广谱抗微生物制剂、其制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种广谱抗微生物制剂。广谱抗微生物制剂含有以下活性成分：JB蛋白、氯己定、卡松，三者的质量比为1:5:100，其中JB蛋白的含量为0.04μg/mL～40μg/mL。本发明专利技术还公开了广谱抗微生物制剂的制备方法，以及广谱抗微生物制剂在卫生用品中的应用。采用本发明专利技术，广谱抗微生物制剂的结构科学、卫生、工艺简单、产品无毒、无害、无副作用，能有效地抑制微生物生长、预防HPV、HIV病毒感染。广谱抗微生物制剂是例如抑制细菌、真菌、预防人乳头瘤病毒、人类免疫缺陷病毒感染的制剂。

【技术实现步骤摘要】
广谱抗微生物制剂、其制备方法及应用
一般地，本专利技术涉及抗微生物制剂领域。更具体地，本专利技术涉及广谱抗微生物制剂以及上述制剂的制备方法及其在卫生用品中的用途。
技术介绍
人乳头瘤病毒(HumanPapillomavirus，HPV)属于乳头瘤病毒科，是一类嗜上皮性无囊膜双链DNA病毒。目前为止，在人体的皮肤及粘膜组织中分离出的HPV可根据DNA序列的不同被划分为100多个型别。又可根据其致癌性可分为“低危”型和“高危”型。前者低危型流行度高的代表类型为HPV6、HPV11等，主要引起良性的生殖器疣和低度的宫颈上皮坏死；后者高危型流行度高的代表类型为HPV16、HPV18等，它们的感染是引发组织恶性肿瘤尤其是宫颈癌的主要原因。人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiencyVirus,HIV)是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒，属反转录病毒的一种，广泛存在于感染者的血液、精液、阴道分泌物、乳汁、脑脊液、有神经症状的脑组织液中，其中以血液、精液、阴道分泌物中浓度最高；主要攻击人体的辅助T淋巴细胞系统，一旦侵入机体细胞，病毒将会和细胞整合在一起终生难以消除。目前，在世界范围内导致了近1200万人的死亡，超过3000万人受到感染。目前，人们生活水平逐渐提高，且已处于性开放时代，HPV、HIV感染人群越来越多，而针对这两种病毒感染的药物制剂微乎其微，基本还是采用抗生素来提高免疫力，增强抵抗病毒的能力，间接治疗或预防病毒感染。因此，研究能直接杀灭HPV、HIV病毒的制剂，对于治疗和预防病毒性感染疾病具有强烈的现实意义。目前已有一些有抗微生物、抗病毒功效的卫生用品专利技术专利，如“一种女性生理用抑菌抗病毒卫生巾(CN201620474939.6)”、“一种带中草药芯片的卫生巾(CN201510441504.1)”、“一种固体杀菌消毒新材料及其制备和应用(CN201410853288.7)”、“具有抗真菌、抗细菌、抗病毒效果的无防腐剂的无纺布产品、尿布和湿纸巾及其制造方法(CN201480002609.0)”、“一种抑菌抗病毒卫生巾(CN201310411623.3)”等，但并没有专门抑制细菌、真菌、预防人乳头瘤病毒、人类免疫缺陷病毒感染的卫生用品。因此，有待提出一种预防人乳头瘤病毒、人类免疫缺陷病毒感染的制剂，用于制作卫生用品。本专利技术人以往申请的专利“一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的生物制剂的制备方法”，专利号：ZL201210066696.9，公布了一种多肽蛋白类病毒进入/融合抑制剂，该制剂可用于凝胶制剂、膏霜剂、喷雾剂、搽洗剂、盥洗剂的添加剂来应用，可起到预防和控制HPV感染的作用。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题在于提供新的广谱抗微生物制剂，特别是抑制细菌、真菌、预防HPV、HIV感染的新制剂。本专利技术要解决的技术问题还在于，提供所述广谱抗微生物制剂，特别是抑制细菌、真菌、预防HPV、HIV感染的新制剂的制备方法。