The present invention provides a primer group for detecting mutant FLT3_ITD based on digital PCR and its application. The primer group comprises a pair of primers and two probes, each of which is marked with different fluorescent markers. The primers are used to identify wild-type and FLT3_ITD mutants based on digital PCR, and to classify and classify FLT3_ITD mutants. The primer group is used for differential detection, which is simple, fast and low in cost. It is more suitable for rapid, economical and high throughput clinical detection of patient samples without obtaining specific mutation sequences.
【技术实现步骤摘要】
一种基于数字PCR检测突变型FLT3-ITD的引物组及其应用
本专利技术属于基因突变检测
,尤其涉及一种基于数字PCR检测FLT3-ITD的突变方法。
技术介绍
FLT3(Fms-liketyrosinekinase,FMS样的酪氨酸激酶3)属于III型受体酪氨酸激酶(receptortyrosinekinaseIII,RTKIII)家族成员。许多临床研究证实FLT3的激活突变在急性髓细胞白血病(AML)的发生及疾病的进展中起到十分重要的病理作用。已证实的FLT3的激活突变主要有:内部串联重复(Internaltandemduplication,ITD)和活化环中的点突变(Pointmutationintheactivationloop,TKD)。由于FLT3-TKD的发生率较低,且与其相关的临床特征尚不明确,但FLT3-ITD的临床特征却很明确,具有临床预后较差,易复发等独特的临床特征。因此,通过对FLT3-ITD突变进行检测用于预测疾病的进展、指导AML患者的治疗和预后,或将其作为白血病患者化疗药物有着重要的意义。FLT3-ITD检测可用基因组DNA为模 ...
【技术保护点】
1.一种基于数字PCR检测突变型FLT3‑ITD的引物组,其特征在于:所述引物组包括一对引物及两个探针,每个所述探针上标记有不同的荧光标记。
【技术特征摘要】
1.一种基于数字PCR检测突变型FLT3-ITD的引物组,其特征在于:所述引物组包括一对引物及两个探针,每个所述探针上标记有不同的荧光标记。2.如权利要求1所述的一种基于数字PCR检测突变型FLT3-ITD的引物组,其特征在于:所述荧光标记包括但不限于采用FAM荧光分子、HEX荧光分子进行标记。3.如权利要求1所述的一种基于数字PCR检测突变型FLT3-ITD的引物组,其特征在于:所述引物组序列为:正向引物:TACAGGTGACCGGCTCCCAGA;反向引物:CTGCAAAGACAAATGGTGAGTACGTGC;探针1:ACGTTGATTTCAGAGAATATGAATATGATC;探针2:AGTTTCCAAGAGAAAATTTAGAGTTTGGTA。4.如权利要求1所述的一种基于数字PCR检测突变型FLT3-ITD的引物组的应用,其特征在于:所述引物组应用于鉴别野生型与FLT3-ITD突变型及对FLT3-ITD突变型的类别进行判断、分组。5.如权利要求4所述的一种基于数字PCR检测突变型FLT3-I...
【专利技术属性】
技术研发人员:王雅琦,凌云峰,张华,李琛,
申请(专利权)人:苏州锐讯生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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