一种鸡胚中枢神经系统单个神经元动态研究模型的制备方法及应用技术方案

本发明专利技术涉及一种鸡胚中枢神经系统单个神经元动态研究模型的制备方法及应用，属于基因功能研究技术领域。本发明专利技术将活体电转基因技术和组织片培养相结合，以进行鸡胚中枢神经系统单个神经元的基因功能研究，具体是将鸡胚脊髓或者视顶盖组织经活体电转基因技术，得到转基因组织块，将其切片后对组织切片进行培养，培养后进行外源基因功能研究。使用本发明专利技术的方法培养得到的组织片上可以清晰的观察到单个神经元完整的结构，并且神经元轴突的投射更具有规律性，本发明专利技术培养的组织片没有经过酶的消化，同时还受到组织片其他细胞及相关分泌因子的影响，更接近活体，组织片上的单个神经元可以模拟活体内神经元的动态变化的过程。

【技术实现步骤摘要】
一种鸡胚中枢神经系统单个神经元动态研究模型的制备方法及应用
本专利技术涉及一种鸡胚中枢神经系统单个神经元动态研究模型的制备方法及应用，属于基因功能研究

技术介绍
器官型组织片培养技术是一种有效的体外组织培养方法，培养的组织片能够保持几乎正常的细胞之间的连接，并且保持几乎正常的生理功能和形态结构特点，因此，避免了常规的细胞培养和活体内实验研究的缺点。器官型组织片培养为中枢神经系统发育过程的研究提供了一种很好的方法。该项技术真正的取得突破性进展是在1981年(BH(1981)Organotypicmonolayerculturesofnervoustissue.JNeurosciMethods4:329-342)开发的滚管式培养。采用该培养方法，不同部位的脑片可以培养好几周的时间。在1991，Stoppini等(StoppiniL,BuchsPA,MullerD(1991)Asimplemethodfororganotypicculturesofnervoustissue.JNeurosciMethods37:173-182)利用带有透明并且具有一定大小孔径薄膜的培养皿进行大鼠本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鸡胚中枢神经系统单个神经元动态研究模型的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：1)采用活体电转的方法将含有目的基因的质粒转入鸡胚脊髓或者鸡胚视顶盖组织中，得转基因组织块；2)将转基因组织块用凝胶进行包裹，得包裹块；将所述包裹块切片，得到组织切片；将得到的组织切片进行培养、观察。

【技术特征摘要】
1.一种鸡胚中枢神经系统单个神经元动态研究模型的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：1)采用活体电转的方法将含有目的基因的质粒转入鸡胚脊髓或者鸡胚视顶盖组织中，得转基因组织块；2)将转基因组织块用凝胶进行包裹，得包裹块；将所述包裹块切片，得到组织切片；将得到的组织切片进行培养、观察。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：当所述转基因组织块为鸡胚视顶盖组织时，所述包裹的步骤为：将凝胶块粘贴到组织切片机的托盘上；然后在凝胶块一侧切出个槽，将鸡脑嗅球端切除部分组织，嗅球端朝下，视顶盖放入凝胶的槽中，也粘贴于组织切片的托盘上。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述凝胶为3.5-4.5％的琼脂。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述组织切片的厚度为250-350μm。5.根据权利要求1或4所述的制备方法，其特征在于：所述切片后将组织切片置于人工脑脊液中。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述活体...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨慈清，林俊堂，李小英，管丽红，乔梁，李晗，李栓庆，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：河南,41