本专利技术解决的技术问题还在于，提供所述广谱抗微生物制剂，特别是抑制细菌、真菌、预防HPV、HIV感染的制剂的应用，尤其是在女性卫生巾、卫生护垫、湿巾、纸巾纸等卫生用品中的应用。本专利技术至少部分基于氯己定或/和卡松促进JB蛋白的抗细菌和抗病毒效果。本专利技术的广谱抗微生物制剂相对于单独的JB蛋白、氯己定和卡松或任意两者的组合在抑制细菌，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、和白色念珠菌，以及病毒，如HPV和HIV上具备令人惊讶的效果。本专利技术广谱抗微生物制剂的抗微生物效果优于构成该广谱抗微生物制剂的组分的叠加。更令人惊讶地，我们发现将无抗病毒活性的卡松及氯已定加入JB蛋白中能够增强JB蛋白的抗病毒活性，特别是抗HPV病毒活性，如通过抗病毒IC50值测定的。为解决上述技术问题，一方面，本专利技术提供了广谱抗微生物制剂，其含有以下成分：JB蛋白，氯己定，优选醋酸氯己定和卡松。在一个实施方案中，在广谱抗微生物制剂中，JB蛋白:氯己定:卡松的质量比为1:5:100，其中JB蛋白在制剂中的的含量为0.04μg/mL～40μg/mL，优选4μg/mL。在一个实施方案中，所述JB蛋白的制备方法为将乳球蛋白溶于磷酸盐缓冲液，优选pH8.5中，优选终浓度为20mg/ml，然后在此溶液中缓慢加入饱和的3-羟基邻苯二甲酸酐，摇匀，制得3-羟基苯酐，混合物在室温下放置，优选放置1小时，用PBS，优选pH7-8，优选pH7.4PBS透析，再用微孔滤膜过滤除菌即得。在一个实施方案中，广谱抗微生物制剂是抑制细菌、真菌、预防HPV、HIV感染制剂。在一个实施方案中，JB蛋白可以参照专利“一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的生物制剂的制备方法”(专利公开号：CN102631666B)制备，该专利通过引用以其整体并入本文。氯己定、醋酸氯己定和卡松可从合法生产资质的厂家获得。另一方面，本专利技术还公开了的制备方法，包括：(1)将氯己定，优选醋酸氯己定搅拌溶解于水，115℃、30min高温灭菌处理；(2)步骤(1)处理后的溶液降温至60℃左右时，加入卡松，并搅拌溶解；(3)将JB蛋白使用0.22μm滤膜过滤；(4)将步骤(2)制备的溶液的温度降至40℃以下时，加入过滤得到的JB蛋白，搅拌均匀即可。在一个实施方案中，JB蛋白:氯己定:卡松的质量比为1:5:100，其中JB蛋白在制剂中的的含量为0.04μg/mL～40μg/mL。另一方面，本专利技术提供了广谱抗微生物制剂在卫生用品中的用途。在一个实施方案中，卫生用品选自下组：女性卫生巾、卫生护垫、湿巾、纸巾。在一个实施方案中，制剂在卫生巾中的添加量为4～6ml/片，优选为5-6ml/片。在一个实施方案中，制剂在卫生护垫中的添加量为2～4ml/片，优选为3～4ml/片。在一个实施方案中，制剂在湿巾中的添加量为3～6ml/g，优选为4～5ml/g。在一个实施方案中，制剂在纸巾中的添加量为0.05～0.1ml/g，优选为0.08～0.1ml/g。在一个实施方案中，所述纸巾包括纸手帕、抽取式卫生纸、餐巾纸和擦手纸。一方面，本专利技术提供了卫生用品。在一个实施方案中，卫生用品含有有效量的广谱抗微生物制剂。在一个实施方案中，卫生用品选自下组：女性卫生巾、卫生护垫、湿巾、纸巾。在一个实施方案中，制剂在卫生巾中的添加量为4～6ml/片，优选为5-6ml/片。在一个实施方案中，制剂在卫生护垫中的添加量为2～4ml/片，优选为3～4ml/片。在一个实施方案中，制剂在湿巾中的添加量为3～6ml/g，优选为4～5ml/g。在一个实施方案中，制剂在纸巾中的添加量为0.05～0.1ml/g，优选为0.08～0.1ml/g。在一个实施方案中，纸巾包括纸手帕、抽取式卫生纸、餐巾纸和擦手纸；一方面，本专利技术提供了氯己定和卡松在提高制剂中JB蛋白抑制HPV的效果中的用途。一方面，本专利技术提供了氯己定和卡松在制备含JB蛋白的制剂中的用途，所述制剂具有改善的HPV抑制效果。在一个实施方案中，氯己定是醋酸氯己定。