The invention discloses a method for separating fungal extracellular polysaccharides by using a three-phase system, belonging to the technical field of separation and purification of bioactive substances, especially a system composed of tert-butanol and inorganic ammonium sulfate for selective separation of fungal extracellular polysaccharides. The main steps are as follows: fungus fermentation broth with 15W/cm
【技术实现步骤摘要】
一种利用三相体系分离真菌胞外多糖的方法
本专利技术涉及一种利用三相体系分离真菌胞外多糖的方法,特指叔丁醇和无机盐硫酸铵组成的体系用于真菌胞外多糖的选择性分离,属于生物活性物质分离纯化
技术介绍
目前,国内外从真菌液体发酵液中获得胞外多糖的方法主要是乙醇沉淀法。然而,醇沉过程需要大量的乙醇,这对乙醇造成了极大的浪费,且粗多糖需要除蛋白、脱色等分离过程,操作过程繁琐。常用的除蛋白方法-Sevag法需要用到三氯甲烷,其遇光照会与空气中的氧作用,逐渐分解而生成剧毒的光气和氯化氢,严重影响操作者的健康,对环境也造成了极大的污染,不符合“绿色”化学的要求。因此,一种绿色、高效、快速分离真菌胞外多糖的方法显得尤为重要。近年来,三相分离法(Three-phasepartitioning,TPP)作为一种新发展的分离生物活性物质的方法已用于蛋白质、酶、氨基酸及植物油等的分离、浓缩和纯化。该法设备简单、操作简便快速,试剂可重复使用,叔丁醇沸点高于甲醇、乙醇和己烷,安全性高。在三相分离中,叔丁醇不仅可以作为有机溶剂溶解非极性物质,而且还能够与蛋白质结合,促使形成三相。同时,游离蛋白质以固体的形式富集于中间相,能够代替传统Sevag法用于多糖中游离蛋白的去除。因此,利用三相分离法直接从液体发酵液中分离真菌胞外多糖具有潜在的工业化应用效果和可行性。经检索,目前还未见利用叔丁醇和无机盐硫酸铵组成的体系用于真菌胞外多糖选择性分离的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种利用三相体系分离真菌胞外多糖的方法,以实现“绿色”、高效、快速、选择性分离真菌胞外多糖。为了解决以上技 ...
【技术保护点】
1.一种利用三相体系分离真菌胞外多糖的方法,其特征在于按照下述步骤进行:步骤一,超声波预处理:取真菌发酵液离心管中,置于超声波洗槽中,以15w/cm3超声波处理10min;步骤二,利用三相体系分离真菌胞外多糖:将步骤一中超声波预处理后的发酵液加入硫酸铵,振荡溶解后,加入叔丁醇,拧紧离心管盖,在35℃的恒温水浴中振荡30min,4500rpm离心分离10min,取出下层无机盐相;步骤三,制备真菌胞外多糖:将步骤二中所述的含有真菌胞外多糖的下层无机盐相蒸馏水透析48h,浓缩,喷雾干燥,得到真菌胞外多糖固体粉末;步骤四,回收叔丁醇:将步骤二中所得的上层含有色素等杂质的叔丁醇有机相,≤30℃旋转蒸发,回收叔丁醇。
【技术特征摘要】
1.一种利用三相体系分离真菌胞外多糖的方法,其特征在于按照下述步骤进行:步骤一,超声波预处理:取真菌发酵液离心管中,置于超声波洗槽中,以15w/cm3超声波处理10min;步骤二,利用三相体系分离真菌胞外多糖:将步骤一中超声波预处理后的发酵液加入硫酸铵,振荡溶解后,加入叔丁醇,拧紧离心管盖,在35℃的恒温水浴中振荡30min,4500rpm离心分离10min,取出下层无机盐相;步骤三,制备真菌胞外多糖:将步骤二中所述的含有真菌胞外多糖的下层无机盐相蒸馏水透析48h,浓缩,喷雾干燥,得到真菌胞外多糖固体粉末;步骤四,回收叔丁醇:将步骤二中所得的上层含有色素等杂质的叔丁醇有机相,≤...
【专利技术属性】
技术研发人员:闫景坤,王瑶瑶,仇雯漪,丁志超,武利霞,蔡吴丹,
申请(专利权)人:江苏大学,
类型:发明
国别省市:江苏,32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。