The invention discloses a human serum AFP negative hepatocellular carcinoma detection kit. The combined diagnostic kit is used to diagnose AFP-negative hepatocellular carcinoma patients by real-time quantitative PCR to detect the expression of 5 kinds of RNA in plasma, including MiR_125b, MiR_205, SPRY4_IT1, GAS5_AS1 and circSMARCA5. The kit has the characteristics of high sensitivity, high specificity and high accuracy, can effectively diagnose AFP negative hepatocellular carcinoma patients, realize the auxiliary diagnosis of early hepatocellular carcinoma, and improve the survival rate of patients, and has remarkable clinical application value.
【技术实现步骤摘要】
一种人血清AFP阴性肝细胞癌检测试剂盒
本专利技术属于生物
，具体涉及一种以联合5种非编码RNA标志物miR-125b、miR-205、SPRY4-IT1、GAS5-AS1和circSMARCA5用于检测人血清AFP阴性肝细胞癌。
技术介绍
肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，死亡率在恶性肿瘤中位居第二位。原发性肝癌中85％-90％为肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)。在中国，每年因HCC死亡的人数达695,900，可见HCC是威胁人类健康的主要疾病之一。肝硬化是HCC形成的最主要的危险因素，发生率为80％-90％，而导致肝硬化的主要因素是嗜肝的乙肝DNA病毒(HepatitisBvirus，HBV)和丙型RNA病毒(HepatitisCvirus，HCV)的感染。HCC的死亡率在过去20年中明显增多，流行病学研究表明，在接下来的十年中HCC所带来的药物和经济方面的负担仍会显著加重。尽管现今治疗HCC的方法有极大发展，目前有手术切除，肝脏移植，辅助治疗，介入治疗等多种治疗手段，但是很多HCC在相关症状出现后才能被诊断，已经到达晚期...
【技术保护点】
1.miR‑125b、miR‑205、SPRY4‑IT1、GAS5‑AS1和circSMARCA5联合使用在制备检测血清AFP阴性肝细胞癌的试剂中的应用。
【技术特征摘要】
1.miR-125b、miR-205、SPRY4-IT1、GAS5-AS1和circSMARCA5联合使用在制备检测血清AFP阴性肝细胞癌的试剂中的应用。2.一种血清AFP阴性肝细胞癌非编码RNA检测试剂盒，其检测体系包括反转录反应体系、PCR反应体系和内参体系，其特征在于，所述PCR反应体系中包括分别针对miR-125b、miR-205、SPRY4-IT1、GAS5-AS1和circSMARCA5的正向引物和反向引物；所述内参体系中包括miR-125b和miR-205的内参U6的正向引物和反向引物，SPRY4-IT1的内参U6的正向引物和反向引物，GAS5-AS1和circSMARCA5的内参GAPDH的正向引物和反向引物；针对所述miR-125b的正向引物的核苷酸序列如SEQIDNo.6所示，反向引物的核苷酸序列如SEQIDNo.7所示；针对所述miR-205的正向引物的核苷酸序列如SEQIDNo.10所示，反向引物的核苷酸序列如SEQIDNo.11所示；针对所述SPRY4-IT1的正向引物的核苷酸序列如SEQIDNo.12所示，反向引物的核苷酸序列如SEQIDNo.13所示；针对所述GAS5-AS1的正向引物的核苷酸序列如SEQIDNo.16所示，反向引物的核苷酸序列如SEQIDNo.17所示；针对所述circSMARCA5的正向引...
【专利技术属性】
技术研发人员：涂建成，陈珊珊，景伟，罗萍，李南迪，张献伟，梁纯子，邱石黎，谭茜，喻亚兰，朱满，王颖超，刘雪芳，周虎，陈浩，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42
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