在卫生巾中的应用，所述制剂在卫生巾中的添加量可以为4～6ml/片。优选地，所述制剂在卫生巾中的添加量可以为5～6ml/片。具体地，所述卫生巾可以是任何种类的卫生巾，用该制剂对卫生巾进行喷涂，待制剂为卫生巾充分浸透吸收后，烘干卫生巾即可。烘干温度可以小于本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.广谱抗微生物制剂，其含有以下成分：JB蛋白，氯己定，优选醋酸氯己定和卡松(Kathon)，其中所述广谱抗微生物制剂优选是抑制细菌、真菌、预防人乳头瘤病毒(HPV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的制剂，优选地所述JB蛋白为酸酐修饰或衍生化的β‑乳球蛋白、鸡血清蛋白OVA、兔血清蛋白RSA、猪血清白蛋白PSA、冷水鱼皮明胶G‑FS、或猪皮明胶G‑PS，优选地所述酸酐为3‑羟基邻苯二甲酸酐、琥珀酸酐或马来酸酐，其中所述酸酐衍生化通过混合所述酸酐与β‑乳球蛋白、鸡血清蛋白OVA、兔血清蛋白RSA、猪血清白蛋白PSA、冷水鱼皮明胶G‑FS、或猪皮明胶G‑PS进行。

【技术特征摘要】
1.广谱抗微生物制剂，其含有以下成分：JB蛋白，氯己定，优选醋酸氯己定和卡松(Kathon)，其中所述广谱抗微生物制剂优选是抑制细菌、真菌、预防人乳头瘤病毒(HPV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的制剂，优选地所述JB蛋白为酸酐修饰或衍生化的β-乳球蛋白、鸡血清蛋白OVA、兔血清蛋白RSA、猪血清白蛋白PSA、冷水鱼皮明胶G-FS、或猪皮明胶G-PS，优选地所述酸酐为3-羟基邻苯二甲酸酐、琥珀酸酐或马来酸酐，其中所述酸酐衍生化通过混合所述酸酐与β-乳球蛋白、鸡血清蛋白OVA、兔血清蛋白RSA、猪血清白蛋白PSA、冷水鱼皮明胶G-FS、或猪皮明胶G-PS进行。2.根据权利要求1所述的广谱抗微生物制剂，其中JB蛋白:氯己定:卡松的质量比为0.5-1.5:3-6:90-110，优选为1:5:100，其中优选地所述JB蛋白在制剂中的含量为0.04μg/mL～40μg/mL，优选4μg/mL，优选卡松的有效成分含量≥1.5％。3.根据权利要求1所述的广谱抗微生物制剂，其中所述JB蛋白的制备方法如下：将β-乳球蛋白、鸡血清蛋白OVA、兔血清蛋白RSA、猪血清白蛋白PSA、冷水鱼皮明胶G-FS、或猪皮明胶G-PS溶于磷酸盐缓冲液，优选pH8.5中，优选终浓度为20mg/ml，然后在此溶液中缓慢加入饱和的3-羟基邻苯二甲酸酐、琥珀酸酐或马来酸酐，摇匀，混合物在室温下放置，优选放置1小时，用PBS，优选pH7-8，优选pH7.4PBS透析，再用微孔滤膜过滤除菌即得，或者将3-羟基-邻苯二甲酸酐溶于二甲基亚飒中，浓度达到饱和，然后将β-乳球蛋白、鸡血清蛋白OVA、兔血清蛋白RSA、猪血清白蛋白PSA、冷水鱼皮明胶G-FS、或猪皮明胶G-PS溶于pH8.5，0.1M磷酸钠溶液中，优选使蛋白终浓度为20mg/mL，再将3-羟基-邻苯二甲酸酐加入蛋白溶液中，震荡混匀，在温度为25℃的条件下，放置，pH7.4PBS透析，再用0.45uM微孔滤膜过滤除菌即得。4.权利要求1-3中任一项所述的广谱抗微生物制剂的制备方法，其包括：(1)将所述氯己定，优选醋酸氯己定搅拌溶解于水，高温灭菌处理；(2)待步骤(1)处理后的溶液降温至50-70℃，优选60℃时，加入卡松，并搅拌溶解；(3)将所述JB蛋白使用滤膜，优选0.22μm滤膜过滤；(4)待由步骤(2)制备的溶液的温度降至40℃以下时，加入步骤(3)中过滤得到的所述JB蛋白，搅拌均匀即可。5.权利要求4所述的方法，其中所述微生物制剂中JB蛋白:氯己定:卡松的质量比为0.5-1.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨霞，姜世勃，陆路，徐巍，王茜，花晨，
申请(专利权)人：山西锦波生物医药股份有限公司，复旦大学，
类型：发明
国别省市：山西,14