本发明专利技术属制药领域，涉及EPZ031686在制备延缓衰老，改善血管衰老相关疾病药物中的应用。本发明专利技术通过体外衰老模型实验，结果显示所述的EPZ031686抑制衰老相关表型分子的蛋白表达，能减少细胞衰老标志物‑SA‑β‑gal的活性和恢复细胞增殖情况，明确EPZ031686抑制细胞衰老的调控机制，在体内衰老相关疾病模型实验中，结果表明EPZ031686能抑制衰老相关表型分子的蛋白表达，所述的EPZ031686对衰老相关疾病具有明显的延缓衰老的作用，进一步，所述化合物EPZ031686及其相关抑制剂可制备治疗血管衰老相关疾病的药物。
Use of compound EPZ031686 in the preparation of drugs for treating vascular aging related diseases
The invention belongs to the pharmaceutical field, and relates to the application of EPZ031686 in the preparation of drugs for delaying aging and improving vascular aging related diseases. The results show that the EPZ031686 can inhibit the expression of aging-related phenotypic molecules, reduce the activity of cell aging marker SA beta gal and restore cell proliferation, clarify the regulation mechanism of EPZ031686 to inhibit cell aging, and in vivo aging-related disease model experiments. The results showed that EPZ031686 could inhibit the expression of aging-related phenotypic molecules. The said EPZ031686 had an obvious anti-aging effect on aging-related diseases. Furthermore, the compound EPZ031686 and its related inhibitors could be used to prepare drugs for the treatment of vascular aging-related diseases.
【技术实现步骤摘要】
化合物EPZ031686在制备治疗血管衰老相关疾病药物中的用途
本专利技术属制药领域，涉及化合物EPZ031686在制药中的新用途，具体涉及化合物EPZ031686及其相关抑制剂在制备治疗血管衰老相关疾病药物中的用途，所述药物有助于延缓血管衰老相关疾病，提高老年人健康。
技术介绍
研究证实，血管衰老是引发心血管相关疾病如。高血压，动脉粥样硬化，糖尿病等的重要因素之一，其中衰老的血管细胞在其发生发展过程中始终伴有重要角色。本领域技术人员认为，干预衰老血管细胞的不断累积，将有效的预防血管衰老以及心血管相关疾病的发生。现有技术公开了EPZ031686是一种磺胺类药物，是SMYD3的非竞争性抑制剂。有研究报道，在体外实验中，EPZ031686能有效的抑制SMYD3的生物活性，是第一个被识别出来的具有两位毫微摩尔级的SMYD3抑制剂，当采用10μM浓度时对于16种组蛋白甲基化转移酶均有小于30％的抑制效果，其SMYD3BiochemIC50＝3nM，SMYD3CellIC50＝36nM；在体内实验中，当口服给予小鼠EPZ031686时具有较好的生物利用度，静脉注射浓度需1mg/kg。迄今，尚未见有EPZ031686在延缓血管衰老药理方面作用的报道。基于现有技术的现状，本申请的专利技术人拟提供化合物EPZ031686在制药中的新用途，具体涉及化合物EPZ031686及其相关抑制剂在制备治疗血管衰老相关疾病药物中的用途。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术的现状，提供化合物EPZ031686在制药中的新用途，具体涉及化合物EPZ031686及其相关抑制剂在制备治疗血管衰老相关疾病药物中的用途。本专利技术所述的化合物EPZ031686的分子式为：C26H34CLF3N4O4S，(可市购)。本专利技术通过血管紧张素II(AngiotensinII,AngII)诱导的大鼠主动脉内皮细胞衰老模型观察了EPZ031686对衰老相关表型分子的抑制作用，进一步预防衰老相关心血管疾病的发生；通过westernblot方法检测EPZ031686对组蛋白甲基化转移酶Smyd3(SETandMYNDdomaincontaining3)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(cyclin-dependentkinaseinhibitor1A，Cdkn1a/p21)，血管细胞黏附分子(vascularcelladhesionmolecule-1,VCAM-1)的蛋白表达情况；利用细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒(Senescencecellshistochemicalstainingkit,sigma)检测细胞衰老时SA-β-Gal(senescence-associatedβ-galactosidase)活性；利用keyFluor488Click-iTEdU成像检测试剂盒检测细胞增殖情况；在体内实验中利用AngII微渗泵持续灌注建立衰老小鼠模型，并腹腔注射给予小鼠EPZ031686(50mg/kg/day)，通过westernblot和免疫荧光技术(Immunofluorescencestaining)方法检测EPZ031686对衰老相关蛋白的影响；结果表明，所述的化合物EPZ031686明显抑制组蛋白甲基化转移酶Smyd3、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(Cdkn1a/p21)，血管细胞黏附分子(VCAM-1)的蛋白表达；在普通的光学显微镜下可以观测经血管紧张素II(AngII)处理后的细胞出现明显蓝染，即SA-β-Gal活性增强，给予EPZ031686后明显抑制SA-β-Gal活性；在荧光显微镜下观察到EPZ031686能明显恢复细胞增殖情况；本专利技术的体内实验结果显示，腹腔注射给予小鼠EPZ031686能显著抑制蛋白甲基化转移酶Smyd3、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(Cdkn1a/p21)，血管细胞黏附分子(VCAM-1)的蛋白表达，免疫荧光双染结果显示，EPZ031686明显抑制smyd3和p21的荧光强度。实验结果表明，EPZ031686明显抑制衰老细胞β-半乳糖苷酶的活性以及恢复细胞增殖能力，EPZ031686能抑制衰老相关基因smyd3、VCAM-1、p21的表达；所述的EPZ031686对AngII诱导的细胞衰老具有明显的保护作用，进一步，所述的化合物EPZ031686及其相关抑制剂可制备防治血管衰老相关疾病的药物。附图说明图1是利用westernblot方法检测相关基因Smyd3，p21，VCAM-1蛋白水平，其中：control：正常对照组，AngⅡ：模型组，EPZ031686:AngⅡ+EPZ031686。图2是利用细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒(Senescencecellshistochemicalstainingkit,Sigma)检测细胞衰老时SA-β-Gal活性，其中：control：正常对照组，AngⅡ：模型组，EPZ031686:AngⅡ+EPZ031686。图3是利用keyFluor488Click-iTEdU成像检测试剂盒检测细胞增殖情况，其中：control：正常对照组，AngⅡ：模型组，EPZ031686:AngⅡ+EPZ031686。图4是利用westernblot方法检测小鼠血管组织中Smyd3，p21蛋白水平，其中，数据用目的基因和相应内参GAPDH相比，其中：control：正常对照组，AngⅡ：模型组，EPZ031686:AngⅡ+EPZ031686。**:p<0.01。图5是利用westernblot方法检测小鼠血管组织中VCAM-1,p-Chk2蛋白水平，其中，数据用目的基因和相应内参GAPDH相比，其中：control：正常对照组，AngⅡ：模型组，EPZ031686:AngⅡ+EPZ031686。**:p<0.01。图6是利用Immunofluorescencestaining方法检测小鼠血管组织中Smyd3，p21表达的荧光强度，其中：control：正常对照组，AngⅡ：模型组，EPZ031686:AngⅡ+EPZ031686。其中绿色为Smyd3，红色为p21。具体实施方式实施例1EPZ031686预防体外大鼠主动脉内皮细胞衰老表型实验分组：将1×105个大鼠主动脉内皮细胞种入6cm培养皿培养3天达85-90％，细胞同步化6-12h，随机分成6组，即：①正常对照组；②模型组；③EPZ031686(5μM)组；④EPZ031686(10μM)组；⑤EPZ031686(15μM)组；给药：③-⑤加入终浓度为5μM、10μM、15μM的EPZ031686，培养4h；加入AngII(2μM)培养诱导大鼠主动脉内皮细胞衰老模型；提取细胞总蛋白，采用WesternBlot测定衰老相关表型分子的蛋白水平，包括：smyd3、VCAM-1、p21；实验数据进行单因素方差分析，p＜0.05，结果显示EPZ031686能抑制衰老相关基因smyd3、VCAM-1、p21的表达；采用细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒(Senescencecellshistochemicalstainingkit,Sigma)和keyFluor488Click-iTEdU成像检测本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.EPZ031686在制备防治血管衰老相关疾病药物中的用途；所述的EPZ031686的分子式为：C26H34CLF3N4O4S。
【技术特征摘要】
1.EPZ031686在制备防治血管衰老相关疾病药物中的用途；所述的EPZ031686的分子式为：C26H34CLF3N4O4S。2.按权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的EPZ031686在体内和体外通过抑制衰老相关基因的蛋白表达水平发...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱依谆，刘新华，杨迪，倪挺，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海,31
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