标、血清甘油三酯指标、血压指标、空腹血糖、血耐指标，可用于食品、保健品、医药、生物化工等领域，特别适合开发降“三高”功能性食品。有效抑制提高多糖的得率，降低水提液的黏度。同时复合酶、超声辅助的应用可以有效降低产品变性的发生，风味不佳等问题。极大提高薏苡仁附加值，能有效提高产品质量与利用率。所述的超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于由以下步骤制得：1）取脱脂薏苡粉干燥粉碎，过40-100目筛，加入蒸馏水混匀，加入淀粉酶，超声波辅助萃取，加入碱性蛋白酶，超声波辅助萃取，灭酶，迅速冷却至室温后进行离心分离，收集上清液得到薏苡仁活性蛋白；2）取步骤1）得到的离心沉淀，加入乙醇，经沉淀过滤、离心、浓缩干燥得到薏苡仁活性多糖；3）将步骤2）所得的薏苡仁活性多糖分别采用DEAE-52,SephadexG-100凝胶层析柱处理，用5-10倍柱体积水洗脱，洗脱液经超滤膜膜分离，减压浓缩，得到薏苡仁活性多糖提取浓缩液。所述的超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于所述的步骤1）中薏苡粉中按重量比1：5-20的料液比加入蒸馏水。所述的超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于所述的步骤1）中淀粉酶酶解条件为：淀粉酶加入量为薏苡粉重量的0.5-1%，pH为5-7，温度为40-50℃。所述的超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于所述的步骤1）中超声波辅助萃取条件为：超声波功率为400-800W，萃取时间20-100分钟。所述的超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于所述的步骤1）中碱性蛋白酶酶解条件为：碱性蛋白酶加入量为薏苡粉重量的0.5-1%，pH为8-12，温度为50-70℃。所述的超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于所述的步骤2）中沉淀与无水乙醇的重量比为1：0.5。得到的薏苡仁活性多糖提取浓缩液制备薏苡仁多糖微乳液的方法，其特征在于包括以下步骤：取薏苡仁活性多糖提取浓缩液5-20重量份、果胶30-60重量份、海藻酸钠10-20重量份、维生素E1-5重量份、维生素C1-10重量份，在温度30-50℃下，高压均质，获得分散相平均粒径300-500µm的稳定薏苡仁多糖微乳液。所述的方法，其特征在于取薏苡仁活性多糖提取浓缩液8-15重量份、果胶35-55重量份、海藻酸钠12-18重量份、维生素E2-4重量份、维生素C2-8重量份。所述的方法，其特征在于将薏苡仁多糖微乳液制成丸剂、颗粒剂或片剂。所述的薏苡仁多糖微乳液在制备降血糖降血脂功能性食品中的应用。所述的应用，其特征在所述的薏苡仁多糖微乳液添加量为功能性食品的0.02-30%。本专利技术与现有技术具有以下有益效果：1、现有薏苡仁功能活性成分的提取方法不能同步提取薏苡仁蛋白与薏苡仁多糖。本专利技术的目的是提供一种超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁蛋白、多糖活性组分，制备薏苡仁多糖微乳液。2、本专利技术制备的薏苡仁多糖微乳液，通过动物实验表明具有明显降低血清总胆固醇指标、血清甘油三酯指标、血压指标、空腹血糖、血耐指标，可用于食品、保健品、医药、生物化工等领域，特别适合开发降“三高”功能性食品。3、本专利技术制备提供的超声辅助/复合酶法同步提取的方法，粗多糖的总含量为10-15%（苯酚硫酸法），降低水提液的黏度。同时复合酶、超声辅助的应用可以有效降低产品变性的发生，风味不佳等问题。极大提高薏苡仁附加值，能有效提高产品质量与利用率。附图说明图1为糖尿病小鼠胰岛组织形态学的变化图。具体实施方式以下结合实施例来进一步说明本专利技术。实施例1：取脱脂薏苡粉干燥粉碎，过50目筛，按照1：10的料液比加入蒸馏水，酶的用量为薏苡粉重量的0.5%，pH为3，温度45℃条件下，用超声波辅助萃取50分钟，提取清蛋白。调节pH值为10，加入碱性蛋白酶，酶的用量为薏苡粉重量的0.5%，温度50℃条件下，用超声波辅助萃取50分钟进行酶解，酶解后灭酶，迅速冷却至室温后进行离心分离，收集上清液测定蛋白质含量为15%。其沉淀为原料，按照1：10的料液比加入蒸馏水，调节pH值为7，温度95℃条件下，用超声波辅助萃取50本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于由以下步骤制得：1）取脱脂薏苡粉干燥粉碎，过40‑100目筛，加入蒸馏水混匀，加入淀粉酶，超声波辅助萃取，加入碱性蛋白酶，超声波辅助萃取，灭酶，迅速冷却至室温后进行离心分离，收集上清液得到薏苡仁活性蛋白；2）取步骤1）得到的离心沉淀，加入乙醇，经沉淀过滤、离心、浓缩干燥得到薏苡仁活性多糖；3）将步骤2）所得的薏苡仁活性多糖分别采用DEAE‑52, Sephadex G‑100凝胶层析柱处理，用5‑10倍柱体积水洗脱，洗脱液经超滤膜膜分离，减压浓缩，得到薏苡仁活性多糖提取浓缩液。

【技术特征摘要】
1.超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于由以下步骤制得：1）取脱脂薏苡粉干燥粉碎，过40-100目筛，加入蒸馏水混匀，加入淀粉酶，超声波辅助萃取，加入碱性蛋白酶，超声波辅助萃取，灭酶，迅速冷却至室温后进行离心分离，收集上清液得到薏苡仁活性蛋白；2）取步骤1）得到的离心沉淀，加入乙醇，经沉淀过滤、离心、浓缩干燥得到薏苡仁活性多糖；3）将步骤2）所得的薏苡仁活性多糖分别采用DEAE-52,SephadexG-100凝胶层析柱处理，用5-10倍柱体积水洗脱，洗脱液经超滤膜膜分离，减压浓缩，得到薏苡仁活性多糖提取浓缩液。2.如权利要求1所述的超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于所述的步骤1）中薏苡粉中按重量比1：5-20的料液比加入蒸馏水。3.如权利要求1所述的超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于所述的步骤1）中淀粉酶酶解条件为：淀粉酶加入量为薏苡粉重量的0.5-1%，pH为5-7，温度为40-50℃。4.如权利要求1所述的超声辅助/复合酶法同步提取薏苡仁活性成分的方法，其特征在于所述的步骤1）中超声波辅助萃取条件为：超声波功率为400-80...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈丽春，
申请(专利权)人：浙江工商大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33