测定复方制剂中灵芝酸A和灵芝三萜类成分含量的方法技术

一种测定复方制剂中灵芝酸A和灵芝三萜类成分含量的方法，其要点在于：使用乙酸乙酯提取样品和正己烷除杂，使用HZ816固相萃取小柱对样液进行纯化，定容，过膜得到检测供试品；使用梯度变化的乙腈、甲醇和水溶液作为高效液相色谱流动相，对供试品进行检测，以灵芝酸A作为对照品测定样品中灵芝酸A的含量和灵芝三萜类成分含量。本发明专利技术使用不同溶剂对样品进行除杂和纯化，用固相萃取柱进行纯化，有良好的重复性和回收率；优化了高效液相色谱测定灵芝酸A的方法，有较好的精密度、稳定性和分离度；以灵芝酸A为对照品测定制剂中的灵芝酸A含量，以相对于灵芝酸A的保留时间鉴别其他灵芝三萜类成分，以相对校正因子进行换算测定其含量。

【技术实现步骤摘要】
测定复方制剂中灵芝酸A和灵芝三萜类成分含量的方法
本专利技术属于天然产物提取和分析化学领域，具体涉及一种测定复方制剂中灵芝酸A和灵芝三萜类成分含量的方法。
技术介绍
灵芝：多孔菌科真菌灵芝的子实体。主要活性成分为灵芝三萜和灵芝多糖，灵芝三萜具有抗肿瘤、抗炎、抗衰老和护肝等药理功效。灵芝三萜类成分化合物有二百余种，其中灵芝酸A(GanodermaacidA)最早被研究者从灵芝中分离并鉴定结构；在以往专利及文献中，灵芝酸A常被作为对照品来检测灵芝及其提取物的质量。高效液相色谱(High-performanceliquidchromatography,HPLC)技术具有分离效能高、分析速度快、仪器自动化强等特点，可采用多种检测器以及种类丰富的色谱柱，HPLC技术在各种天然产物成分指标的质量控制中得到不断推广和应用。目前在灵芝的应用多为将灵芝用有机溶剂提取得到三萜及甾醇，用十八烷基键合硅胶(C18)反向色谱柱进行检测灵芝三萜类成分含量；将将灵芝用水提取得到灵芝多糖，水解并衍生化后用C18反向色谱柱检测，内标法检测单糖组分和含量；或直接将分离纯化的单一灵芝多糖使用凝胶排阻色谱柱以出峰时间检测分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定复方制剂中灵芝酸A和灵芝三萜类成分含量的方法，其特征在于：使用乙酸乙酯提取样品和使用正己烷除杂，使用HZ816固相萃取小柱对样液进行纯化，定容，过膜得到检测供试品；使用梯度变化的乙腈、甲醇和水溶液作为高效液相色谱流动相，对供试品进行检测，以灵芝酸A作为对照品测定样品中灵芝酸A的含量和灵芝三萜类成分含量。

【技术特征摘要】
1.一种测定复方制剂中灵芝酸A和灵芝三萜类成分含量的方法，其特征在于：使用乙酸乙酯提取样品和使用正己烷除杂，使用HZ816固相萃取小柱对样液进行纯化，定容，过膜得到检测供试品；使用梯度变化的乙腈、甲醇和水溶液作为高效液相色谱流动相，对供试品进行检测，以灵芝酸A作为对照品测定样品中灵芝酸A的含量和灵芝三萜类成分含量。2.根据权利要求1中所述的一种测定复方制剂中灵芝酸A和灵芝三萜类成分含量的方法，其特征在于：所述的供试品的制作：对于富含非极性成分的样品：称取相当于灵芝生药量200mg重量的复方制剂，100ml正己烷提取，离心弃上清；渣用100ml乙酸乙酯提取，离心取上清，浓缩蒸干，固体用水超声混悬成悬浊液，加入活化后的HZ816固相萃取小柱上样，上样后用5ml水洗柱，弃去，用4ml甲醇洗脱，洗脱液用甲醇定容5ml，过0.45μm滤膜，即得供试品溶液。3.根据权利要求1中所述的一种测定复方制剂中灵芝酸A和灵芝三萜类成分含量的方法，其特征在于：所述的供试品的制作：对于富含极性成分的样品：称取相当于灵芝生药量200mg重量的复方制剂，用100ml乙酸乙酯提取，离心取上清，浓缩蒸干，固体用水超声混悬成悬浊液，加入活化HZ816固相萃取小柱上样，上样...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晔，周岩飞，黄样增，姚渭溪，吴长辉，
申请(专利权)人：福建仙芝楼生物科技有限公司，仙芝科技福建股份有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35